GuruHealthInfo.com

Zdravotnické právo: právo, dokumenty, úkoly, pravidla, akty.

zdravotnická legislativa


Příloha N 6UTVERZhDENOPrikaz MOH Rossiiot z 09.01.1998 N 2INSTRUKTSIYAPO odstranění ze séra ANTIREZUSANTITEL JINÝCH SPETsIFIChNOSTIObschie O zařízení praktické činnosti podle definice Rh prinadlezhnostikrovi největší komfort je použití syvorotokantirezus krevní skupina AB (IV), nesoderzhaschihgruppovyhagglyutininov alfaibeta.Takiesyvorotkiyavlyayutsyauniversalnymi bylo možné určit, Rh prinadlezhnostv krevní skupina na jakémkoli systému AVO.Syvorotki antirezus, které patří do skupiny g (i), a (II) a B (III), a to i mo Gut být převedeny na univerzálních putemabsorbtsii nebo jejich alfa aglutinin skupina ibeta.Pomimo gruppovyhagglyutininovispolzovaniyusyvorotkiantirezus neutralizační zasahovat k dispozici také v některých případech izoimmunnyeantitela jiné specifičnosti, většina anti-C a anti-E. Eslieti mají nízké titr protilátky, mohou být odstraněny pomocí ředění nebo pomoschiabsorbtsii syvorotki.Ispolzovanie universal sera antirezus uproschaetrabotu, zvyšuje efektivitu laboratorní služby a isklyuchaetpoluchenie chybný výsledek v důsledku nesouladu gruppysyvorotki antirezus a studoval eritrotsitov.Dlya uvolnění sérové ​​aglutinační antirezus alfa, beta a protilátky z anti-C a anti-E mohou použít různé metody: a) neutralizující a-aglutininu skupinu a skupinu betasootvetstvuyuschim m látka obsažená v amnioticheskoyzhidkosti (viz. str. 1) -b) neutralizace alfa aglutinin skupina betaestestvennym skupinu a A a B látku (látky Vitebsk) (viz. str. 2) -c) absorbtsiyugruppovyhagglyutininovalfai betarezus negativní erytrocyty nachází Konvoluční kroviposle jejich odstranění ze séra (viz. str. 3) až d) neutralizaci skupinu aglutininy alfa a beta putemrazvedeniya sérum (viz. str. 4 a) až e) absorpce anti-C a anti-E etoyspetsifichnosti erytrocyty (viz. str. 5 a) až e) neutralizace anti-C a protilátkou anti-E podle razvedeniyasyvorotki (viz. str. 6) .1. Neutralizace skupina aglutininy alfa a beta v pomoschiamnioticheskoy kapaliny *>Amniotické soderzhitrastvorennuyugruppovuyusubstantsiyu kapalina, která odpovídá fetální krevní skupiny. Může bytispolzovana jak v nativní formě a předem vysushennayai pak se rozpustí v destilované vodě (příprava tekutého a obrabotkuamnioticheskoy cm. S. 8) .---------------------- ---------- *> - Plodová voda a neutralizuje alfa betaantitela které patří do třídy IgM, a dílčí alfa betaantitela které patří do třídy IgG, bez neutralizace neytralizuyutsya.Dlya aglutininy alfa a beta ke skupině beta Oalfa syvorotkeantirezus (I) za použití plodová zhidkostgruppy AB (IV) nebo směs plodová tekutina skupina vzorky (II) a V (III). Pro neutralizaci aglutininu beta syvorotkegruppy Abeta (II) za použití plodové vody z B (III) .Pro neutralizace v séru aglutininy alfa antirezus gruppyValfa (III), za použití plodové vody z A (II) .Pro úplné vyčerpání ve skupině aglutininu iskhodnoysyvorotke antirezus provádí optimálního výběru sootnosheniyaamnioticheskoy kapaliny a sérum neutralizuje antirezus, dlyachego: - a racku pět zkumavek symboly 1: 2,1: 3, 1: 4, 1: 5, 1: 6, všechny trubky 2 pro výrobu tekutého kapliamnioticheskoy ti - poslevysushivaniya-- nativní nebo rozpuštěný v první zkumavky se přidá 4 kapky neytralizuemoysyvorotki, 6 kapek do druhé, třetí - 8 kapek, čtvrtou -10 kapičky v pátém - 12 kapel-- obsah se míchá a nechá se 10 minut prikomnatnoy teplotě - po 10-minutové expozici směsi ke každému probirkikontroliruyut rovině napolnotu neytralizatsiisostandartnymi Rh negativní červené krvinky soderzhaschimiantigen odpovídající neutralizované agglyutininam-- posledního ředění, ve kterém není arr yutinatsiya (čas pozorování 5 minut), byl přijat pro optimální sootnoshenieamnioticheskoy tekutiny a neutralizuje syvorotki-- pokud aglutinace na všechna ředění gotovyatrazvedeniya 1: 7, 1: 8, 1: 9 a pokračovat ve studiích jako skazanovyshe-- po vybrána optimální poměr se osnovnomuobemu séra antirezus přidán kolichestvoamnioticheskoy odpovídající kapalinu a míchá se jim. Po 10-20 minut posleperemeshivaniya opět kontrolována v séru absorbance úplnost naploskosti se vzorky 6-8 Rh-negativní erytrocyty gruppyA (II) a V (III), - dále v séru vyšetřeni a v souladu s"Pokyny pro výrobu standardního séra a reagentaantirezus".Poznámka: Za účelem usnadnění získávání univerzální sera izsyvorotok antirezus skupinu Abeta (II) a Valfa (III), jejich mozhnopredvaritelnosmeshivat, chtopozvolyaetneytralizovatodnomomentno aglutininy alfa a beta plodovou zhidkostyugruppy AB (IV) nebo směs plodové vody z A (II) igruppyV (III). Předmísení syvorotkiprotivopolozhnyh skupiny také vhodné, protože při etomproiskhoditchastichnayavzaimnayaneytralizatsiya gruppovyhagglyutininov, které snižuje množství plodové vody potřebné pro úplnou neutralizaci, a tím ředění snizhaetsyastepen vstřebatelné syvorotki.Ispolzovanie vysuší plodovou zhidkostiPri nízký titr v séru antirezus, omezující eerazvedenie pro suché práškové neytralizatsiiagglyutininovtselesoobraznoispolzovat , Pro neutralizaci pokračovat stejným způsobem - sopredeleniya optimální poměr a sérum antirezus suhogoporoshka získané z plodové vody, a to: - A racku čtyř trubek číslované, ke které činí 0,5 ml séra antirezus-- první trubice se přidají 2 mg sušených amnioticheskoyzhidkosti, druhý - 4 mg, ve třetím - 8 mg, a ve čtvrtém - 16 mg.Soderzhimoe trubek se míchá až do úplného rozpuštění prášku při pokojové iostavlyayut temperature-- po 10 minutách se provádí na zkušební rovině polnotune ytralizatsii se skupinami erytrocyty a (II) a V (III), a poměr vybirayutoptimalnoe ingredientov-- vybraný poměr se použije pro výrobu osnovnogoobema syvorotki-- dále zkoumané sérum a zpracovány v souladu s"Pokyny pro výrobu séra a reagenčních antirezus"0,2. Neutralizace skupina alfa-aglutininu a specifičnost betaestestvennymi skupiny látek A a B (látka Vitebsk) Skupina spetsificheskieveschestvaAiVyavlyayutsyavysokomolekulyarnymi polysacharidy připraví podmínky vproizvodstvennyh z prasečí sliznice a jejich loshadinyhzheludkov enzymatickým štěpením a čištění posleduyuschimosazhdeniem s organickými rozpouštědly. Kolichestvogruppovogo určitá látka nutná pro neytralizatsiiantitel sérum závisí na aktivitě látky. Dlyaneytralizatsii skupina na sérové ​​aglutininy antirezusdobavlyayut skupina konkrétní látky z výpočtu: - do 1000 ml séra antirezus G (i) - 0,1 g gruppovogoveschestva A a 0,1 g - skupina látka V- do 1000 ml séra antirezus skupiny A (II ) - 0,1 ggruppovogo látka B do 1000 ml séra antirezus skupiny B (III), - 0,1 g gruppovogoveschestva A.Dlya rozpouštění skupina látky nezbytné to kolichestvosnachala rozetře se skleněnou tyčinkou ve zkumavce nebo chasovomstekle s malým množstvím (1 ml) séra antirezus, vyhřívaný 37sh až C, pak tato skupina přirážky látka převedena množství sérového antirezus pečlivě opakovaně smyvayaego sérum ze skla. Sérum se míchá antirezus sgruppovym látka a umístí se do inkubátoru po dobu 3 hodin byla peremeshivayakazhdye 30 minut.Posle toto sérum umístěných v chladničce při 4SH C nemenee než tři dny, a pak zkoumána aglutinaci deska nasoderzhanie skupinu s 6-8 obraztsamirezus-negativní krevní skupiny a (II), a V (III) .Otsutstvie aglutinace znamená, že skupina agglyutininypolnostyu neutralizován. Přítomnost aglutinace indikuje nepolnuyuneytralizatsiyu gruppovyhagglyutininov.Vsluchae nepolnoyneytralizatsii skupiny na sérové ​​aglutininy znovu dobavlyayuttakoe stejné nebo vyšší (0,5 g) množství látky skupiny ivsya postup povtoryaetsya.Pri úplná neutralizace skupiny aglutininů syvorotkuissleduyut a dále zpracuje v souladu s "Instrukce poizgotovleniyu standardního séra a reaktantu antirezus"0,3. Absorpce group aglutinin RH