Farmakologie rychlá metoda výběru přednostní antibiotikum pro léčbu pacientů s infekcí hnisavé-septický

MI Levy, JP Uzly, VG Slížková

Zkušební laboratoř Center MGCD

Navrhované rychlý způsob screeningu v průběhu studie predpochtitelnyhantibiotikov hnisavých vybití iperevyazochnyh hmoty rány na bázi sposobnostiantibiotikov pitatelnoysredy zabránit změně barvy, který se vyskytuje, když je růst bakterií.

Metoda byla testována na pacienty s hnisavých oslozhneniyamii povoleno, aby odhad opredeleniyavvodimyh dávky antibiotika, která mohou způsobovat jeho izbytokv hnisavé sekret.

Express-metodu výběru preferableantibiotics hnisavých septiky infekcí léčby

M. I. Levi, Ju.G. Suchkov, V.G. Sliskova
Researchlaboratory centru Moskvy centra města dezinfekce

Express způsob výběru preferableantibiotics je nabízen v průběhu výzkumu purulentdischarges a obvazových materiálů ran na bázi onability antibiotik, aby se zabránilo živném prostředí verzi Colorchange na bakterie roste.

Metoda byla prokázána u nemocných mužů s purulentcomplications a umožňují prezentovat predikce dat fordefinition antibiotik přívodních dávek, které jsou schopné se createantibiotic přebytku v hnisavé sekretu.

Problém výběru výhodných Antibiotika dlyalecheniya infekční nemoci získané vydayuscheesyaznachenie uprostřed rezistentnostivozbuditeley rozšířené onemocnění, [7]. Na rozdíl od způsobu dobře difúzní izvestnymdisko objevil predlozheniyaispolzovat způsob sériového ředění antibiotika při uplatňování barva vosobennosti živného prostředí, s přihlédnutím k změnám pH během zhiznedeyatelnostimikrobov [1, 2].

Tato studie je zaměřena na zjednodušení nedavnopredlozhennogo zrychleným způsobem, což vede k nevýhodám výše ustraneniyunekotoryh metody uvedených isokrascheniyu čas potřebný k provedení analýzy [2, 8].

Materiály a metody

Pro zkoušku sterilní 96-lunochnyeplanshety plochým dnem určený dlyaimmuno-enzymový test. V Lune seriynyerazvedeniya antibiotik byly umístěny na barevném sshagom médium 4, protože koncentrace 625 ug / ml (antibiotikum poslednyayakontsentratsiya 0,04 ug / ml). V kontrolnyelunki umístěny pouze barva živnou půdu. Poslevysushivaniya při teplotě místnosti soderzhimogolunochek desky uzavřeny v plastovém sáčku, uzavře a skladuje se v chladu zatenennommeste až do použití. Na jedné desce 11 pomeschalirazvedeniya antibiotikům: ampicillin, benzyl penicilin, streptomycin, gentamycin, tetracyklin, linkomycin, Claforan (cefotaxim), rifampicin, cefazolin, cefalotin, tsefat (cefamandolu). Dvenadtsatayastroka tableta, v níž půlměsíc pitatelnayasreda suší, vlevo pro monitorování aktivity původní barvy a issleduemogomateriala kapalném nutričním sredy.Bolnye byli hospitalizováni 67 gorodskoyklinicheskoy nemocnice v Moskvě (hlavní část. V.A.Terushkin prostoru) hnisavé sekrece získaná v průběhu vremyaperevyazki vatovým tampónem ponořil barevné pitatelnoysredoy. Kromě oddělitelná od rány v několika sluchayahispolzovali extraktu (0,85% chlorid sodný) chasteypovyazki ty, které jsou obsaženy vypouštění rány. Materiál otbolnyh odvezen do bakteriologické laboratoře, kde za použití barvy živném médiu gotovilisootvetstvuyuschie ředění testovaných materiálů a po0,05 ml bylo přidáno do všech lune (kromě ovládacího tsvetapitatelnoy médiu) dříve připraveného desky svysushennymi ředění antibiotik. V vremyamanipulyatsy s hnisavým výtokem dodržovat bezpečnostní opatření stanovená v "Metodicheskihrekomendatsiyah ..." [5]. Destičky byly mírně vstryahivalii umístěny do termostatu při teplotě 37 ° C až do doby, kdy lune kontrolní činnost issleduemogomateriala, původní barvu kultivačního média nahrazena nazhelty. barva doba konverze v těchto kontrolních lunkahzaviselo na koncentraci životaschopných mikrobů vissleduemom materiál (obvykle 3-6 hodin). Po chegopristupali k účetním analýzy. Sohranenieiskhodnogo barva uvedeno živném médiu obeffektivnosti danou koncentraci antibiotika apoyavlenie žlutá - nedostatečný egokontsentratsii není schopen potlačit aktivitu bakterií.

Neutralizace minimální koncentrace (MNC) byla stanovena jako koncentrace antibiotika (mikrogramů na ml) Vposlednee lune není zažloutlé.

V experimentech je mikrobiální agentovispolzovali Colishtamm laboratorních kultur Escherichia K-12 a kmene Staphilococcus aureus Wood, kotoryevyraschivali hydrolyzátu na agarové živné půdě NIIpitatelnyh (Mahackala, Rusko). Tsvetnuyupitatelnuyu médium obsahující indikatorabromkrezolpurpur 0,002% a 0,5% glukózy spotřebované dvuhsortov, z nichž jedna sloužila pro prigotovleniyarastvorov antibiotika, a další - pro prigotovleniyavzvesey hnisavých ran nebo u pacientů vzveseybakterialnyh kultur.

Objem přidané do Luny materiálu definované v0,05 ml, protože menší (0,002- 0,01 0,005 0,02 ml) pra est (0,1 ml) byla prodloužena doba "projevy"aktivita v kontrolní Lune.

Tabulka 1 Aktivita antibiotik v lunochkahplansheta po 2 týdnech třepání (200kachany / min)

zkoumal deska	Antibiotika (MNC -mkg / ml)
	APECS tsillin	Benzylové sankce tsillin	strep tomitsin	gentamicin	tetracyklin	linkomycin	klaforan	rifampicin	cefazolin	cefalotin	Tsefat
po třesení	625	156	40	10	<0,04	625	2.5	10	10	40	2.5
po skladování v chladničce	625	156	40	10	<0,04	625	2.5	10	10	40	10

Poznámka: lunochkiplanshetov přidá suspenze E. coli 10⁷m.kl. / 0,05 ml. Účetní zkušenosti během 4 hodin.

