Pediatrie infračervené spektrální analýza krevního séra jako odraz úrovně metabolických poruch v infekčních onemocnění u dětí, část 1

Základem měření je spektroskopické metody zavisimostiintensivnosti absorpce, emise nebo rozptyl světla veschestvomot frekvenci světla (nebo vlnové délky). V spektroskopiiispolzuyutsya optického absorpčního spektra v infračerveném a ultrafioletovoyoblastyah a Ramanových spekter a spektrylyuminestsentsii. Každé spektrum odpovídá určitému oblastdlin vlny. V různých oblastech absorpce světla razlichnuyuprirodu. Po absorpci energie v optické spektramozhet měnit rotační, vibrační energii molekulyili vnější excitační energie, valenční elektrony. Pro povysheniyavraschatelnoy molekuly dostatek energie relativní nebolshieenergii - odpovídající absorpci leží ve vzdálené infračervené (IR), - oblast (dlouhé vlnové délky). Pro zvýšení kolebatelnoyenergii molekuly (excitace otnositelnodrug jiných atomů kmitání) vyžaduje kvanta vysokou velikost a absorpční lezhitv blízké infračervené oblasti. Ještě větší kvanta energie potřebné dlyavozbuzhdeniya vnějších elektronů molekula - absorpce vidimoyi v UV oblasti.

Spektroskopická metoda analýzy pro stanovení kolichestvotogo nebo jinou látku. Beerův zákon - jeden z osnovopolagayuschihzakonov spektroskopie, stanoví: "Absorpce světla proportsionalnochislu molekuly absorbující materiál v cestě",

IČ spektrum rozlišovat čtyři oblasti: 1. viditelné, blízké 2., 3. 4. zásadní a daleko. Vyšetřovat organicheskihveschestv nejdůležitější základní infrakrasnayaoblast leží v rozmezí od 5000 do 200 cm^-1. Liniiv oblast 600-1300 cm^-1 různé a dokonce i dlyarodstvennyh specifické molekuly, se proto nazývá oblast "otisk prstu" molekula. V této oblasti na podzim kolebaniyaodinarnyh roztahování C-O, C-N, N-O. Na rozdíl od toho absorpční frekvence dvoynyhsvyazey C = C, C = O, n = O, jsou charakteristické, tj. dlyaraznyh málo různých molekul, jsou v rozmezí 1500-1950 cm^-1. Pogloschenietroynyh vazby je v ještě kratších vlnových délek (dlyaS = C při 2100-2250 cm^-1). IR absolyutnospetsificheskim vlastnost každou chemickou polohových izomerů sloučeniny poetomudazhe, geometrické izomery a molekuly soderzhaschieprotony mají různá spektra. V tomto ohledu, IR spektrkazhdogo látka má odlišnou totožnost (otisk prstu).

IR spektra byla použita pro identifikaci sloučenin, a jejich čistotu ustanovleniyastepeni (kvalitativně), a mohou být ispolzovanydlya kvalitativní analýza směsí, kontrola houpačka reaktsii.Odnako nejrozšířenější a důležitá aplikace IR spektroveto předběžnou identifikaci a potvrzení struktury téměř jakéhokoliv funkčního soedineniy.Nalichie skupiny v molekule mohou ustanovits ním. Navíc je možné již bylo uvedeno provedeniyametodom IR spektroskopie a kvantitativní analýzu.

moderní nástroje "zapsat" automaticky spektrum a IR spektrofotometry "SPECORD 80/85 IR" obespechivayutfotometricheskuyu přesnost ± 0,2%. Řídící program vstroennogokompyutera brání nepravidelné a nekonzistentní parametry grafikopostroenie a poskytuje lineární korelaci mezi bazisnoylinii 10 vlnových délkách. Tyto faktory obespechivayutobektivnost a vysokou přesnost spektroskopické analizov.Soglasno základ moderních koncepcí buňky membranysostavlyaet dvojitá vrstva fosfolipidů, prisuschiemembrane vlastnosti klimatizační z tekutých krystalů. Poškození konstrukce a funktsiikletochnyh membrán ve všech fázích onemocnění jsou především vyrazheniempatologii za podmínek, při nichž toxicitu. Úloha patologiikletochnyh membrány a metabolismus za tvořící jednotky toxicity, což se odráží ve velkém počtu dokumentů. Jak je známo, generalizovannyerasstroystva mikrocirkulaci inherentní v patogenezi onemocnění spojených s toxicitou, způsobit hypoxii. Narastayuschayatkanevaya hypoxie vede ke změnám v intracelulárních veschestvai buněčných membrán. Na druhé straně, vývoj mechanismů patologiimembran hrála vůdčí roli hypoxické poruchy metabolizmakletok. V důsledku toho je nadměrné hromadění kininů, biogennyhaminov, proteáz a lipáz, lysozomálních hydroláz výrobků perekisnogookisleniya lipidy, volné mastné kyseliny, jakož i patologicheskihmiokardio-depresivní látky tvoří oběhové nedostatochnost.Chrezmernoe akumulace látky uvedené určuje sindromtoksemii a způsobuje škody na téměř všechny funkce a systémů, včetně kontraktility myokardu, cévní tonus, reologické svoystvakrovi atd. Nakonec, tkáňovou hypoxii porušuje putibiologicheskogo oxidaci. Trpí Krebsova cyklu a oxidaci glukózy pentosového shunt systém. Hlavní způsob získávání energie stanovitsyaanaerobny glykolýzu produkují kyselinu mléčnou jako konechnogoprodukta. Laktátová acidóza, stimulují akumulaci NADH inhibuje fermentyglikoliza (fosforylázy, fosfofruktokináza) aktivnostetogo cestu a snižuje oxidaci dochází s vysokou energií macroergs deficit istoscheniemzapasov.