otritsatelnymieritrotsitami závity na krevní skupina AB (IV) konvoluce neprané krevní skupina AB (IV), přičemž zbývající sérum posleotsasyvaniya antirezus přípustné 4-8sh skladovány při 1-2 absorpce C vtechenie sutok.Dlya ochladí závity rozmělní s holemi a pomoschisteklyannoy přidá se a ochladí se syvorotkuantirezus v množství 1 / 6-1 / 3 objemových vzhledem k objemu, který zaujímá rozdrceného svazku (300 ml konvoluce prilivayut50-100 ml séra vstřebatelný, v závislosti na aktivnostigruppovyh mravence Itel). Sérum se opatrně smíchá s balíčkem, nechá se stát po dobu 18-20 hodin při teplotě 4-8sh C, pak odděleny otsvertka tsentrifugirovaniya.Dalee séra se kontroluje na rovině se vzorky 6-8 Rh negativní červených krvinek a v případě úplné absorpce gruppovyhagglyutininov dále zpracuje a testuje v souladu s"Pokyny pro výrobu séra a reagenčních antirezus"0,4. Neutralizace skupina alfa-aglutininu a ředění betapri pomoc séra neutralizovat syvorotkiDlya antirezus izotonicheskimrastvorom NaCl zředěného séra speciálně vybraná skupina AB (IV) ilistandartnym skupina protilátky razvoditelem.Neytralizatsiya pomocí ředění vozmozhnatolko pouze tehdy, když velký rozdíl titr skupina a Rh antitel.Naprimer v případě, že titr protilátek skupina 1: 8 v séru sleduetrazvesti nejméně 16 krát, což je možné pouze v případě, že titr protilátek v rhesus se pokračuje po zředění nizhetrebovany nejsou zobrazeny na standardní séra antirezus.V během provozu na začátku by měly být připraveny probnyerazvedeniya antirezus sérového titru a zkoumat Rh protilátky, stupeň neutralizace atakzhe skupiny s 6-8 obraztsamirezus erytrocytů protilátek negativní skupiny A (II), a V (III). tím, že udržuje dostatečný titr protilátek a rhesus polnoteabsorbtsii skupiny protilátek zředí primární svazek syvorotkiantirezus dále zkoumána a byla zpracována v souladu s"Pokyny pro výrobu séra a reagenčních antirezus"0,5. Odstranění séra antirezus doprovodných antitelanti-C a anti-EEsli kteréhokoliv séra kroku ošetření antirezus Dvyyasnitsya, že obsahuje také jiné protilátky antirezus, může tato být odstraněny absorpcí nebo razvedeniyasyvorotki.Absorbtsiya provedena třikrát promyje erytrocytů, v vzyatymipriblizitelno polovina objemu ve vztahu k séru. Esliv sérum přísada má anti-S protilátek fenotypu erytrocytů absorbtsiiprimenyayutsya Ccddee, a v případě, že primesanti-E, červených krvinek fenotyp ccddEe. Absorpce se provádí vtechenie 2-3 hodiny. při 37sh C za míchání testu sposleduyuschey séra na specifičnosti a protilátek souvisejících aktivnost.Esli neodstranila, sorpce může povtorit.Razvedenie sérum antirezus odstranění soputstvuyuschihantitel se může provádět při titrem protilátek anti-D, nebyla menší chem1: 128-1: 256 titr příbuzných protilátek není vyšší než 1: 2.Syvorotku antirezus zředí isotonickým roztokem chloridu sodného, ​​sérum - razvoditelem nebo standardní razvoditelem.V začínající by mělo stanovení, že issledovatna úplnost neutralizační soputst uyuschih sohrannostdostatochnogo protilátky a titr protilátek Rhesus D. Když je objemová rezultaterazvodyat pozitivním sérem. Po absorpci, takže iposle zředění séra objem primární jejich zpětného obrabatyvayuti zkoumány dále v souladu s "Pokyny pro izgotovleniyustandartnyh séra a činidla antirezus"0,6. Příprava plodové vody a její zpracování ve výrobním dlyaispolzovaniya sera antirezusAmnioticheskuyu kapalina shromážděná v nemocnicích z kazhdoyrozhenitsy jednotlivě do čistých lahviček. Z těhotné ženy mohou bytpolucheno 100 až 1500 ml. Etiketa na lahvi indikuje familiyurozhenitsy, datum zachycení a počet možných příslušnosti skupiny krovinovorozhdennogo.Gruppovaya plodová voda sootvetstvuetgruppe krevními novorozhdennogo.Oplata zasboramnioticheskoyzhidkostiproizvoditsyauchrezhdeniyami krev služba je podobný placení retroplatsentarnuyukrov finančních prostředků na pořízení plodové vody do krovi.Podgotovka ispolzovaniyuGruppovuyu příslušnosti plodové ustanavlivayutputem tekutiny rozhodujícího členství ve skupině krev novorozhdennogoi Ještě metodomistoscheniyaagglyutininovalfaibeta vgemagglyutiniruyuschey séru skupina O (I). Pro tento probirkesmeshivayut stejných objemových (1 ml) se standardním gemagglyutiniruyuscheysyvorotki 1:32 titr testovací plodové vodě. Směs se míchá a nechá se stát po dobu 10 minut. při pokojové temperature.Zatem směsi séra a amniotických naploskosti tekutin zkoumaných se standardními erytrocytů ze skupiny A (II) a (III) podle koordinovat erytrocyty a směs musí odpovídat primerno1 10, expozice minut.Traktovka 5-7 na výsledcích Přítomnost aglutinace v kapkách se erytrocyty skupiny a (II) v igruppy (III) ukazuje nepřítomnost amniotické zhidkostigruppovyh antigeny a a B, to znamená, jeho příslušnost k gruppeO (I). Takový plodová voda není vhodná pro neytralizatsiigruppovyh agglyutininov.- nepřítomnosti aglutinaci erytrocytů v poklesu A (II) a na přítomnost aglutinace s erytrocytů v poklesu skupiny (III) ukazuje plodovou vodu, patřícího do skupiny A (II) .- Nepřítomnost aglutinace v poklesu s erytrocytů ve skupině B (III) a její přítomnost erytrocytů skupiny a (II) označuje naprinadlezhnost plodové vody do skupiny B (III) .- absence aglutinaci erytrocytů kapičky gruppyA (II), a skupiny B (III) indikuje prinadlezhnostamni cal tekutiny do skupiny AB (IV) .Gruppovuyu příslušenství uloženo na štítku na ampuli s kotoruyunakleivayut zhidkostyu.Kontrol plodové vody do plodové spetsifichnostSleduet zvážit možnost vniknutí krve amnioticheskuyuzhidkost porodu, a proto, že je třeba issledovatkazhdy amniotické vzorku tekutiny na přítomnost plodové gruppovyhagglyutininov.Issledovanie kapalina s erytrocytů gruppyA (II) a (III) se provádí analogicky jako v definici gruppovoyprinadlezhnosti krovi.Nalichie aglutinační OZNA vyprázdní přítomnost amniotické zhidkostigruppovyh krev aglutinačních matek. Takový vzorek neprigodendlya raboty.Filtratsiya a zachování plodovou zhidkostiPosle určit členství ve skupinách a řízení naspetsifichnost plodová voda se filtruje přes filtr nebo obychnyybumazhny za vakua přes porcelánu Buchnerově nálevce, do které se umístí filtrační papír drcené tolschinoy5-7 mm. Po filtraci plodové vody stanovitsyaprozrachnoy.Konservirovanie z kyseliny borité na bázi 2 Grňa 100 ml nebo 1 g azidu sodného na 1000 ml.Srok skladování plodové vody ve 12 měsících 4-8sh S.Vysushivanie plodové zhidkostiS k prodloužení doby použitelnosti se plodové zhidkostvysushivayut 150-200 ml lahvičky kapacita 250-500 ml. Naflakony lepené etikety indikující amnioticheskoyzhidkosti skupina ABO systém, jeho původního množství a datyvysushivaniya.Vysushennuyu plodové vody byl skladován při komnatnoytemperature. Skladovatelnost 5 let. Amnioticheskuyuzhidkost vysuší před použitím se zředí destilovanou vodou objemu doiskhodnogo. Po doporučení analogichnonativnoy.Metodicheskie rozpouštění za použití "Odstranění syrovátky antirezusantitel drugoyspetsifichnosti"Schválený Ministerstvomzdravoohraneniya SSSR 27.listopadu 1990 N 10-11 / 136, schitatutrativshimi síly ode dne schválení této instruktsii.Nachalnik Upravleniyaorganizatsii meditsinskoypomoschi naseleniyuMinzdrava RFA.I.VYaLKOVPrilozhenie N 7UTVERZhDENOPrikaz Rossiiot ministerstva zdravotnictví 09.01.1998, N 2INSTRUKTSIYAPO STANOVENÍ Rh PŘÍSLUŠENSTVÍ KROVII. VVEDENIEOpredelenie Rh příslušenství je k identifikaci osob veritrotsitah systém Rezus.V systému Rhesus D antigen obsahuje šest antigeny: D, D, C, c, E, e, která je určena příslušným antisyvorotok.Antigen d sérologicky nebyla detekována. Tam takzheraznovidnosti Rh antigeny: Du, Cw, cv, cx a drugie.Antigeny Rhesus setkal s následující frekvencí: D - 85% C - 70% C - 80% E - 30% e - 97,5% Rhesus antigeny mají sposobnostyuvyzyvatobrazovanie isoimmune antitel.Naibolee aktivní