Srovnání času "projevy" vkontrolnyh lune aktivitu, když jsou rychlá a uskorennommetode metoda, která používá roztoky antibiotik nevyyavili významné rozdíly. Uložit metoda vekspress čas je dosaženo tím, že odstraní etapaprigotovleniya a umístění v desce razvedeniyantibiotikov. Denní vysuschennyh antibiotika rastvorpri přidáním 0,05 ml testovaného materiálu v lunochkuproiskhodit v krátkém čase. ispolzovaniyaekspress výsledky způsobu, ve kterém antibiotika byly zaraneevysusheny v lune desce, se shodovala s metodou rezultatamiuskorennogo, který používá rastvoryantibiotika.

Výhody expresní-metodou by mělo otnestiotnositelno dlouhodobé skladování ve vhodném usloviyahplanshetov se suší ve LUNE antibiotik bezpoteri jejich antibakteriální účinnost (termín nablyudeniya6 měsíců), zatímco zrychlený metodeprihoditsya péči o zachování aktivity v ostatkahrastvora antibiotik.

Protřepe desek s sušených antibiotikum vtechenie 2 týdnů při teplotě místnosti (s nočním pereryvomna a o víkendech) nevedla kskolko znatelného odlupování s poverhnostilunochek sušené antibiotiky a potereantibakterialnoy aktivity ve srovnání etipokazateli se stejnou pro tablety, hranivshimisyapri 4 ° C (tabulka. 1).

Je nutné zdůraznit dobrou vosproizvodimostrezultatov rychlou metodu na různých deskách neredkoispolzovannyh v různých časech. Zpravidla poluchalisovpadayuschie výsledky.

Použili jsme zahraničních firem desky (Linbro, USA) a destičky tuzemské výroby (MEDPOLIMER, Rusko). Žádné významné rozdíly nebyly pozorovány (tabulka. 2) aktivnostiraznyh antibiotika.

Ve studii zaměřené na hnisavé rány myopredelyali IOCs a týkají se účinná antibiotika"B" (Odnímatelný rána mikroflóra okazalaschuvstvitelnoy na konkrétní antibiotikum) ilineeffektivnym "v" (mikroflóra odnímatelné ranyokazalas rezistentní na konkrétní antibiotikum). 9obsledovannyh pacientů v jednom případě, žádná nebyla mezi efektivní 11antibiotikov. V pyatisluchayah neefektivní antibiotika tvořily bolshepoloviny ze dne 11., v ostatních případech byly meneepoloviny. Při přiřazování účinnosti antibiotik ilineeffektivnym Číselně MIC údaje uvedené v [7, 9].

Pro výběr nejefektivnější antibiotikovispolzovali hodnotu nadnárodních společností. Někdy jsme vybrali neodin a dvě antibiotika, a to zejména v případě, oniprinadlezhali do různých skupin.

Způsob stanovení pokazateleyosnovyvalas vypočtené na kombinaci získaného analizeznacheny IOCs a literatury [3, 4, 7, 9]. Zpočátku, dvě veličiny byly stanoveny podle literatury: dávek podávaných antibiotik a příbuzná antibiotika imkontsentratsy sérum (typicky otmechayutnaivysshie koncentrace). Dělení prvního množství navtoruyu dal určité pomocné proměnné, a to jak kotoruyuoboznachali "raspredeleniyaantibiotika sérový faktor", Tento poměr neyavlyaetsya žádné trvalé jako klirensantibiotika vede ke zvýšení rychlosti, ale myego používán jako vodicí dlyaraschetov. Dále předpokládejme, že je vypouštěcí přímo vgnoynom zametnonizhe koncentrace antibiotika, než v séru raznitsupredpolozhitelno vyhodnocování tento 10-krát. V tomto případě koeffitsientraspredeleniya antibiotikum hnisavý vozrastetv ​​10 krát ve srovnání s koeficientem pro syvorotki.Teper stanovit dávku antibiotika, která má být podávána, aby se získala MNC, zaznamenány v tabulce 3, jako obratnymhodom a násobit to vede k MNC koeffitsientraspredeleniya antibiotika pro hnisavý výtok. Etoproizvedenie odráží, podle předpokladu je dozuantibiotika které mají být zavedeny s cílem nalézt vypouštěcí vgnoynom rychlou metodu OLS vukazannoy koncentrace Tabulka 3. Pro ustoychivogoblagopriyatnogo důsledku antibiotické neobhodimosozdat velkého převisu sérum antibiotika nadznacheniem IPC. Proto prezentujeme v tabulce 3 takuyuraschetnuyu dávka antibiotika, která moglasuschestvenno překročit hnisavé OLS hodnotu, které zvyšují dávku o 10 krát ve srovnání SDRAM zajištění dosažení kontsentratsiiantibiotika rovná MNC. Přesto je třeba vzít v úvahu opravy spojené s chovem rány peredissledovaniem expresní metodu, je-li alespoň nějakou míru razvedeniyaizvestna.

Tabulka 2 Srovnání aktivnostiantibiotikov suší v domácím lune (MEDPOLIMER) a cizí (Linbro) Tablet

výroba tablety	číslo tableta	Antibiotika (MNC -mkg / ml)
		APECS tsillin	Benzylové sankce tsillin	strep tomitsin	Ghent mitsin	tetracyklin	linkomycin	klaforan	rifampicin	cefazolin	cefalotin	Tsefat
MEDPOLIMER	1	>625	625	40	2.5	<0,04	625	2.5	40	40	40	10
	2	>625	625	40	40	<0,04	625	2.5	40	40	40	10
Linbros	1	>625	625	40	40	<0,04	625	2.5	40	40	40	10
	2	>625	>625	165	40	<0,04	>625	2.5	40	40	40	10

Poznámka: Termíny zahrnovat ty, které jsou v tabulce 1.