Jedním z důsledků nedostatku energie je hromadění částic molekulárních iontů (OH^-, H + + LEO a kol.), Kotoryeprivodyat oxidativnímu poškození polynenasycené zhirnyhkislot zahrnuty do lipidových membrán [1, 2, 3]. Perekisilipidov zase uplatňují svůj ničivý účinek na hlavní energeticky bohaté sloučeniny ATP podvergayuschegosyausilennomu rozpadu na ADP, AMP a adenosin.

Stávající úroveň znalostí v oblasti spektroskopie pozvolyaetopredelyat vznik nového ("patologický") A vymizení"normální" Chemické látky (ATP, GTP, UTP, a kol.), Které jsou v různých patologických stavů bystromumetabolizmu vystaveny, za vzniku odpovídajících produktů gidroliza- monofosfáty. Je také možné určit koncentrace belkovyhmolekul a fosfatidy v procesu dezintegrace buněčných struktur. IR spektrum Vissleduemuyu zóny a na podzim svobodnyhradikalov valenční vazby.

Tak infračervená spektroskopie stanovit ryadametabolitov úroveň vytvořeného během patologických změn iniciovaných toxikózu a podle posouzení stupně narusheniyametabolicheskih procesy.

Podle našeho názoru je nejdůležitější, není definice kolichestvatogo látky (včetně velkého množství z nich), nahodyaschegosyav krev dítě pacienta a korelace integrativní analýzy pokazateleyIK spektroskopické s závažnosti toksikozai, tedy úroveň metabolických poruch. V protsesseissledovaniya pod dozorem bylo 183 dítě vozrasteot 1 rok až 14 let s různými infekčními chorobami. V 113detey diagnostikována s toxickým difterického ústní části hltanu (TDS), Y14 - lokalizované záškrtu ústní části hltanu (LDR), 44 dětí vystavlendiagnoz - angina pectoris (folikulární nebo lakunární) a 12 - infektsionnyymononukleoz (IMN). Kromě toho u srovnávacích gruppazdorovyh dětí byla pořízena, skládající se z 30 osob. Podle věku a polovomusostavu těchto skupin dětí uzavřeno.

Jako substrát pro studie použité syvorotkukrovi pacientů (zdravých) dětí provedeniyaspektralnogo připraven pro analýzu. Sérum se suší při pokojové teplotě je polovina-Petriho misce. Pevné látky byly zavedeny do vazelinovoemaslo výtěžek suspenzi, která se potom podrobí IR - spektroskopiis absorpční registrace spektra v oblasti 1200-1000 cm^-1.Při příjmu spektrogram určí výška absorbovat maximálně pásových píky při 1170, 1165, 1150, 1140, 1130, 1100, 1070, 1025sm^-1 a průměrná hodnota všech výšky pikov- C. Potom se stanoví pro každou předchozí maximum poměru pro následné: 1170/1165, 1165/1150, 1150/1140, 1140/1130, 1130/1100, 1100 / 1070,1070 / 1025. Informativní ukazatele označené vztahovými značkami (M, m, D, C, R, x, S). indikátor M predstavlyaetsoboy největší hodnota získaná kvocientu, a index m - naimenshee.Krome, který byl zaveden další komponenty - D, yavlyayuschiysyaraznostyu M a m. Průměrná hodnota všech soukromý označen jako ukazatel - s. Také vypočtená hodnota R -výška píku poměr píku při 1165 cm^-1 kvysote vrchol s maximem při 1170 cm^-1, hodnota x- výška píku poměr píku při 1130 cm^-1na průměrné hodnoty výšek vrcholů (C) A hodnotaS - výška píku poměr píku při 1100 cm^-1na průměrnou hodnotu výšky (C).