v tomto ohledu je antigen D, kotoryyi míněno Rh. Tento nedostatek antigenu D nalichiyuili všichni lidé se dělí na Rh-Rh polozhitelnyhi otritsatelnyh.Razlichnye kombinaci antigenů krevních skupin Rh Výběr lyudeysostavlyayut 28 Rhesus (tab. 1). Čtrnáct nihsoderzhitsya antigenu D - jsou Rh-pozitivní a drugiechetyrnadtsat neobsahují antigen D (dolní část tabulky) - ihotnosyat na otritsatelnym.Tablitsa 1SISTEMA Rh Rh + ----- + --------- -------------------------------------------------- - + | N | Rh pozitivní || + ---------------------- + ------------- + ---------- + - ----------- + | p / p | fenotyp | v% frekvence | Genotyp | v% incidence | + ----- + ---------------------- + ------------- + ---------- + ------------ + | 1-2 | CCDEE CwCDEe | 0,00 | || + ----- + ---------------------- + ------------- + ---- ------ + ------------ + | 3 | SSDEe | 0,07 | CDE / CDE || + ----- + ---------------------- + ------------- + - --------- + ------------ + | 4 | CcDEE | 0035 | CDE / CDE | 0006 || | | | CDE / CDE | 0029 | + ----- + ---------------------- + ------------- + ---------- + ------------ + | 5 | CcDEe | 13,69 | CDE / CDE | 12,24 || | | | CDE / CDE | 0,01 || | | | CDE / CDE | 0,97 || | | | CDE / CDE | 0,27 || | | | CDE / CDE | 0,19 || | | | CDE / CDE | 0006 | + ----- + ---------------------- + ------------- + ---------- + ------------ + | 6 | CwcDEe | 1,23 | || + ----- + ---------------------- + ------------- + ---- ------ + ------------ + | 7 | ccDEe | 11.82 | CDE / CDE | 10.04 || | | | CDE / CDE | 0,72 || | | | CDE / CDE | 0,06 | + ----- + ---------------------- + ------------ - + ---------- + ------------ + | 8 | ccDEE | 2,49 | CDE / CDE | 2,16 || | | | CDE / CDE | 0,33 | + ----- + ---------------------- + ------------ - + ---------- + ------------ + | 9 | CcDee | 31,93 | CDE / CDE | 29,90 || | | | CDE / CDE | 1.98 || | | | CDE / CDE | 0,05 | + ----- + ---------------------- + ------------- + - -------- + ------------ + | 10 | CwcDee | 2,38 | || + ----- + ---------------------- + ------------- + ---- ------ + ------------ + | 11 | CCDee | 16.81 | CDE / CDE | 16,01 || | | | CDE / CDE | 0,80 | + ----- + ---------------------- + ------------- + - -------- + ------------ + | 12 | CwCDee | 2,60 | || + ----- + ---------------------- + ------------- + ---- ------ + ------------ + | 13 | CwCwDe | 0,00 | || + ----- + ---------------------- + ------------- + ---- ------ + ------------ + | 14 | ccDee | 2,21 | SDE / CDE | 2,10 || | | | CDE / CDE | 0,11 | + ----- + ---------------------- + ------------- + - -------- + ------------ + | Rh-negativních | + ----- + ---------------------- + ------------- + - -------- + ------------ + | 15 | ccddee | 12,71 | CDE / CDE || + ----- + ---------------------- + ------------- + - --------- + ------------ + | 16 | Ccddee | 1,54 | CDE / CDE || + ----- + ---------------------- + ------------- + - --------- + ------------ + | 17 | CCddee | 0,03 | CDE / CDE || + ----- + ---------------------- + ------------- + - --------- + ------------ + | 18 | Cwcddee | 0035 | Cwde / CDE || + ----- + ---------------------- + ------------- + - --------- + ------------ + | 19 | ccddEe | 0070 | CDE / CDE || + ----- + ---------------------- + ------------- + - --------- + ------------ + | 20 | CcddEe | 0,35 | CDE / CDE || + ----- + ---------------------- + ------------- + - --------- + ------------ + | 21-28 | CwCddee CwCwddee | | ||| | ccddEECcddEE | 0,00 | ||| | CCddEECCddEe | | ||| | CcddEeCwCddEe | | || + ----- + ---------------------- + ------------- + ---- ------ + ------------ + II. Obecné připomínky 1. Stanovení Rh Rh prinadlezhnosti.Opredelenie dodání uskutečněných osobou, která má zvláštní podgotovku.Opredelenie Rh prinadlezhnostiretsipientov proizvoditsyastandartnoy séra anti-D, čímž je možné se na Rh pozitivní (Rh +) a Rh-negativní rozdělit (RH -). Na rozdíl od příjemců definice Rh prinadlezhnostikrovi dárce se provádí ve dvou stupních: nejprve krevní donorovissleduetsya standardní sérum anti-D, a pak se dárci krve, které měli negativní reakci se sérem anti-D, vyšetřování uyutdopolnitelno standardní sera antirezus, soderzhaschimiantitela anti-C a anti-E. Anti-C a anti-E mohou být vsyvorotke a to jak v čisté formě nebo v kombinaci s antitelamianti-D, například anti-D + C, anti-D + E nebo anti-D + C + E.V číslo Rh negativních dárců je připočítán pouze tomu, jehož krev dává negativní reakci se všemi sér, tzn. neobsahuje žádné ze tří antigenů Rh D, C, je zapotřebí E.Inogda jako další výzkum provádět UY ostatní - u pacientů s podezřením na izosensibilizatsiyu a uberemennyh zhenschin.Rezultat Krev Rh příslušenství donorovzapisyvaetsya ve zvláštních seznamech nebo časopisy a knihy listedonorskogo časopisu (karta) s datem a podepsány osobami, které provádějí opredelenie.Rezultat určení Rh zásobování krví pacientů andother osoby zapsané ve zvláštním registru a vytvoření sukazaniem atd. Vy a podepsány stranami, je učiněno rozhodnutí. Etotblank lepené v historii a navíc výsledek zobrazí na této formě je zaznamenán ošetřující lékař pravomverhnem rohové štítkem a utěsněny anamnézu označující egopodpisyu daty.2. Účetní Skupina syrovátkové doplňky antirezus.Syvorotki antirezusizgotavlivayutsyaobychnov forma"univerzální", tj zbaveny protilátek anti-A a anti-skupina-V.Takie séra vhodných pro stanovení Rh prinadlezhnostikrovi jakákoli skupina lidí AVO.Odnako systému, pokud je produkován v séru antirezus jiný gruppposisteme ABO, v těchto případech musí být opredeleniirezus-skupina příslušnost považovány spetsifichnostsyvorotki. Sérum antirezus G (I), který patří opredelyaetsyarezus pouze skupina O erytrocyty (I) - syvorotkoyantirezus skupina A (II), - pouze erythrocyty skupin g (i) a A (II) -syvorotkoy antirezus skupiny B (III), - pouze erytrocyty ze skupiny (i) a ve (III) - sérum antirezus skupina AB (IV) a spetsialnoprigotovlennoy "univerzální" Rh-příslušnost je určena veritrotsitah skupina AB (IV) a jakékoliv jiné skupiny krovi.3. Ovládací issledovaniya.Pri každá studie nebo provedla sérii issledovaniyneobhodimo zkontrolovat specifičnost a aktivita syvorotkiantirezus dát kontrolu. Chcete-li použít kontrolní standartnyerezus-pozitivních erytrocytů g (i) nebo stejnou skupinu jako zkoumaného chtoi krve a standardních Rh-negativní erytrocytů eritrotsity.O standardní cm. "Pokyny pro odběr a uchetukrovi získané od dárců s malými dávkami pro erytrocyty prigotovleniyastandartnyh"0,4. Funkce standardní séra pro stanovení sérového antirezus.Standartnye Rh prinadlezhnostimogut obsahovat Rh protilátky jiného tvaru - plně inepolnye (viz. "Pokyny pro studium sérových protilátek nalichierezus"). Každá z těchto protilátek jsou aktivní pouze osobyhusloviyah tak technologickým postupem pro určování Rh prinadlezhnostizavisit, na kterém Rh protilátky jsou standartnoysyvorotke.Metod použití každého standardního séra antirezusukazyvaetsya doprovodné instruktsii.III. Různé metody pro stanovení definice Rh Rh PRINADLEZhNOSTIMetod závisí na příslušenství formyantitel standardního séra a způsobu, jakým izgotovleniya.Pri problém sérového to antirezus přikládá instrukce kratkayasoprovoditelnaya popisující metodu kotorogoprednaznachena tuto sérii vydané syvorotki.1. Stanovení Rh Toaletní reakce slepení sprimeneniem želatina in vitro vyhřívaný 46-48sh ersed) Speciální osnaschenie.Standartnaya antirezus sérum anti-D s částečným antitelami.Standartnye Rh + erytrocyty a Rh- pro kontrolya.Tsentrifuzhnye nebo jiné trubky s kapacitou 10 ml.Vodyanaya Vana 46-48sh C. Termostat suchý 46-48sh C.10% roztoku želatiny. (Želatina může být uložen s sodným konservantom- sulfatsilom (Albucidum) - rychlost 100 mg Albucidum o 10 ml 10% roztoku želatiny) s .Lupa 2-4 násobné uvelicheniem.b) předúprava