TABULKA 3 Vliv antibiotik u pacientů gnoynoeotdelyaemoe určit MNC *) rychlá metoda a nastavení vypočtená dozypredpochitaemogo antibiotikum, aby se dosáhlo jeho přebytek hojení votdelyaemom

NN p / p

Fahmy Leah bolest noha

diagnóza

Antibiotika (MNC -mkg / ml) nejvíce efektivní antibiotikum

Intoduction proti bioty ka

koeficient dis-stanovení proti biotické V syvo Rothko

Ras Thu naya Sotho-kulturní dozadlya DOS tizhe Nia MNC v ohništi čas zheniya (mg)

osídlení Sotho-kulturní dozadlya DOS tizhe Nia chata TKA proti biotické (10 * MC) ohniště čas zheniya (mg)

Opti mal naya denní dávkovat proti bio týk (Mg)

Mak Sim Řazení denní dávkovat proti bio týk (Mg)

APECS cyl ling

Ben ZIL pěny itsil ling

Streit PTOM itsin

Gent s ching

Tet ratsi klín

Lin Qing Komi

KLA rány pho

Reef APECS ching

Cef azo ling

Cef šarlatový cín

Fat Tse

1

L-v

hnisavý poranění holenní

40 mají

0,6 H

625 mají

2.5 UCH

0,6 H

625 mají

0,6 H

<0,04 Ч

0,6 H

0,15 W

0,6 H

rifampicin cefalotin

inside in /

100000 20000

40 30

400 300

900 2000

1200 8000

2

To-ko

hnisavý rána po stehenní amputace

<0,04 Ч

156 mají

156 mají

156 mají

0,6 H

625 mají

<0,04 Ч

10 mají

10 hodin

156 mají

2,5 H

ampicilin klaforan

in / in /

200000 10000

80 4

800 40

3000 1000

14000 2000

3

Dem-in

hnisavý rána po omrzlina

2,5 H

<0,04 Ч

10 UCH

2.5 UCH

<0,04 Ч

<0,04 Ч

<0,04 Ч

<0,04 Ч

<0,04 Ч

<0,04 Ч

<0,04 Ч

benzyl penicilin tetra cyklinu

in / inside

700000 100000

300 40

3000 400

6000 1000

36000 2000

4

Z-in

hnisavý poranění holenní

>625 mají

>625 mají

>625 mají

625 mají

625 mají

625 mají

40 mají

156 mají

625 mají

625 mají

625 mají

-

5

El-n

hnisavý poranění nohou

40 mají

2.5

625 mají

625 mají

40 mají

>625 mají

0,6 H

2.5 UCH

40 mají

40 mají

10 UCH

klaforan

in /

10000

60

600

2000

12000

6

Ar-S

hnisání po foot omrzliny

156 mají

40 mají

156 mají

>625 mají

156 mají

625 mají

<0,04 Ч

10 mají

40 mají

40 mají

2,5 H

klaforan

in /

10000

4

40

2000

12000

7

Cl-in

hnisající rány po amputaci stehno

625 mají

156 mají

625 mají

2,5 H

<0,04 Ч

>625 mají

2,5 H

40 mají

10 hodin

156 mají

2,5 H

tetracyklin

inside

100000

40

400

1000

2000

8

Bv

pooperační dieta hnisající rány vpahovoy area

625 mají

40 mají

156 mají

2.5 UCH

0,15 W

156 mají

<0,04 Ч

2.5 UCH

10 hodin

40 mají

0,6 H

klaforan

in /

10000

4

40

2000

12000

9

v

vařit hýždě

40 mají

2.5 UCH

2,5 H

0,15 W

0,6 H

0,6 H

0,6 H

<0,04 Ч

0,15 W

<0,04 Ч

0,15 W

cefalotin

in /

20000

30

300

2000

8000

Poznámka: -mikroflora rány vybíjení odolné vůči deystviyuantibiotika- B - mikroflóry výtlaku ranychuvstvitelna k akci antibiotika- UCH - mikrofloraotdelyaemogo rány mírně citlivé na deystviyuantibiotika.
Pravá polovina tabulky se skládá naosnovanii čísel uvedených v literatuře (viz vysvětlení uvedené v textu).
*) OLS - minimalnayaneytralizuyuschaya koncentrace.

Poslední dva sloupce v tabulce 3 a obsahuje informace oboptimalnoy maximální dozamiantibiotikov které jsou získávány ze sovremennyhliteraturnyh zdrojů [3, 4, 9]. Jsou pozvolyayutsopostavit vypočtené hodnoty zadané effektivnyhantibiotikov optimální dávky a omezení dávky. Dokonce i ve všech 9 případech dávka umožňuje vytvářet izbytokantibiotika při hojení výboje, jsou nižší než ty, které kotoryeschitayutsya optimální. Pokud se nepoužívá metodyotbora účinných antibiotik a primenyatantibiotiki doporučuje určit jeho citlivost vozbuditelyai [9], že se často doporučuje pro koncentraci sozdatizbytochnuyu konkretnoybolezni antibiotikum nepravděpodobné, (i v případě, MNKsostavlyaet 10 ug / ml), protože výrazně prevyshaetmaksimalno přípustnou dávku.

Ukázalo se, že můžete jen ispolzovatne hnisavý výtok, ale také extrahovat obvazy ilisalfetki uložených na ránu pro rychlou metodou. V několika případech byla použita jako myparallelno hnisavý výtok, takže iekstrakt část obvazu, a byl připraven, jak je obecně shodné výsledky. Jeden takihprotokolov uvedeny v tabulce 4.

diskuse o výsledcích

Zrychlená metoda efektivní antibiotikum výběr [1, 5] navrhuje použití roztoky antibiotik, které, z praktického hlediska, méně pohodlné chemispolzovanie tablety s předem vysushennymiantibiotikami rychlý způsob, kde pouze přidat do bakteriologuostaetsya LUNE 0,05 mlissleduemogo deskového materiálu, a potom následují konversieytsveta v inkubátoru. Snižování vekspress-time metoda analýzy je dosaženo tím, jak se zbavit otneobhodimosti trávit čas razvedeniyantibiotikov vaření v lune.

rychlá metoda má tu výhodu, vozmozhnostsohraneniya tablety s předem vysushennymiantibiotikami, nepřítomnost jakýchkoliv rozdílů vantibakterialnoy činnost v domácích iamerikanskih tablet, žádný účinek mnogochasovogovstryahivaniya připravené tablety a výsledky vysokayavosproizvodimost. Metodika express metodastol zdanění, které mohou být provedeny, poslenadlezhaschey trénink zdravotních sester.

