Příprava osteoprogenitornogo štěp in vitro

Výzkumný záměr: promítat trojrozměrný transplantaci osteoprogenitorových in vitro.

Materiály a metody. Vzhledem k tomu, lešení různých buněčných linií použity vzorky hydroxyapatitu, sklokeramiky, houbovité a kortikální demineralizované kostní matrice, biotmate riálu «Osteomatryks» ( «Konektbyofarm», Rusko). byla použita metoda kultivace buněk pro izolaci a expanzi multipotenciální mesenchymálních stromálních cellss (MMSC) kultur a periostu odvozených z buněk (PDC). Před cell`s setí na nosiči byly MMSC navodit diferenciaci na vyvinuté a patentované námi technologií. Byla použita metoda značení plasmatické membrány podle Intravitální barvivy Fluoreccent Green PKH67 a Red PKH26 ( «Sigma», USA) pro zlepšení vizuálního pohledu po umístění buněk na scaffold`s plochách. Cytochemické metoda byla použita pro detekci aktivity alkalické fosfatase s použitím z BCIP / NBT Liquid substrátu systému ( «Sigma», USA).

Výsledky. Za určitých podmínek kultivace byly MMSC uveden na osteogenní linie, která byla potvrzena pozitivním alkalické fosfatázy barvení. Histologické příprava připomíná kostní tkáně.

Závěry. Tato technologie umožňuje získání 3D-osteoprogenitive transplantaci ex vivo.


Účelem této studie.

Pro návrh trojrozměrný in vitro osteoprogenitorny štěp.

Materiály a metody.

Jako nosiče různých buněčných linií za použití hydroxyapatitu vzorků, sklokeramika, demineralizované kortexu a spongiózní kostní matrix, biomateriál "Osteomatrix" ( "Konektbiofarm", Rusko). Způsob kultivace buněk byla použita pro izolaci a měřítku kultur multipotentních mesenchymálních stromálních buněk (MMSC), periostu a progenitorových buněk (PKN). Před setí buňky na nosiči bylo provedeno bioosteoinduktsiyu ITC bylo vyvinuto a patentováno nás technologií. Pro zlepšení vizuální pozorování umístění buněk na povrchu používá skafoldov plazmového způsobu označování membrána vitálních barviv RKN67 RKN26 zelená a červená Fluoreccent ( «Sigma», USA). Pro detekci alkalické fosfatázy byla použita cytochemickými metoda s použitím substrátu BCIP / NBT Kapalný substrát systému ( «Sigma», USA).

Výsledek.

ITC za zvláštních podmínek kultivace indukovaných osteogenní způsobem, který byl potvrzen pozitivní barvení pro alkalickou fosfatázu. Histologicky, lék se podobá kosti.

zjištění.

Tato technologie umožňuje 3D osteoprogenitorny štěp ex vivo.


¹Papadopoulos AG, ²Oksimets VM, ¹Oberemko AV, ²Magomedov YA
¹Státní instituce „Institute of Emergency a rekonstrukční chirurgie. VK Gusak lékařských věd Ukrajiny "²Výzkumný ústav traumatologie a ortopedie z Doněcku Národní Lékařské univerzitě. M. Gorkij, Doneck, Ukrajina