testované krve a standartnyheritrotsitov. Krev ke studiu je třeba brát v kolichestve5-8 ml lahvičky bez stabilizátoru. Na nadpisatfamiliyu vitro, iniciály a krevní skupiny osoby, z nichž krov.Obychno přijaté po srážení krve na spodní počtu trubek ostaetsyanebolshoe volných červených krvinek, který sleduetupotreblyat pro výzkum. Pokud dostatek těchto erytrocytů, musí protřepat oddělit větší závitů kolichestvaeritrotsitov.Dopustimo obchod v krvi po dobu 2-3 dní při teplotě + 4-8sh S.Mozhno se krev fyziologický roztok nebo jiný stabilizátor limonnokislogonatriya (0,25 ml na 1 ml krve) , V etomsluchae erytrocyty je třeba vyprat, přičemž pro tento účel je trubice dolitdoverhu izotonický chlorid sodný, smíchat obsah svého itsentrifugirovat. Otmytyeeritrotsityispolzovatdlyaissledovaniya.Neposredstvenno před testováním krve může být užíván Izmest'ev prick prst se skleněnou tyčinkou a okamžitě umístěny do předem přivedenou vprobirku séra antirezus smíšené szhelatinom 1: 2 c) se stanoví technikou. Stát stanovuje dva ryadaprobirok počtem zkoumaných vzorků červených krvinek v každé řadě trubek ipodve standardní Rh-pozitivní irezus-negativní červených krvinek. Za každý dva probirkahnadpisyvayut příjmení a iniciály osoby, jejíž krev budetissledovatsya. Zkumavky byly sečteny. Ve stejném oboznachennyeprobirki (ve dvou řadách) se podává 1 kapka (0,05 ml), a ovládací issleduemyheritrotsitov - jedna kapka (0,05 ml) a Rh + standardní Rh- eritrotsitov.Vo přidá všechny trubky v první řadě jednu kapku ( 0,05ml) v séru antirezus.Vo všechny trubky (ve dvou řadách) se přidá dvě kapky (0,1 ml), 10% roztoku želatiny, předehřáté na počtu razzhizheniya.Vtoroy je řízen tak, aby se zabránilo vozmozhnogonespetsificheskogo skleivaniyaissleduemyh erytrocytů (pryamayazhelatinovaya vzorek) .Soderzhimoe míchá trubky vortexu IEM sprobirkami stativ a umístí do vodní lázně o teplotě 46-48sh C po dobu 15 minut nebo vsuhovozdushny termostat 25-30 minut.Pri extrakčních zkumavek z vodní lázně nebo termostatadolivayut něm 5-8 ml izotonického roztoku chloridu sodného a peremeshivayutsoderzhimoe o 1-2 násobně převrácením probirok.g) interpretaci výsledků. Zkumavky procházení na svetnevooruzhennym okem nebo lupu.Rezultat interpretovat na základě přítomnosti nebo nepřítomnosti aglutináty agglyutinatsiieritrotsitov.Pri Pozitivní výsledek je snadno vidět, protože červené hrudky v transparentním, téměř bělené zhidkosti.Pri negativní výsledek v ravnomernookrashennaya zkumavce viditelné ve světle červené barvy, opalizující zhidkost.Obraztsy erytrocyty dal aglutinaci sérem anti-D, jsou Rh-pozitivní (Rh +). Vzorky erytrocytů, Ned aglutinace sérem anti-D, - Rh negativní (Rh). Výsledky však vzít v úvahu, jak platí po proverkikontrolnyh vzorků, což potvrzuje specificitu a aktivnostsyvorotki antirezus, tedy v nepřítomnosti aglutinace sostandartnymi Rh-negativních erytrocytů homonymního gruppyi přítomnosti aglutinace se standardní Rh polozhitelnymieritrotsitami stejnojmenné skupinou nebo skupinou O (I). V probirkahvtorogo (kontrola) z množství aglutinace aglutinace dolzhno.Nalichie být v jakékoliv z řady kontrolní zkumavka (přímé vzorek želatina je pozitivní) indikuje nespetsifichnostireaktsii. Za těchto podmínek pozitivní výsledek s syvorotkoyantirezus nelze považovat za pravdivé. V takových sluchayahrekomenduetsya mytí erytrocyty zkoumány teplo izotonicheskimrastvorom NaCl pro eluci z nich a povtoritissledovanie autoprotilátek. Prisomnitelnom výsledek opredeleniyarezus-příslušenství by měla být použita metoda aglutinace vsolevoy prostředí pomocí sera antirezus, soderzhaschihpolnye antitela.2. Stanovení Rh příslušenství používající standartnogouniversalnogo činidla (bez zahřívání ve zkumavkách) .Spetsialnoe osnaschenie.standartny univerzálního reakčního činidla antirezus - anti-D-33% roztok poliglyukina standardní Rh + erytrocytů a Rh- pro řídicí-odstředivka trubek nebo jiných kapacitou 10 ml lupou 2-4 krát uvelicheniem.Predvaritelnaya se studie léčení krevní trebuetsya.Mozhet nelze použít krev odebírá přímo z místa vpichu peredissledovaniem prstu iosadok uloženy krev erytrocyty in vitro , Po vytvoření konvoluce krve odebrané bez stabilizatora.Dopustimo skladování krve po dobu 2-3 dní při 4-8sh S.Tehnika reakční stativu namontovány dvě řady trubek v počtu červených krvinek issleduemyhobraztsov v každé řadě a dvěma trubkami dlyastandartnyh Rh-pozitivní a Rh-negativní eritrotsitov.Na trubky vepsat jméno a iniciály o osobě, krev kotorogoissleduetsya.Vo všechny trubky v první řadě se podává 2 kapky (0,1 ml) standardního univerzálního reakčního činidla antirezus.Vo všechny trubky druhého (kontrola) je podávána řadou 2 kapek (0,1 ml) v izotonickém roztoku chloridu sodného a 1 kapka (0,05 ml), 33% roztok poliglyukina.V každá dvojice stejně označených zkumavek soglasnomarkirovke podávat 1 kapku (0,05 ml) krve zkoumána. Zkumavky určené pro kontrolu zavedeny standartnyerezus-pozitivní nebo Rh-negativní eritrotsity.Soderzhimoe trubky a míchá třepáním zatemmedlenno otáčí okolo osy položené téměř gorizontalnogopolozheniya naklápění tak, aby obsah toku přes její stěny. Takoerastekanie krev na stěnách trubek činí reakční boleevyrazhennoy. Obvykle aglutinace nastává již v techeniepervoy minutu, ale k vytvoření stabilní kompleksaantigen-protilátka reakci a odlišné, a také v viduvozmozhnosti zamedlennoyreaktsiiprislabovyrazhennoyagglyutinabelnosti erytrocyty, erytrocytů styku s reagentompri soustružnických trubky 3 se provádí se přidá 2- alespoň 3 minuty v min.Cherez trubce 3 ml izotonicheskogo0,85% roztoku chloridu sodného a směs se míchá obsah zkumavek 2-3 kratnymperevertyvaniem není vstryahivaya.Traktovka rezultatov.Probirki procházení na světelném nevoor oční adjoint nebo cherezlupu. Výsledek je interpretován podle přítomnosti nebo nepřítomnosti aglutinace agglyutinatsiieritrotsitov.Pri k dispozici ve formě velkých kusů nebo hlopeviz skleennyheritrotsitov na pozadí osvíceného zhidkostiissleduemuyu krve je považován Rh pozitivní (Rh +). Priotsutstvii aglutinaci (in vitro zachovány gomogennoeokrashivanie) studoval v krvi by měly být považovány Rh-negativní (Rh) , Avšak tyto výsledky by měly být považovány za skutečné kontrolní vzorky testu tolkoposle, tedy když polozhitelnoyreaktsii sostandartnymirezus-pozitivních červených krvinek, negativní - s Rh-negativní, a po prosmotrarezultatov ve druhém ovladači ryadu.Vo všechny trubky 2. dohled z množství aglutinace být nedolzhno.Nalichie aglutinace ve zkumavce kontrolní ryadaukazyvaet nanespetsificheskoeskleivanieeritrotsitovi proto, neumožňuje brát v úvahu výsledek výzkumu kakistinnyy.V tomto případě se doporučuje, aby promývací zkoumány eritrotsityteplym isotonického NaCl eluce n hautoantitel issledovanie.V a opakujte případě pochybností určit Rh prinadlezhnostisleduet uplatnit metodu aglutinační v prostředí solné, s plnou ispolzuyasyvorotku antitelami.3. Stanovení Rh příslušenství slepení vsyvorotochnoy reakční prostředí v rovině s podogrevom.Spetsialnoe Vybavení: Standardní antirezus séra anti-D se dílčí standardní protilátky a Rh + červených krvinek ke kontrole RH - plastová deska-vodní lázně 46-48sh krev zpracování S.Predvaritelnaya a studoval standartnyheritrotsitov.Krov ke studiu vzít v množství 3-5 ml na obychnyeprobirki bez stabilizátoru. Na vitro vepsat jméno, iniciály a krevní skupinu osobě, od níž je odebrán v krvi. Obychnoposle srážení krve na dně zkumavky zůstává nebolshoekolichestvo červených krvinek, které by měly být použity pro tyto reaktsii.Esli červené krvinky, je nutné oddělit intenzivní vstryahnutsvertok více eritrotsitov.Eritrotsity použit pro výzkum ve formě 5 až 10% suspenze vsobstvennoy sérem. Kaše byla připravena do oka ve stejné probirkahputem třepání