V tomto článku nový termín používaný v neutralizaci minimální koncentrace - MNC kotorayane shoduje s definicí minimální podavlyayuscheykontsentratsii - IPC. Tento poslední údaj MPKopredelyaetsya diskové difúze Způsob otnositelnostandartnyh podmínek (aplikovat na agaru opredelennoechislo mikrobiálních buněk, následované měřením růstu bakterií a zonyzaderzhki přenos průměr vMPK této zóny). Co se týče nadnárodních, my pokračujeme z rány skutečnost chtootdelyaemoe má schopnost měnit původní barvu usloviyahtermostata živném médiu vzhelty a antibiotikum neutralizuje tento efekt. Když etomvelichina OLS do značné míry závisí na typu (ů) mikroorganismu v výboje a jeho kontsentratsii.V případě pouze zaregistrován barevný efekt neutralizace. Studie lunes sneizmennym plodiny barva živné prostředí ukázaly, že vnekotoryh zhiznesposobnyebakterii případů zjištěn, i když v malých množstvích, a v jiných zde sluchayahih nezjistí. Relativně rychlý opredelenieMNK umožňuje hodnotit účinnost různých antibiotik votnoshenii mikrobiální šíření povrchový výboj ranyobychno denní odběr vzorků materiálu pro výzkum, v tovremya podle definice v IPC je zpožděn o neskolkosutok, kdy se situace v ráně se mohou měnit.

TABULKA 4 Porovnání aktivity antibiotik v rezultatovopredeleniya issledovaniignoynogo odděleny a extrakt obvaz část na ranebolnogo Bv.

zkoumal materiál	Antibiotika (MNC -mkg / ml)
	APECS tsillin	Benzylové sankce tsillin	strep tomitsin	Ghent mitsin	tetracyklin	linkomycin	klaforan	rifampicin	cefazolin	cefalotin	Tsefat
hnisavý výtok	625	40	156	2.5	0.15	156	<0,04	2.5	10	40	0.6
Na výpisu obvazu na rány	625	40	156	2.5	0.15	156	<0,04	2.5	2.5	10	0.6

Vypočtené hodnoty se zavádějí do těla pacienta, aby dozantibiotikov otnosheniivozmozhnogo veden v přebytku antibiotika hnisavý výtok. Etiraschety založen na některé pravděpodobně ne vsegdakorrektnyh předpoklady. Výpočet gradientu padeniyakontsentratsii antibiotika sérum nejen gnoynomuotdelyaemomu, každopádně jsme raspolagaemlish předpokladů v tomto ohledu. Co se týče izbytkaantibiotika v hojení výboji, tady netdostovernyh informace, i když jsme neztratili nadezhdurazrabotat vhodnou metodiku nedalekombuduschem. V každém případě je žádoucí, aby podobnymisvedeniyami pro každého jednotlivého pacienta, který potřebuje léčbu antibiotiky.

Významnou reliéf určit OLS mozhnoschitat možné analyzovat nejen gnoynogootdelyaemogo ale prvky obvazy. Vposlednee případ by mohl být obávaný massivnyhkolichestv náhodné bakterie, ale ispolzovaniesterilizovannyh obvazy pravděpodobně odmítne tyto obavy, jak o tom svědčí nashnebolshoy zkušeností. V poměrně krátkém čase strávenou výslovným způsobem, může to možné neznachitelnyekolichestva cizí bakterie nejsou effektivnokonkurirovat s mikrobiální flóry hnisavých otdelyaemogoiz schopnost měnit barvu kultivačního média.

Racionální výběr antibiotika spočívá izbystrogo vvodimoydozy a účinných antibiotik, které jsou schopny vytvářet přebytek v lézi, víra, že takový přebytek je dosaženo, a určení doby trvání léčby antibiotikov.Zhelatelno na tato doporučení iskhodyane byly vybrány z obecných úvah, a zejména pro kazhdogobolnogo. První tři ukazatele by měly být získány vrezultate kooperace zdravotníka klinicheskogobakteriologa a klinický farmakolog a dlitelnostlecheniya - je to spíše výsadou ošetřující lékař na základě výsledků prvních dnech léčby primeneniyaetiotropnogo.

zjištění

1. Použití tablet s předem vysušena vlunochkah antibiotik snižuje čas naotbor nejúčinnější antibiotika a samotné suschestvennouproschaet analýzy.

2. Rychlá metoda pro výběr účinných antibiotik v analýze bylaprobirovan hnisavých materiálu iperevyazochnogo rány několik datových bolnyh.Raschetnye založených na výsledcích issledovaniyakonkretnyh pacientů ve spojení s informacemi, shromážděné z literatury, pozvoliliotsenit možné dávky antibiotik požadovaných dlyasoozdaniya jejich přebytku v hnisavý výtok.

literatura

1. Levy MI, Gorozhankina IA, Sagatovsky L.A.Bystry bakterialnyhkultur způsob stanovení citlivosti na různých antibiotik v kapalné srede.Antibiotiki 1967, N1, s. 57-62.
2. Levi MI, SuchkovYu.G., Prochorov VJ, Terushkin VA Zrychlené otboreffektivnyh antibiotika k léčbě infekcí bolnyhgospitalnymi. Dezinfekce pouzdro 1999, N3, str. 18-24.
3. Lékařské zarubezhnyhfirm v Rusku. Directory. M.,"Astrafarmservis"1993.
4. Mashkovskii I.D.Lekarstvennye prostředky. Svazek 2, Ed. 13, Moskva, 1998.
5.Metodicheskie doporučení pro zrychlených otborueffektivnyh antibiotik pro léčbu infekcí bolnyhgospitalnymi. Schválen Ministerstvem zdravotnictví Ruské federace 10.01.2000 g.za N1100 / 26-0-117. Dezinfekce podnikání v roce 1999, N3, dodatek.
6. Navashin SM, IP Fomina Ratsionalnayaantibiotikoterapiya. Ed. 4, Moskva, 1982.
7. SidorenkoS.V., Kolupaev VE Antibiotikogrammy: disk difuzní metoda. Výklad rezultatov.Izd. skupina "Arina"1999.
8. SidorenkoS.V., Fedorovich V.Yu. Zrychlená metoda opredeleniyaminimalnoy inhibiční koncentrace antibiotik naplanshetnyh spektrofotometrů s vestavěným termostatom.V knihy.: "Nozokomiální infekce - problemyepidemiologii, klinika, diagnóza, léčba iprofilaktiki", M., 1999, s. 220-221.
9. SenfordDzh. Gilbert, D., J. Gerberding., Sandy M. Antimikrobnayaterapiya. Ed. 23, Moskva, 1996.