soderzhimogo.Dopustimo krev uložené po dobu 2-3 dnů při 4-8sh S.Tehnika opredeleniya.Na plastové desky na zápis se používá na 1 bolshoykaple (0,1 ml) antirezus séru ve třech řadách horizontálně pouze 6 bodů (3 - jedna řada sér a 3 - další). Krometogo, se aplikuje na jeden bod větší kapky (0,1 ml) standartnoysyvorotki skupina AB (IV), neobsahující Rh protilátky (kontrola nanespetsificheskuyu aglutinace) .K první kapku každou sérii séra se přidá jedna kapka (0,05 ml), suspenze erytrocytů zkoumaného na druhou poklesu kazhdoyserii - 1 kapka (0,05 ml) ovládacího rhesus pozitivní krve pacienta se stejným názvem nebo skupiny g (i), a na treteykaple kazhdoyserii1kaplyu (0,05ml) kontrolnyhrezus-negativní erytrocyty nutně s gruppoykrovi pacienta stejné jméno systém ABO. Řídicí kapiček syvorotkoygruppy AB (IV), neobsahující Rh protilátka byla přidána 1 kapka (0,05 ml) testovaných erytrocytů. Kapky se míchá steklyannoypalochkoy talíř a ponoří do vodní lázně o teplotě 46-48sh C prohlížení 10minut.Traktovka rezultatov.Rezultaty studiích s jemným pokachivaniiplastiny a interpretovat přítomnost nebo nepřítomnost aglutináty agglyutinatsiieritrotsitov.Pri pozitivní výsledek je snadno rozlišit napochti bělené pozadí zhidkosti.Pri negativní výsledek zůstává pokles ravnomernookrashennoy červené tsvet.Obraztsy erytrocyty dal aglutinaci sérem anti-D, jsou Rh-pozitivní (Rh +). Vzorky polycythemia Aglutinace se získá syvorotkoyanti-D, yavlyayutsyarezus-negativní (Rh). Nicméně etirezultaty považovat za pravdivé pouze tehdy, když shoda jejich obeihseriyah sérového antirezus a po kontrole řízení obraztsoveritrotsitov potvrzuje specificitu a aktivitu syvorotkiantirezus, tj v nepřítomnosti aglutinaci erytrocytů standartnymirezus-negativní stejnojmenné skupiny a nalichiiagglyutinatsii standardní Rhesus pozitivní eritrotsitamiodnoimennoy skupinu nebo skupinu G (I), stejně jako v kontrolním otritsatelnomrezultate po kapkách se skupinou AB sérem (IV), nesoderzhaschey Rh protilátek. Přítomnost aglutinace v tomto kaplegovorit pro nespecifické vázání červených krvinek, a tudíž pozitivní výsledek se sérum antirezus uchtenkak nemůže být pravda. V těchto případech, Rh příslušnost sleduetopredelyat pomocí jiných metod issledovaniya.4. Stanovení Rh na kosmetiku reaktsieyagglyutinatsii antirezus anti-D sůl sredeSpetsialnoe osnaschenie.standartnye sérové ​​protilátky s plnou standardní Rh + erytrocyty a Rh- pro ovládání trubkami výšce 1,5 až 2,0 cm a o průměru 0,5-0,6 cm gladkimdnom zaoblené nebo desky pro imunologické reakce suglubleniyami stejné uspořádání a objem-lupa s 2-4-násobné zvýšení termostatem 37sh S.Predvaritelnaya zpracování krve a vyšetřován pro studium standartnyheritrotsitov.Krov používané v množství 0,5-1 ml na obychnyeprobirki, s získal 0,25 ml (5 kapek) izotonický rastvoralimonnokislogo sodný nebo jiný stabilizátor. Na probirkenadpisyvayut jméno, iniciály a krevní skupiny osoby z kotorogovzyata krve. Erytrocyty vypere, které v okrajové probirkidolivayut isotonickém roztoku chloridu sodného, ​​a obsah ihperemeshivayut tsentrifugiruyut.Mozhno se krev bez stabilizátoru. V tomto případě je krev obvykle poslesvertyvaniya in vitro se o kolichestvosvobodnyh erytrocyty. Pokud tomu tak není dostatek červené krvinky, sleduetintensivno shake svazek oddělit více kolichestvaeritrotsitov. Takto získané erytrocyty byly promyty, kakskazano vyshe.Iz promyje erytrocyty byly připraveny 2% suspenze, ke které 1kaplyu eritrotsitovperenosyat v oboznachennuyuprobirku respektive obsahující 49 kapek isotonického roztoku NaCl.2% suspenze erytrocytů pro použití issledovaniya.Dopustimo skladování krve po dobu 2-3 dní při teplotě 4-8sh S.Tehnika opredeleniya.V stativ namontovány dvě řady trubek v počtu červených krvinek issleduemyhobraztsov v každé řadě, a dva - pro kontroley.Predvaritelno stativu pokryté listem papíru. To slegkanakalyvayut otvory, jimiž a nastavit probirki.Protiv každá dvojice trubek vepsat na papíře iinitsialy jméno osoby, jejíž krev issledovatsya.Vo všechny trubky (jamková plotna) se zavádí na první série 1kaple (0,05 ml) v séru antirezus jedné sérii, všechny zkumavky (šachty) z druhé řady - 1 kapka (0,05 ml) v séru antirezusdrugoy seriii všechny zkumavky (šachty) obou řad 1 kapleizotonicheskogo roztok NaCl.V bylo přidáno v tomto pořadí určité dvojici trubek (mikrotitrační destičky) jednu kapku (0 , 05 ml) 2% váže ispytuemyheritrotsitov ESI, a kontrola - jedna kapka (0,05 ml), 2% vzvesikontrolnyh (standard), Rh-pozitivní-negativní irezus eritrotsitov.Soderzhimoe důkladně promísí vířením a umístěn na vtermostat 37sh C po dobu 1 hodiny. Pak může nechat trubice Nastola při teplotě místnosti po dobu 1,5-2 hodiny před té doby uchetarezultata.Za erytrocyty usazují na spodní, po kontaktu s sérum voydyav antirezus.Traktovka rezultatov.Probirki (tablet), by měla být považována podle zdroje světla podélné osinad uzavřen matný steklom.Rezultat interpretovat přítomnost nebo nepřítomnost agglyutinatsiieritrotsitov, který je exprimován v jiné formě sraženiny na pozitivní dne.Pri vzniklé sraženiny erytrocytů raspolagaetsyana nerovnoměrné spodní vrstva. Viditelné drsnost, houbovitý ilizernistost jeho struktury. Okraje kalu nejsou nikdy stejné, budou zakřivené, někdy zabalené uvnitř. V některých sluchayaheritrotsity uspořádaného jako halo kolem doutníkového zapalovač vlnité centrální chasti.Pri negativní výsledek erytrocytů pelety raspolagaetsyaravnomernym vrstvy bez drsností a nerovností, někdy s malou vůlí srdce. Jeho hranice jsou vymezeny soboypravilno krug.Diametr sraženiny v negativním výsledkem je vždy menší, než když polozhitelnom.Obraztsy erytrocyty dal aglutinaci se sérem anti-D, jsou Rh-pozitivní (Rh +), vzorky erytrocytů Ned aglutinace séra anti-D, - rhesus negativní (RH -). Nicméně výsledky počítají jako pravdivé v koincidenci séru antirezus vobeih série po kontrole kontrolnyhobraztsov potvrzení specifity a aktivity syvorotkiantirezus, tj. v nepřítomnosti aglutinaci erytrocytů standartnymirezus-negativní stejnojmenné skupiny a nalichiiagglyutinatsii standardní Rhesus pozitivní eritrotsitamiodnoimennoy skupinou nebo skupinou O (I) .Poznámka. Celé protilátky nezjistí slabý antigen Du.Povtornoe syvorotki.Posleopredeleniyarezus užití příslušenství od všech zkumavek jemně otsasyvayutsyvorotku (červených krvinek zůstávají v dolní části) a vyzvednout v probirku.Etu séru mohou být znovu použity vícekrát dlyaopredeleniya Rhesus pojištěn, dokud se jeho činnost vyčerpána, tj jak to bude se získá čirý aglutinaci s standartnymirezus-pozitivních červených krvinek a negativní reakce - sostandartnymi Rh-negativní eritrotsitami.IV. GENERAL PRIMECHANIYA1. Při určování příslušenství Rh metodaopredeleniya bez ohledu na výsledek se zaznamená jako pravdivý po vzorků proverkikontrolnyh, což potvrzuje specificitu a aktivnostkazhdoy série antirezus séru, např при отсутствии агглютинациисо стандартными резус-отрицательными эритроцитами одноименнойгруппы и наличии агглютинации со стандартными резус-положительнымиэритроцитами одноименной группы или группы О(I) и в другихконтрольных пробах, применяемых для каждого метода.2. Если при определении резус-принадлежности наблюдаетсяслабая или сомнительная реакция, то следует повторно исследоватькровь данного лица другими сериями сывороток антирезус и другимиметодами, включая метод агглютинации в солевой среде ссыворотками, содержащими полные антитела.