MI Levy, JP Uzly, VG Slížková

Zkušební laboratoř Center MGCD

Navrhované rychlý způsob screeningu v průběhu studie predpochtitelnyhantibiotikov hnisavých vybití iperevyazochnyh hmoty rány na bázi sposobnostiantibiotikov pitatelnoysredy zabránit změně barvy, který se vyskytuje, když je růst bakterií.

Metoda byla testována na pacienty s hnisavých oslozhneniyamii povoleno, aby odhad opredeleniyavvodimyh dávky antibiotika, která mohou způsobovat jeho izbytokv hnisavé sekret.

Express-metodu výběru preferableantibiotics hnisavých septiky infekcí léčby

M. I. Levi, Ju.G. Suchkov, V.G. Sliskova
Researchlaboratory centru Moskvy centra města dezinfekce

Express způsob výběru preferableantibiotics je nabízen v průběhu výzkumu purulentdischarges a obvazových materiálů ran na bázi onability antibiotik, aby se zabránilo živném prostředí verzi Colorchange na bakterie roste.

Metoda byla prokázána u nemocných mužů s purulentcomplications a umožňují prezentovat predikce dat fordefinition antibiotik přívodních dávek, které jsou schopné se createantibiotic přebytku v hnisavé sekretu.

Problém výběru výhodných Antibiotika dlyalecheniya infekční nemoci získané vydayuscheesyaznachenie uprostřed rezistentnostivozbuditeley rozšířené onemocnění, [7]. Na rozdíl od způsobu dobře difúzní izvestnymdisko objevil predlozheniyaispolzovat způsob sériového ředění antibiotika při uplatňování barva vosobennosti živného prostředí, s přihlédnutím k změnám pH během zhiznedeyatelnostimikrobov [1, 2].

Tato studie je zaměřena na zjednodušení nedavnopredlozhennogo zrychleným způsobem, což vede k nevýhodám výše ustraneniyunekotoryh metody uvedených isokrascheniyu čas potřebný k provedení analýzy [2, 8].

Materiály a metody

Pro zkoušku sterilní 96-lunochnyeplanshety plochým dnem určený dlyaimmuno-enzymový test. V Lune seriynyerazvedeniya antibiotik byly umístěny na barevném sshagom médium 4, protože koncentrace 625 ug / ml (antibiotikum poslednyayakontsentratsiya 0,04 ug / ml). V kontrolnyelunki umístěny pouze barva živnou půdu. Poslevysushivaniya při teplotě místnosti soderzhimogolunochek desky uzavřeny v plastovém sáčku, uzavře a skladuje se v chladu zatenennommeste až do použití. Na jedné desce 11 pomeschalirazvedeniya antibiotikům: ampicillin, benzyl penicilin, streptomycin, gentamycin, tetracyklin, linkomycin, Claforan (cefotaxim), rifampicin, cefazolin, cefalotin, tsefat (cefamandolu). Dvenadtsatayastroka tableta, v níž půlměsíc pitatelnayasreda suší, vlevo pro monitorování aktivity původní barvy a issleduemogomateriala kapalném nutričním sredy.Bolnye byli hospitalizováni 67 gorodskoyklinicheskoy nemocnice v Moskvě (hlavní část. V.A.Terushkin prostoru) hnisavé sekrece získaná v průběhu vremyaperevyazki vatovým tampónem ponořil barevné pitatelnoysredoy. Kromě oddělitelná od rány v několika sluchayahispolzovali extraktu (0,85% chlorid sodný) chasteypovyazki ty, které jsou obsaženy vypouštění rány. Materiál otbolnyh odvezen do bakteriologické laboratoře, kde za použití barvy živném médiu gotovilisootvetstvuyuschie ředění testovaných materiálů a po0,05 ml bylo přidáno do všech lune (kromě ovládacího tsvetapitatelnoy médiu) dříve připraveného desky svysushennymi ředění antibiotik. V vremyamanipulyatsy s hnisavým výtokem dodržovat bezpečnostní opatření stanovená v "Metodicheskihrekomendatsiyah ..." [5]. Destičky byly mírně vstryahivalii umístěny do termostatu při teplotě 37 ° C až do doby, kdy lune kontrolní činnost issleduemogomateriala, původní barvu kultivačního média nahrazena nazhelty. barva doba konverze v těchto kontrolních lunkahzaviselo na koncentraci životaschopných mikrobů vissleduemom materiál (obvykle 3-6 hodin). Po chegopristupali k účetním analýzy. Sohranenieiskhodnogo barva uvedeno živném médiu obeffektivnosti danou koncentraci antibiotika apoyavlenie žlutá - nedostatečný egokontsentratsii není schopen potlačit aktivitu bakterií.

Neutralizace minimální koncentrace (MNC) byla stanovena jako koncentrace antibiotika (mikrogramů na ml) Vposlednee lune není zažloutlé.

V experimentech je mikrobiální agentovispolzovali Colishtamm laboratorních kultur Escherichia K-12 a kmene Staphilococcus aureus Wood, kotoryevyraschivali hydrolyzátu na agarové živné půdě NIIpitatelnyh (Mahackala, Rusko). Tsvetnuyupitatelnuyu médium obsahující indikatorabromkrezolpurpur 0,002% a 0,5% glukózy spotřebované dvuhsortov, z nichž jedna sloužila pro prigotovleniyarastvorov antibiotika, a další - pro prigotovleniyavzvesey hnisavých ran nebo u pacientů vzveseybakterialnyh kultur.

Objem přidané do Luny materiálu definované v0,05 ml, protože menší (0,002- 0,01 0,005 0,02 ml) pra est (0,1 ml) byla prodloužena doba "projevy"aktivita v kontrolní Lune.

Tabulka 1 Aktivita antibiotik v lunochkahplansheta po 2 týdnech třepání (200kachany / min)

zkoumal deska	Antibiotika (MNC -mkg / ml)
	APECS tsillin	Benzylové sankce tsillin	strep tomitsin	gentamicin	tetracyklin	linkomycin	klaforan	rifampicin	cefazolin	cefalotin	Tsefat
po třesení	625	156	40	10	<0,04	625	2.5	10	10	40	2.5
po skladování v chladničce	625	156	40	10	<0,04	625	2.5	10	10	40	10

Poznámka: lunochkiplanshetov přidá suspenze E. coli 10⁷m.kl. / 0,05 ml. Účetní zkušenosti během 4 hodin.