Если при этом все серии сывороток, содержащих неполныеантитела, дадут также слабую или сомнительную реакцию, а с полнымиантителами реакция будет отрицательная, это значит, что эритроцитысодержат слабую разновидность антигена резус, так называемыйантиген Du, час тота которого около 1%. В этих случаяхрезус-принадлежность крови больного или беременной женщиныуказывают как резус-отрицательную (rh-), а резус-принадлежностькрови донора как резус-положительную (Rh+), не допуская такимобразом, переливания его крови резус-отрицательным реципиентам.V. ИССЛЕДОВАНИЕ ДРУГИХ АНТИГЕНОВ СИСТЕМЫ РЕЗУСПри использовании сывороток, содержащих антитела анти-С,анти-Е, анти-с, анти-е, анти-Сw в чистом виде, а также в сочетаниис анти-D, например D+C- D+E- D+C+E, применяются те же методы, чтои при использовании сыворотки антирезус анти-D. При этомучитывается форма антител.В качестве контролей используют эритроциты, содержащие и несодержащие соответствующий антиген."Instrukce pro stanovení Rh prinadlezhnostikrovi", Který byl schválen Ministerstvem zdravotnictví SSSR září 7 1990goda N 05-14 / 29, považují za neplatné od okamžiku utverzhdeniyadannoy instruktsii.Nachalnik Upravleniyaorganizatsii meditsinskoypomoschi naseleniyuMinzdrava RFA.I.VYaLKOVPrilozhenie N 8UTVERZhDENOPrikaz Rossiiot ministerstva zdravotnictví 09.01.1998, N 2INSTRUKTSIYAPO STANOVENÍ Rh VYBAVENÍ Kroviniu letadla bez VYTÁPĚNÍ a oN IZGOTOVLENIYUSTANDARTNOY séra a činidla ANTIREZUS určené pro tento TsELIObschie svedeniyaMetody stanovení Rh zásoby na letadlo bezpodogreva OAPC olyayut rychle provádět výzkum bez primeneniyaosobogo laboratorních zařízení přímo z postelibolnogo a dárců a to jak v jednotlivých případech a primassovyh obsledovaniyah.Metody syvorotokantirezus založených na využití ve spojení s koloidních roztoků (albumin, polyglukin), v jejíž přítomnosti, které jsou neúplné Rh antitelapriobretayut schopnost agglyutinirovatrezus polozhitelnyeeritrotsity rovině při teplotě místnosti, analogichnoreaktsii pro stanovení krevních skupin AVO.Naibole e výhodné pro praxi jsou metody pro stanovení naploskosti použití nevyhřívané séru antirezus vyrobené ve spojení s albuminem a pomocí reaktivaantirezus vyrobené ze séra v kombinaci antirezus ssuhim polyglucin a albuminom.1. Stanovení Rh příslušenství na ploskostibez vytápění pomocí séra antirezus připravené s albuminem (dodávaného při vydávání sérum) je možné: a) speciálně připravená univerzální sérum antirezusanti-D, spolu s kontrolním sérem, b) bílé desce s-v povrchu v kontaktu s médiem) izotonický NaCl-g) skleněné palochki.Dlya studie využívající krve získané z prstu píchnutí neposredstvennoiz místě, nebo předem přijaté v trubkových ko-stabilizátory, ale ne více než 2 dnech skladování při 4-8sh S.Tehn ika reaktsii.Na jmenovka vepsat a iniciály osoby, krovkotorogo zkoumána, a tím, že odpovídající notace je aplikován na to ve dvou bodech: doleva o 2 kapky séra antirezus opravit 2 kapky kontrolním sérem. Vedle těchto kaplyaminanosyat 1 kapkou krve zkoumá. Krev ssyvorotkoy důkladně promíchá skleněnou tyčinkou a otěru na talíři dopolucheniya tenké vrstvě. Potom se deska houpal periodicky vtechenie 4-5 minut a přidá se ke směsi obou 1 kapleizotonicheskogo roztoku chloridu sodného pro odstranění možné nespetsificheskoyagglyutinatsii. Sledování průběhu reakce se pokračuje, dokud istecheniya5 minut, pak se vzít v úvahu rezultat.Traktovka rezultata.Esli doleva, tj séra antirezus, proizoshlaagglyutinatsiya červené krvinky, a na pravé straně (kontrola), není - krovostaetsya probarvený, se žádné známky aglutinace etoznachit že testovaný krevní Rh pozitivní (Rh +) Pokud se dvě kapky aglutinace chybí, znamená to, že krev je chtoissleduemaya Rh-negativní (RH -) .. v přítomnosti aglutinace v kontrolní poklesu, který mozhetproizoyti v některých onemocnění, NAP Emer, zaschetautoantitel nezbytné vyšetřit re drugimimetodami krev, s výhodou v laboratoři usloviyah.2. Stanovení Rh příslušenství v pomoschireaktiva antirezus vyrobených ispolzovaniemsuhogo poliglyukina (připojený na dodání činidla) je možné: a) speciálně připravená činidlo antirezus anti-D vkomplekte s kontrolním činidlem, b) bílé desce s navlhčenou plochu, c) izotonický roztok NaCl-g) sklo palochki.Dlya studie využívající krve získané z prstu prick neposredstvennoiz místě, nebo předem vzít do zkumavky kostabilisátorů ne více než 2 dny před studii. Krovhranyat na 4-8sh S.Tehnika reaktsii.Na desky vepsat jméno a iniciály osoby, krovkotorogo zkoumána, a tím, že se odpovídající zápis, aplikován na její levé 1 kapka činidla antirezus a vpravo - 1 kaplyukontrolnogo činidla se přidá k reakčnímu činidlu a antirezus a kkontrolnomu činidlo 1 kapka hustá suspenze krovi.Krov zkoumány důkladně smísí s činidlem a rozmazání poplastinke skleněné tyčové tenké vrstvě. Pak plastinkuperiodicheski třepe po dobu 3-4 minut a přidá se k obesmesi, aby se zabránilo nespecifické aglutinaci 5-8 roztoku kapelizotonicheskogo NaCl.Nablyudenie reakce pokračovala až do 5 minut, po které považují rezultat.Traktovka rezultata.Esli doleva, tj. činidlo antirezus, proizoshlaagglyutinatsiya červené krvinky, a na pravé straně (v řízení), není - etoznachit který vyšetřoval krev Rh-pozitivní (Rh +) Pokud se dvě kapky aglutinace není přítomen, znamená to, chtoissleduemaya krev je Rh-negativní (Rh -). o. Nako výsledek počítá jako platí pouze tehdy, pokud otsutstviiagglyutinatsii kontrole.Pri v přítomnosti aglutinace na ovládací prvek, který se může objevit prinekotoryh onemocnění, např., V důsledku autoprotilátek krovneobhodimo znovu testovány, jiné metody, je žádoucí, vlaboratornyh usloviyah.3. Univerzální výrobní antirezus sérum anti-Dv v kombinaci s albuminem určit Rh prinadlezhnostina rovinu bez podogrevaSyvorotka antirezus obsahuje neúplné protilátky anti-D.Vypuskaetsya kompletní s kontrolním sérem, není soderzhascheyrezus protilátek. Sérum určen pro D.Materialom opredeleniyarezus antigenu pro výrobu syrovátky antirezus kombinované salbuminom slouží lidský sérový skupinu AB (IV), připravené ilispetsialno - univerzální s titrem anti-D protilátky nepolnyhrezus ne nižší než 1:64 - 1: 128 v nepřímém Coombs .Syvorotka musí být předem zkoumány a priznanagodnoy jako standardní sérum antirezus v souladu s"Pokyny pro výrobu standardního séra a reagentaantirezus".Materialom pro výrobu sluzhitsyvorotka kontrolní krevní sérum skupinu lidského AB (IV), tj. kakrezus neobsahující protilátky a aglutininy skupiny alfa a beta.Kontrolnaya sérum by měly splňovat požadavky normy izogemagglyutiniruyuschim syvorotkamsistemy AVO.Pri výroba sera antirezus albuminomneobhodimy v kombinaci s: - 20 až 30% roztoku albuminu získaného z plazmy krovicheloveka-- vzorky rhesus pozitivní a Rh-negativní krve odebraných na geparine-- geparin-- izotonický NaCl.Rabotu zhotovení séra spodboraoptimalnogo startovacího převodového poměru a sérum tirezus a albumin. Podbormozhno provést dvěma způsoby: a) Za použití stejných séru antirezus, testování se vzorky neyraznye (série) albumin, a tím výběrem obrazetsalbumina vysoké konglyutinatsionnoy aktivity-B) za použití jednoho a téhož vzorku (série) albuminu, testování je s různé vzorky sérového albuminu antirezus.Vybor vysoké konglyutinatsionnoy aktivnostyu.Syvorotku antirezus neúplných protilátek s titrem 1:64 - 1: 128razvodyat do zkumavek 2-4 krát odděleně různými obraztsamirastvora albumina.Raznye směsi séra antirezus albumin naplastinke testovány vzorky 5-6 (RH +) se vzorky krve 5-6 ccddee, atakzhe krev Ccddee fenotypem a ccddEe.Syvorotku antirezus smísí s albuminem byla převedena do 2tochki 2 kapek (0,1 ml) k desce, se přidá 1 kapka (0,05 ml) a Rh pozitivní Rh-negativní krve. Kapliperemeshivayut a nátěr na desce pro získání tenké vedení sloya.Nablyudenie až 5 minut za třepání plastinki.Uchet a hodnocení rezultata.Rezultat v úvahu rychlost nástupu a velichineagglyutinatov Rh polozhitelnyheritrotsitoviotsutstviiagglyutinatsii s Rh-negativních erytrocytů. Na osnovaniietogo vzorků albuminu přijatá později nejvíce prigodnyedlyaispolzovaniya.Dlya vzorky albuminu se