Srovnání času "projevy" vkontrolnyh lune aktivitu, když jsou rychlá a uskorennommetode metoda, která používá roztoky antibiotik nevyyavili významné rozdíly. Uložit metoda vekspress čas je dosaženo tím, že odstraní etapaprigotovleniya a umístění v desce razvedeniyantibiotikov. Denní vysuschennyh antibiotika rastvorpri přidáním 0,05 ml testovaného materiálu v lunochkuproiskhodit v krátkém čase. ispolzovaniyaekspress výsledky způsobu, ve kterém antibiotika byly zaraneevysusheny v lune desce, se shodovala s metodou rezultatamiuskorennogo, který používá rastvoryantibiotika.

Výhody expresní-metodou by mělo otnestiotnositelno dlouhodobé skladování ve vhodném usloviyahplanshetov se suší ve LUNE antibiotik bezpoteri jejich antibakteriální účinnost (termín nablyudeniya6 měsíců), zatímco zrychlený metodeprihoditsya péči o zachování aktivity v ostatkahrastvora antibiotik.

Protřepe desek s sušených antibiotikum vtechenie 2 týdnů při teplotě místnosti (s nočním pereryvomna a o víkendech) nevedla kskolko znatelného odlupování s poverhnostilunochek sušené antibiotiky a potereantibakterialnoy aktivity ve srovnání etipokazateli se stejnou pro tablety, hranivshimisyapri 4 ° C (tabulka. 1).

Je nutné zdůraznit dobrou vosproizvodimostrezultatov rychlou metodu na různých deskách neredkoispolzovannyh v různých časech. Zpravidla poluchalisovpadayuschie výsledky.

Použili jsme zahraničních firem desky (Linbro, USA) a destičky tuzemské výroby (MEDPOLIMER, Rusko). Žádné významné rozdíly nebyly pozorovány (tabulka. 2) aktivnostiraznyh antibiotika.

Ve studii zaměřené na hnisavé rány myopredelyali IOCs a týkají se účinná antibiotika"B" (Odnímatelný rána mikroflóra okazalaschuvstvitelnoy na konkrétní antibiotikum) ilineeffektivnym "v" (mikroflóra odnímatelné ranyokazalas rezistentní na konkrétní antibiotikum). 9obsledovannyh pacientů v jednom případě, žádná nebyla mezi efektivní 11antibiotikov. V pyatisluchayah neefektivní antibiotika tvořily bolshepoloviny ze dne 11., v ostatních případech byly meneepoloviny. Při přiřazování účinnosti antibiotik ilineeffektivnym Číselně MIC údaje uvedené v [7, 9].

Pro výběr nejefektivnější antibiotikovispolzovali hodnotu nadnárodních společností. Někdy jsme vybrali neodin a dvě antibiotika, a to zejména v případě, oniprinadlezhali do různých skupin.

Způsob stanovení pokazateleyosnovyvalas vypočtené na kombinaci získaného analizeznacheny IOCs a literatury [3, 4, 7, 9]. Zpočátku, dvě veličiny byly stanoveny podle literatury: dávek podávaných antibiotik a příbuzná antibiotika imkontsentratsy sérum (typicky otmechayutnaivysshie koncentrace). Dělení prvního množství navtoruyu dal určité pomocné proměnné, a to jak kotoruyuoboznachali "raspredeleniyaantibiotika sérový faktor", Tento poměr neyavlyaetsya žádné trvalé jako klirensantibiotika vede ke zvýšení rychlosti, ale myego používán jako vodicí dlyaraschetov. Dále předpokládejme, že je vypouštěcí přímo vgnoynom zametnonizhe koncentrace antibiotika, než v séru raznitsupredpolozhitelno vyhodnocování tento 10-krát. V tomto případě koeffitsientraspredeleniya antibiotikum hnisavý vozrastetv ​​10 krát ve srovnání s koeficientem pro syvorotki.Teper stanovit dávku antibiotika, která má být podávána, aby se získala MNC, zaznamenány v tabulce 3, jako obratnymhodom a násobit to vede k MNC koeffitsientraspredeleniya antibiotika pro hnisavý výtok. Etoproizvedenie odráží, podle předpokladu je dozuantibiotika které mají být zavedeny s cílem nalézt vypouštěcí vgnoynom rychlou metodu OLS vukazannoy koncentrace Tabulka 3. Pro ustoychivogoblagopriyatnogo důsledku antibiotické neobhodimosozdat velkého převisu sérum antibiotika nadznacheniem IPC. Proto prezentujeme v tabulce 3 takuyuraschetnuyu dávka antibiotika, která moglasuschestvenno překročit hnisavé OLS hodnotu, které zvyšují dávku o 10 krát ve srovnání SDRAM zajištění dosažení kontsentratsiiantibiotika rovná MNC. Přesto je třeba vzít v úvahu opravy spojené s chovem rány peredissledovaniem expresní metodu, je-li alespoň nějakou míru razvedeniyaizvestna.

Tabulka 2 Srovnání aktivnostiantibiotikov suší v domácím lune (MEDPOLIMER) a cizí (Linbro) Tablet

výroba tablety	číslo tableta	Antibiotika (MNC -mkg / ml)
		APECS tsillin	Benzylové sankce tsillin	strep tomitsin	Ghent mitsin	tetracyklin	linkomycin	klaforan	rifampicin	cefazolin	cefalotin	Tsefat
MEDPOLIMER	1	>625	625	40	2.5	<0,04	625	2.5	40	40	40	10
	2	>625	625	40	40	<0,04	625	2.5	40	40	40	10
Linbros	1	>625	625	40	40	<0,04	625	2.5	40	40	40	10
	2	>625	>625	165	40	<0,04	>625	2.5	40	40	40	10

Poznámka: Termíny zahrnovat ty, které jsou v tabulce 1.

TABULKA 3 Vliv antibiotik u pacientů gnoynoeotdelyaemoe určit MNC *) rychlá metoda a nastavení vypočtená dozypredpochitaemogo antibiotikum, aby se dosáhlo jeho přebytek hojení votdelyaemom

NN p / p

Fahmy Leah bolest noha

diagnóza

Antibiotika (MNC -mkg / ml) nejvíce efektivní antibiotikum

Intoduction proti bioty ka

koeficient dis-stanovení proti biotické V syvo Rothko

Ras Thu naya Sotho-kulturní dozadlya DOS tizhe Nia MNC v ohništi čas zheniya (mg)

osídlení Sotho-kulturní dozadlya DOS tizhe Nia chata TKA proti biotické (10 * MC) ohniště čas zheniya (mg)

Opti mal naya denní dávkovat proti bio týk (Mg)

Mak Sim Řazení denní dávkovat proti bio týk (Mg)

APECS cyl ling

Ben ZIL pěny itsil ling

Streit PTOM itsin

Gent s ching

Tet ratsi klín

Lin Qing Komi

KLA rány pho

Reef APECS ching

Cef azo ling

Cef šarlatový cín

Fat Tse

1

L-v

hnisavý poranění holenní

40 mají

0,6 H

625 mají

2.5 UCH

0,6 H

625 mají

0,6 H

<0,04 Ч

0,6 H

0,15 W

0,6 H

rifampicin cefalotin

inside in /

100000 20000

40 30

400 300

900 2000

1200 8000

2

To-ko

hnisavý rána po stehenní amputace

<0,04 Ч

156 mají

156 mají

156 mají

0,6 H

625 mají

<0,04 Ч

10 mají

10 hodin

156 mají

2,5 H

ampicilin klaforan

in / in /

200000 10000

80 4

800 40

3000 1000

14000 2000

3

Dem-in

hnisavý rána po omrzlina

2,5 H

<0,04 Ч

10 UCH

2.5 UCH

<0,04 Ч

<0,04 Ч

<0,04 Ч

<0,04 Ч

<0,04 Ч

<0,04 Ч

<0,04 Ч

benzyl penicilin tetra cyklinu

in / inside

700000 100000

300 40

3000 400

6000 1000

36000 2000

4

Z-in

hnisavý poranění holenní

>625 mají

>625 mají

>625 mají

625 mají

625 mají

625 mají

40 mají

156 mají

625 mají

625 mají

625 mají

-

5

El-n

hnisavý poranění nohou

40 mají

2.5

625 mají

625 mají

40 mají

>625 mají

0,6 H

2.5 UCH

40 mají

40 mají

10 UCH

klaforan

in /

10000

60

600

2000

12000

6

Ar-S

hnisání po foot omrzliny

156 mají

40 mají

156 mají

>625 mají

156 mají

625 mají

<0,04 Ч

10 mají

40 mají

40 mají

2,5 H

klaforan

in /

10000

4

40

2000

12000

7

Cl-in

hnisající rány po amputaci stehno

625 mají

156 mají

625 mají

2,5 H

<0,04 Ч

>625 mají

2,5 H

40 mají

10 hodin

156 mají

2,5 H

tetracyklin

inside

100000

40

400

1000

2000

8

Bv

pooperační dieta hnisající rány vpahovoy area

625 mají

40 mají

156 mají

2.5 UCH

0,15 W

156 mají

<0,04 Ч

2.5 UCH

10 hodin

40 mají

0,6 H

klaforan

in /

10000

4

40

2000

12000

9

v

vařit hýždě

40 mají

2.5 UCH

2,5 H

0,15 W

0,6 H

0,6 H

0,6 H

<0,04 Ч

0,15 W

<0,04 Ч

0,15 W

cefalotin

in /

20000

30

300

2000

8000

Poznámka: -mikroflora rány vybíjení odolné vůči deystviyuantibiotika- B - mikroflóry výtlaku ranychuvstvitelna k akci antibiotika- UCH - mikrofloraotdelyaemogo rány mírně citlivé na deystviyuantibiotika.
Pravá polovina tabulky se skládá naosnovanii čísel uvedených v literatuře (viz vysvětlení uvedené v textu).
*) OLS - minimalnayaneytralizuyuschaya koncentrace.

Poslední dva sloupce v tabulce 3 a obsahuje informace oboptimalnoy maximální dozamiantibiotikov které jsou získávány ze sovremennyhliteraturnyh zdrojů [3, 4, 9]. Jsou pozvolyayutsopostavit vypočtené hodnoty zadané effektivnyhantibiotikov optimální dávky a omezení dávky. Dokonce i ve všech 9 případech dávka umožňuje vytvářet izbytokantibiotika při hojení výboje, jsou nižší než ty, které kotoryeschitayutsya optimální. Pokud se nepoužívá metodyotbora účinných antibiotik a primenyatantibiotiki doporučuje určit jeho citlivost vozbuditelyai [9], že se často doporučuje pro koncentraci sozdatizbytochnuyu konkretnoybolezni antibiotikum nepravděpodobné, (i v případě, MNKsostavlyaet 10 ug / ml), protože výrazně prevyshaetmaksimalno přípustnou dávku.

Ukázalo se, že můžete jen ispolzovatne hnisavý výtok, ale také extrahovat obvazy ilisalfetki uložených na ránu pro rychlou metodou. V několika případech byla použita jako myparallelno hnisavý výtok, takže iekstrakt část obvazu, a byl připraven, jak je obecně shodné výsledky. Jeden takihprotokolov uvedeny v tabulce 4.

diskuse o výsledcích

Zrychlená metoda efektivní antibiotikum výběr [1, 5] navrhuje použití roztoky antibiotik, které, z praktického hlediska, méně pohodlné chemispolzovanie tablety s předem vysushennymiantibiotikami rychlý způsob, kde pouze přidat do bakteriologuostaetsya LUNE 0,05 mlissleduemogo deskového materiálu, a potom následují konversieytsveta v inkubátoru. Snižování vekspress-time metoda analýzy je dosaženo tím, jak se zbavit otneobhodimosti trávit čas razvedeniyantibiotikov vaření v lune.

rychlá metoda má tu výhodu, vozmozhnostsohraneniya tablety s předem vysushennymiantibiotikami, nepřítomnost jakýchkoliv rozdílů vantibakterialnoy činnost v domácích iamerikanskih tablet, žádný účinek mnogochasovogovstryahivaniya připravené tablety a výsledky vysokayavosproizvodimost. Metodika express metodastol zdanění, které mohou být provedeny, poslenadlezhaschey trénink zdravotních sester.