používají, které při testování aglutinační Rh pozitivní eritrotsitovpoyavlyaetsya během prvních 20-30 sekund a nespetsificheskayaaggregatsiya Rh otritsatelnyheritrotsitovotsutstvuetdoistecheniya 10 minut.Podbor séru antirezus vysoké konglyutinatsionnoyaktivnostyu sredeNeskolko albumin v různých vzorcích sérum antirezus nanosyatotdelno 2 body a 1 kapka (0,05 ml) k desce a na bavlyayut knim po kapkách (0,05 ml), 20 až 30% albumina.Syvorotku důkladně smísí s albuminem a Napili přidána do 1 kapky (0,05 ml) a Rh pozitivní Rh otritsatelnoykrovi. Kapky míchá s erytrocyty v rovině polucheniyatonkogo vrstvu. Pozorování se pokračuje až do 5 minut při pokachivaniiplastinki.Tak působit samostatně pro každý zkušební obraztsasyvorotki, testování vzorků s 5-6 Rh + krve a 5-6obraztsami ccddee, jakož i vyhodnocení krve a ccddEe.Uchet Scddee fenotypu a umožňují rychlosti rezultata.Rezultat a eevyrazhennosti výskyt aglutinace s Rh-pozitivních červených krvinek a otsutstviyus Rh negativní červených krvinek a červených krvinek ccddee genotipaCcddee ccddEe.Dlya a později vybrány antirezusanti-d séra, které je testováno, které jsou jasně vyjádřené jako agglyutinatsiyarezus-pozitivní erytrocyty se vyskytuje v prvním 20-30sekund, anespetsificheskayaagglyutinatsiya otritsatelnyheritrotsitov a Rh Ccddee fenotypů erytrocytů a ccddEe režimu offline doistecheniya 10 minut.Podbor optimalnogosootnosheniya sérum antirezus ialbumina.Posle volba albumin nejvyšší konglyutiniruyuscheysposobnostyu nebo naopak, séra výběr antirezus vysokoyagglyutiniruyuschey činnost v abluminal médiu, začít kpodboru optimální poměr, který: ve stojanu sada 5 Prony erovannyh trubky v první trubka tvorby 2 kapky (0,1 ml) seriialbumina Výběr, druhá trubka - 4 kapky, třetí - 6, v chetvertuyu- 8 a páté - 10 kapek, aby každé zkumavky byly přidány 2 kapky (0 , 1 ml) syvorotkiantirezus a obsah se důkladně promísí, z každé zkumavky se přenese do 2 bodu 1 kapka (0,05 ml) naplastinku, čímž se vytvoří dvě série sérového albuminu všech kapiček 1. řádek jak 1 kapku (0 , 05 ml) svezheyrezus-pozitivní krve v 2. série - Rh-negativní krve (krve odebrané heparinem pre - 1 kapka za 10 ml krve), směs byla míchána a byla pozorována po dobu 3 minut a hodnocení pripokachivanii plastinki.Uchet rezultatov.Chetkaya aglutinace Rh + erytrocyty a v nepřítomnosti agglyutinatsiirh- erytrocytů a erytrocytů ccddee Ccddee fenotyp a ccddEeukazyvaet na optimální poměr vzorku a syvorotkiantirezus albumina.Prigotovlenie hromadně (série) antirezusanti sérum-D v kombinaci s přípravou celkový objem albuminomDlya (série) standardní syvorotkiispolzuyut vybrannyeoptimalnyesootnosheniya ialbumina séra. A sérový albumin a použití stejné série, kotoryeprimenyalis určit jejich optimální sootnosheniya.K vyrábějí celkový objem směsi syrovátky albuminomdobavlyayut heparinu na bázi - 1 kapka na 20 ml syvorotki.Prigotovlennuyu tedy testován na vzorcích séra plastinkahs 5-6 Rh-pozitivních erytrocytů a 5-6 obraztsamirezus negativní ccddee, stejně jako červené krvinky fenotyp Scddeei ccddEe.Pri žádná zřetelná aglutinace srezus-pozitivní krve, přichází během 30-40 sekund, iotritsatelnoy reakce s Rh negativní krve a krovyufenotipa ccddee Ccddee a ccddEe, sérum antirezus kombinaci salbuminom považovány za vhodné jako standardní syvorotkianti-D zjištění, Rh příslušenství na letadlo je prováděných současně bezpodogreva.Issledovanie ovládacím parallelnymispolzovaniem kontrolu výrobního syvorotki.Izgotovlenie ovládání syvorotki.Dlya sérum sérum ispolzuyutizogemagglyutiniruyuschuyu skupina AB (IV) a přidá se stejný vzorek neyalbumin (série) a ve stejném množství a vsootnoshenii, koto žito byly použity pro přípravu séra dannoyserii antirezus.Kontrolnuyu testována stejným způsobem jako u opisanovyshe antirezus séra séra. Kontrolní vzorky ani aglutinovat dolzhnavyzyvat eritrotsitov.Konservirovanie syvorotki.Syvorotku antirezus a kontrolního séra rychlosti konserviruyutbornoy kyseliny 2 g na 100 ml séra a certifikace syvorotki.Rozliv antirezus ikontrolnoy syvorotkiSyvorotku antirezus nalije do 2,1 ml ampulí, kotoryezapaivayut nebo do lahviček, které jsou pevně uzavřeny rezinovymiprobkami. Na ampule, lahvičky lepené etikety s ukazaniemuchrezhdeniya, produkují syrovátka, syrovátkové specificity způsobu, pro který je určen, množství, dobovými pokoji seriii godnosti.Kontrolnuyu sérum vydávané ve stejných množstvích a v zhekolichestve ampulí (lahviček) a také nálepky , Nomerserii kontrolní sérum opakuje osnovnoysyvorotki antirezus.Hranenie číslo šarže, datum platnosti a kontrol.Syvorotki antirezus vyrobený ve spojení s albumin ikontrolnye sérem uložené na 4-8sh S.Srok police - 4 mesyatsa.Po datum vypršení platnosti, ale při zachování aktivity v séru ispetsifichnosti , skladovatelnost může být prodloužena o další 1mesyats.Vydacha sérum antirezus.Syvorotka antirezus vydán doplněný kontrolnoysyvorotkoy.K každá sada je dodáván s návodem k obsluze. + ------------------- ------ + + + ------------------------- | Jméno implementační agentura | | Jméno implementační agentura || výrobce | | Výrobce | + ------------------------- + + -------------------- ----- + | antirezus-D v séru | | Kontrolní sérum || pro metodu letadla | | pro metodu v rovině || nevytápěné | | nevytápěné || U všech krevních skupin | | U všech krevních skupin || ABO systém | | Systém ABO || Řada ______ ______ ml | | Série ml ______ ______ || Užitečné __________ | | Užitečné __________ | + ------------------------- + + ------------------ ------- + formě etikety na sérové ​​antirezus a kontrolnoysyvorotki.4. Výroba činidla s antirezus ispolzovaniemsuhogo poliglyukina určit Rh prinadlezhnostina rovinu bez podogrevaReaktiv obsahující aktivní protilátky antirezus neúplný anti-D, je viskózní zakalený roztok opalescentní. Prihranenii sraženina může spadnout. K dispozici kompletní skontrolnym činidlo neobsahující Rh antitel.Materialom pro výrobu činidla antirezus nativnyesyvorotki jsou lidské krevní skupina AB (IV), nebo se speciálně prigotovlennye- univerzální titru neúplné Rh protilátek, není nižší než 1:64 1: 128 vnepryamoyprobe Coombs. Sérum bytpredvaritelno zkoumány a je považován za standartnayasyvorotka antirezus.Materialom pro výrobu sluzhitsyvorotka kontrolní krevní sérum skupinu lidského AB (IV), tj. neobsahující kakrezus protilátky a skupinu alfa a beta. Kontrolnayasyvorotka musí splňovat požadavky kstandartnym izogemagglyutiniruyuschim séra AVO.Pri výroba antirezus reakční systém potřebný: - polyglukin vysuší lyophilic sposobom-- albumin 2,5% izotonického roztoku rastvor-- NaCl-- vzorky Rh pozitivní a Rh-negativní krve. Poznámky: 1. Poliglyukin suší při sublimatsionnomapparate způsobu lyofilizace podle pravidel stanovených pro plazmové sušení. Sushkuvedut lahvičky kapacita ml.2 250-500. 2,5% roztok albuminu se získá z konečné 10% až 20% roztoku albuminu zředěním isotonický rastvoromNaCl.Izgotovlenie antirezus.Syvorotku činidla obsahující anti-D protilátek s titrem, která není nižší chem1: 64-1: 128 *> přenesena do vialky s předem vysushennympoliglyukinom v množství rovnající se množství kapalného poliglyukina sušeného v lahvičce. V důsledku toho, konečné 6% kontsentratsiyapoliglyukina .--------------------------------- *> - Poznámka: Sérum antirezus vyšší titrommozhno zředí se na tuto hodnotu v séru skupiny AB (IV), nebo standardní razvoditelem 2,5% roztok albuminavizotonicheskom NaCl.Soderzhimoe lahvička roztok důkladně promísí úplném rozpuštění prášku vstryahivaniyado řízení výrobního poliglyukina.Izgotovlenie ovládání reaktiva.Dlya v dalším reakčním činidlem, jako zheflakon sušeného polyglucin stejné série dobavlyayutstandartny razvoditel nebo 2,5% roztokem albuminu ve stejném objemu doiskhodnogo poliglyukina. Obsah se důkladně promísí rozpuštění prášku doplněnou poliglyukina.Issledovanie kvalita vyrobené reaktivov.Issledovanie činidla vyrábět přímo po ihizgotovleniya srezus-polozhitelnymii Rh otritsatelnymieritrotsitami a vyhodnocovány aglutinaci a spetsifichnostireaktsii povahy: desky umístěné ve dvou řadách, doleva - dvě kapky (0,1 ml) antirezus činidlo a vpravo - byla přidána kontrolnogoreaktiva-v první řadě jednu kapku (0,05ml), dvě kapky (0,1 ml), Rh-pozitivních červených krvinek v druhé řadě také Rh na odnoykaple otritsatelnyheritrotsitov.Soderzhimoe kapelperemeshivayut pak stěr do tenké vrstvy iostavlyayut tři minuty pravidelně houpací destičkovité tři minuty všechny 5-6 se přidá kapka roztoku kapelizotonicheskogo chloridu sodného, ​​směs se míchá a dva minutyuchityvayut rezultat.Reaktivy netestovaných meneechems20obraztsamirezus- is30 pozitivní vzorky rhesus otritsatelnyheritrotsitov a skupiny (II), AB (IV), a a B (III), a včetně eritrotsityCcddee ssddEe.Uchet a vyhodnocování rezultatov.Rezultat brát v úvahu rychlosti běhounu Nia a eevyrazhennosti aglutinace s Rh-pozitivních červených krvinek a nepřítomnosti EHS Rh-negativních červených krvinek (ccddee) a eritrotsitamifenotipa Ccddee a rccddEe.Pokazatelem činidla vhodnosti pro posleduyuschegoispolzovaniya je přítomnost hrubých agglyutinatsiirezus-pozitivních červených krvinek rychlostí nástupu na 1 minutu a její nepřítomnost s Rh-negativních červených krvinek (ccddee) a červené krvinky fenotyp CcddEe ssddEe.Kontrolny činidla a zkoumány stejné, jako je popsáno výše dlyareagenta antirezus. Aglutinace kontrolního činidla dolzhnaotsutstvovat všech vzorků eritrotsitov.Konservirovanie reaktivov.Reaktiv antirezus a zachování činidla bornoykislotoy řízení rychlosti 2 g na 100 ml reagenta.Rozliv pasportizatsiya.Reagent antirezus a vlije se do lahviček nebo ampulí. Ampulyzapaivayut, lahvičky těsně uzavře pryžovou zátkou izavaltsovyvayut parafiniruyut.Na nebo ampule, lahvičky nalepena nálepka instituci, připraví reagenční specifitu činidla, metodu kotorogoon určené množství, číslo šarže a termín godnosti.Kontrolny činidla dávkován ve stejných množstvích a ve zhekolichestve ampule (lahvičky) a také vložit textové popisky s příslušné tabulce. kontrola reaktivapovtoryaet sériové číslo sériové číslo hlavního činidla antirezus. + ------------------------- + ------------ + ------------- + | Jméno implementační agentura | | Jméno implementační agentura || výrobce | | Výrobce | + ------------------------- + + -------------------- ----- + | antirezus-D reagenční | | Kontrolní činidlo || pro metodu letadla | | pro metodu v rovině || nevytápěné | | nevytápěné || Řada ______ ______ ml | | Série ml ______ ______ || Minimální trvanlivost do __________ | | Minimální trvanlivost do __________ | + ------------------------- + + ------------------ + ------- skladování, skladovatelnost a kontrol.Reaktiv antirezus připravený suchým polyglucin ikontrolny 4-8sh činidlo skladovaných při teplotě 4 ° C skladovatelnost mesyatsa.Reaktiv antirezus a ovládání kontrola naaktivnost činidla a činidla specifičnost prostřednictvím mesyats.Vydacha antirezus.Reaktiv antirezus vydáno, doplněný kontrolnymreaktivom.K každý soubor (nebo soubor sad) pridaetsyainstruktsiya k použití."Instrukce pro stanovení Rh krevního naploskosti patřící nevyhřívaný a pro výrobu standardního séra ireaktiva antirezus určené k tomuto účelu", UtverzhdennuyuMinisterstvom Health SSSR 06.12.1990 N05-14 / 38-14 je považován za uplynula od přijetí dannoyinstruktsii.Nachalnik Upravleniyaorganizatsii meditsinskoypomoschi naseleniyuMinzdrava RFA.I.VYaLKOVPrilozhenie N 9UTVERZhDENOPrikaz Rossiiot ministerstva zdravotnictví 09.01.1998, N 2INSTRUKTSIYA *>POUŽITÍ ANTI-Colyclons DDIAGNOSTICHESKOGO systému tekutin na antigen OPREDELENIYAD Rh (monoklonálních protilátek anti-D) 9398-215-27575295-95 TU) 1. NaznachenieTsoliklon anti-D je určen pro detekci antigenu sistemyrezus D v lidských erytrocytů a používá se v sérologických testahvzamen nebo paralelně s anti-D isoimmune syvorotkoy.Poryadok se stanoví Rh krevní definované příslušenství"Poučení o opredeleniyurezus-prinadlezhnostikrovi"Schválen Ministerstvem zdravotnictví Ruské federace v roce 1997, a pokyny pro krevní opredeleniyurezus schválené příslušenství hematologie Research Center 27. dubna 1994goda .-------------------------- ------ *> - Instrukce zkompilovaný profesorem I.L.Chertkov, direktorTOO "hematolog" G.Yu.Miterev výzkumníci L.N.Lemeneva, N.I.Olovnikova, E.V.Belkina.2. Charakteristika a základní vlastnosti Colyclons anti-DDeystvuyuschim začínající Colyclons anti-D jsou monoklonalnyeanti-D protilátky produkované limfoblastoianoy kletokcheloveka linie odvozená z lymfocytů dárce, hyperimunního proti Dantigena. Protilátky produkované buňkami klonu yavlyayutsyamonoklonalnymi patří do stejné třídy imunoglobulinů, jsou identické struktury a biologické buněčné linie, sekretující monoklonální aktivnosti.Poskolku proti Dantitela lymfocyty získané od zdravého dárce, isklyuchenakontaminatsiya Reagent patogenní viry (hepatitidy, AIDS a další. ) .Nicméně krevní vzorky by měly fungovat perchatkahvo prevenci infekce patogenními viry přenášeny cherezkrov.Tsoliklon anti-D znamená Ner zbavlennuyuilirazvedennuyu solankou kultivační tekutina podmíněn buněk produkujících protilátky. Anti-Dmonoklonalnye protilátky patří do třídy imunoglobulinu G (IgGl). Colyclons anti-D protilátka neobsahuje ipoetomu liší specifičnost mohou být použity k detekci antigenu D veritrotsitah jakékoliv skupině krovi.Anti-D protilátky patřící do imunoglobulinové třídy G (neúplné protilátky) nezpůsobují přímé aglutinaci erytrocytů obsahujících antigen D, a může být reaktsiikonglyutinatsii používá s želatinou, nepřímý antiglobulinový test (probeKumbsa) vreaktsii erytrocytů aglutinace obrabotannyhproteoliticheskimi enzymy, včetně typu avtomatizirovannyhsistemah "Gruppomatik"0,3. Technika stanovení systém rezusOpredelenie D-D-antigenu v nativním krevním antigenaproizvoditsya stabilizovaný prostřednictvím konservantov- použit v krvi, které byly bez konservanta- v krvi odebrané z prstu. Most chetkayareaktsiya aglutinace pozorovány vysokoykontsentratsii erytrocytů. Závěr k přítomnosti D-antigenu vissleduemyh erytrocyty provést přítomností pozitivní reaktsiiagglyutinatsii.3.1. Nepřímý antiglobulinový test (nepřímý Coombs test) jsou nejcitlivější způsob detekce D antigena.Vzves (2-3%) v roztoku chloridu sodného trizhdyotmytyhissleduemyh červených krvinek, umístěna v kruhové trubky (0,1 mlvzvesi erytrocytů), nebo s 96 jamkami s kulatým deskou ((0,05ml / jamka) byl přidán stejný objem Colyclons vtechenie a inkubovány 45-60 minut při teplotě 37sh C. Pak, po jednom otmyvaniyafiziologicheskim roztoku pro vysrážení erytrocyty 0,05-0,1ml antiglobulinový sérum se přidá opatrně promíchá a ihned pokud patnáct-třicetminuta inkubace při pokojové temperaturetsentrifugiruyut při 200 g po dobu 15-20 sekund. Sraženina myagkovzveshivayut a přítomnost aglutináty, vyyavlyaemyhmakro- ilimikroskopicheski, odvozovat přítomnost D vissleduemyh eritrotsitah.3.2 antigenu. slepení s zhelatinomV aglutinace reakční trubky výrobu jedné kapka (0,05 až 0,1 ml) byl bez erytrocytů koagulované sraženiny kroviilieritrotsitov promyje se bez konzervační látky. Pak se přidá dvě kapky (0,1 až 0,2 ml), 10% roztoku želatiny, předehřáté na zkapalněného pri45-50sh C La a jedna kapka Colyclons anti-D. Suspenziyutschatelno míchá a inkubovány po dobu 10-15 minut ve vodní lázni ili30 minut do termostatu při teplotě 48sh C5-6 mlfiziologicheskogo roztoku se přidá po jemné perevorachivaniyaprobirki vizuálně určit přítomnost aglutináty. stmelování 
Sdílet na sociálních sítích: 

 
 
Podobné

© 2011—2018 GuruHealthInfo.com