V tomto článku nový termín používaný v neutralizaci minimální koncentrace - MNC kotorayane shoduje s definicí minimální podavlyayuscheykontsentratsii - IPC. Tento poslední údaj MPKopredelyaetsya diskové difúze Způsob otnositelnostandartnyh podmínek (aplikovat na agaru opredelennoechislo mikrobiálních buněk, následované měřením růstu bakterií a zonyzaderzhki přenos průměr vMPK této zóny). Co se týče nadnárodních, my pokračujeme z rány skutečnost chtootdelyaemoe má schopnost měnit původní barvu usloviyahtermostata živném médiu vzhelty a antibiotikum neutralizuje tento efekt. Když etomvelichina OLS do značné míry závisí na typu (ů) mikroorganismu v výboje a jeho kontsentratsii.V případě pouze zaregistrován barevný efekt neutralizace. Studie lunes sneizmennym plodiny barva živné prostředí ukázaly, že vnekotoryh zhiznesposobnyebakterii případů zjištěn, i když v malých množstvích, a v jiných zde sluchayahih nezjistí. Relativně rychlý opredelenieMNK umožňuje hodnotit účinnost různých antibiotik votnoshenii mikrobiální šíření povrchový výboj ranyobychno denní odběr vzorků materiálu pro výzkum, v tovremya podle definice v IPC je zpožděn o neskolkosutok, kdy se situace v ráně se mohou měnit.

TABULKA 4 Porovnání aktivity antibiotik v rezultatovopredeleniya issledovaniignoynogo odděleny a extrakt obvaz část na ranebolnogo Bv.

zkoumal materiál	Antibiotika (MNC -mkg / ml)
	APECS tsillin	Benzylové sankce tsillin	strep tomitsin	Ghent mitsin	tetracyklin	linkomycin	klaforan	rifampicin	cefazolin	cefalotin	Tsefat
hnisavý výtok	625	40	156	2.5	0.15	156	<0,04	2.5	10	40	0.6
Na výpisu obvazu na rány	625	40	156	2.5	0.15	156	<0,04	2.5	2.5	10	0.6

Vypočtené hodnoty se zavádějí do těla pacienta, aby dozantibiotikov otnosheniivozmozhnogo veden v přebytku antibiotika hnisavý výtok. Etiraschety založen na některé pravděpodobně ne vsegdakorrektnyh předpoklady. Výpočet gradientu padeniyakontsentratsii antibiotika sérum nejen gnoynomuotdelyaemomu, každopádně jsme raspolagaemlish předpokladů v tomto ohledu. Co se týče izbytkaantibiotika v hojení výboji, tady netdostovernyh informace, i když jsme neztratili nadezhdurazrabotat vhodnou metodiku nedalekombuduschem. V každém případě je žádoucí, aby podobnymisvedeniyami pro každého jednotlivého pacienta, který potřebuje léčbu antibiotiky.

Významnou reliéf určit OLS mozhnoschitat možné analyzovat nejen gnoynogootdelyaemogo ale prvky obvazy. Vposlednee případ by mohl být obávaný massivnyhkolichestv náhodné bakterie, ale ispolzovaniesterilizovannyh obvazy pravděpodobně odmítne tyto obavy, jak o tom svědčí nashnebolshoy zkušeností. V poměrně krátkém čase strávenou výslovným způsobem, může to možné neznachitelnyekolichestva cizí bakterie nejsou effektivnokonkurirovat s mikrobiální flóry hnisavých otdelyaemogoiz schopnost měnit barvu kultivačního média.

Racionální výběr antibiotika spočívá izbystrogo vvodimoydozy a účinných antibiotik, které jsou schopny vytvářet přebytek v lézi, víra, že takový přebytek je dosaženo, a určení doby trvání léčby antibiotikov.Zhelatelno na tato doporučení iskhodyane byly vybrány z obecných úvah, a zejména pro kazhdogobolnogo. První tři ukazatele by měly být získány vrezultate kooperace zdravotníka klinicheskogobakteriologa a klinický farmakolog a dlitelnostlecheniya - je to spíše výsadou ošetřující lékař na základě výsledků prvních dnech léčby primeneniyaetiotropnogo.

zjištění

1. Použití tablet s předem vysušena vlunochkah antibiotik snižuje čas naotbor nejúčinnější antibiotika a samotné suschestvennouproschaet analýzy.

2. Rychlá metoda pro výběr účinných antibiotik v analýze bylaprobirovan hnisavých materiálu iperevyazochnogo rány několik datových bolnyh.Raschetnye založených na výsledcích issledovaniyakonkretnyh pacientů ve spojení s informacemi, shromážděné z literatury, pozvoliliotsenit možné dávky antibiotik požadovaných dlyasoozdaniya jejich přebytku v hnisavý výtok.

literatura

1. Levy MI, Gorozhankina IA, Sagatovsky L.A.Bystry bakterialnyhkultur způsob stanovení citlivosti na různých antibiotik v kapalné srede.Antibiotiki 1967, N1, s. 57-62.
2. Levi MI, SuchkovYu.G., Prochorov VJ, Terushkin VA Zrychlené otboreffektivnyh antibiotika k léčbě infekcí bolnyhgospitalnymi. Dezinfekce pouzdro 1999, N3, str. 18-24.
3. Lékařské zarubezhnyhfirm v Rusku. Directory. M.,"Astrafarmservis"1993.
4. Mashkovskii I.D.Lekarstvennye prostředky. Svazek 2, Ed. 13, Moskva, 1998.
5.Metodicheskie doporučení pro zrychlených otborueffektivnyh antibiotik pro léčbu infekcí bolnyhgospitalnymi. Schválen Ministerstvem zdravotnictví Ruské federace 10.01.2000 g.za N1100 / 26-0-117. Dezinfekce podnikání v roce 1999, N3, dodatek.
6. Navashin SM, IP Fomina Ratsionalnayaantibiotikoterapiya. Ed. 4, Moskva, 1982.
7. SidorenkoS.V., Kolupaev VE Antibiotikogrammy: disk difuzní metoda. Výklad rezultatov.Izd. skupina "Arina"1999.
8. SidorenkoS.V., Fedorovich V.Yu. Zrychlená metoda opredeleniyaminimalnoy inhibiční koncentrace antibiotik naplanshetnyh spektrofotometrů s vestavěným termostatom.V knihy.: "Nozokomiální infekce - problemyepidemiologii, klinika, diagnóza, léčba iprofilaktiki", M., 1999, s. 220-221.
9. SenfordDzh. Gilbert, D., J. Gerberding., Sandy M. Antimikrobnayaterapiya. Ed. 23, Moskva, 1996.