Zpočátku jsme srovnávali výkon IR spektroskopicheskogoanaliza krevním séru zdravých dětí a dětí s různými infektsionnoypatologiey tekoucí anginy syndromem (tabulka. 1). Eslirassmatrivat dané nozologických podobě s ohledem kstepeni intoxikace, je nutné, aby se dohodly chtonaimenee výrazný toxický syndrom je třeba dodržovat priLDR. Dále, s rostoucí úrovní intoxikace, zabolevaniyaraspolozhatsya v následujícím pořadí: IMN, bolest v krku, a TDS. Podle našeho názoru je to kvůli gradace Clinicopathogenetic svedeniyamio každé z těchto onemocnění. Samozřejmě, že jednotlivé bolnogos IMN úroveň intoxikace může být výraznější než ukonkretnogo anginy pacienta, ale pacienti vyrazhennostivseh stupeň symptomů a syndromů se zprůměrují. V souladu s tím zdorovyhdetey intoxikace syndrom chybí. Je známo, že narusheniemetabolicheskih procesů v těle se zvyšuje jako uglubleniyatoksikoza a tyto dvě proměnné jsou jasné polozhitelnuyukorrelyatsionnuyu vztah.

Při zvažování tendenci tabulka postepennogosnizheniya numerické hodnoty indexu M as vozniknoveniyai nahromadění toxicity (od zdravých dětí do TDS). Kontakt (hodnota parametru uvelicheniechislovogo), jasněji označena trend pozorovaný v číslech S a x. Predpolozhitelnonazvannye parametry - S, x a, v menší stepeniM odrážet změnu úrovně metabolických procesů nahodyaschiysyavo vztah ke stupni intoxikace.

Kromě toho tabulka. 1 ukazuje, že pro TDS a anginy pectoris, pokazateliIK spektroskopie mají podobné hodnoty na podobném místě situatsiyaimeet LDR a zdravotnických prostředků, a to takovým způsobem, zabolevaniyabolee srovnatelné závažnosti míru intoxikace.

Za účelem určení normální rozmezí infračervených parametry spektroskopických, definovat jejich rozsah zdravých dětí. Pro tento minimalnoei zvolen maximální hodnotou každého z indikátorů (tabulka. 2).

Potom určit počet dětí (%) v každé nozologicheskoyforme ve kterém numerické hodnoty parametrů jsou mimo pravidla predelyprinyatoy (pro každý parametr). Tyto predstavlenyna Tabulka 3. Je třeba poznamenat, že v případě, že číselné hodnoty IR spektroskopicheskihparametrov dítě půjde nad rámec údajů uvedených v tabulce 2, můžeme bezpečně jej připisují skupině pacientů, protože zdorovyhtakie mají číselné hodnoty nejsou stanoveny.

Jak ukazuje tabulka, indikátory D, M, ma R při snížení infekčních onemocnění mají tendentsiyuk (zejména u pacientů, umístěných pod min) ve srovnání se zdravými dětmi, a S a x, naoborotpreimuschestvenno zvýšila v porovnání s normální (preimuschestvennovyshe max). Jak je uvedeno výše, je chování trend v IR parametrovskhodny TDS a anginy pectoris, na jedné straně a s LDR a infektsionnommononukleoze druhé. Potvrzuje a druhý zamechennayatendentsiya - zvýšení počtu pacientů se zvýšenými při otnosheniyuk zdravých dětí, číselných hodnot parametrů S a x,zvýšení úrovně intoxikace (p<0.05-0.01). Имеетсяи некоторая тенденция увеличения количества больных с пониженнымзначением показателя M, na 28,6% rychlostí až 40,8 až 45,5% LDR priTDR a anginy pectoris. Odhalení vztah změní číselnou znacheniyparametrov IR a závažnosti intoxikace, prisuscheytomu nebo dalších infekčních onemocnění, vede k závěru, že tato analýza je integrální index otrazhayuschimuroven metabolické poruchy. Ale, samozřejmě, aby zvážila podrobně chování neobhodimobolee IR spektroskopiipri parametrů TDS. Tabulka 4 ukazuje numerické hodnoty IR spektroskopiipri různých klinických parametrů provedeních TDS. Jak lze vidět z tabulky, samotné číselné hodnoty se neliší v různých stupních TDR.Danny skutečnost lze vysvětlit tím, že úroveň TDS vystavlyaetsyana základem formální znamení - závažnost OPKSH není vsegdasootvetstvuet skutečnou závažnost patologického procesu. V svyazis je vhodné vzít v úvahu číselné hodnoty pokazateleyv v závislosti na výsledku AD (tabulka 5).

Korelační analýza odhalila, že pokud by opatření - sjak se zvyšuje počasí zhoršení, postavy - m ax snížena, pokud možnou smrtí. Tendentsiyupokazatelya s Maximální hodnota menší korelace zavisimostipovtoryaet (M). Ukazatele hladiny korrelyatsiietih autentický (str<0,05-0,001). Показатели Sa R Minimální hodnota opakoval trend (m) a x. Tak, když TDS se udržuje stejné zakonomernostkorrelyatsionnyh vztahy, které je určeno RIM, IMNi anginy pectoris. V tomto případě - korelační parametry IR spektroskopiis výsledek onemocnění - také vidět jejich chování merenarastaniya stupeň toxicity, ale ve skupině pacientů s AD.

Pak změny číselné hodnoty IR spektroskopiipri TDS parametrů potvrzuje závěr, že odrážet vyrazhennostitoksikoza, a tím i úroveň metabolických poruch protsessov.Iskhodya výše uvedené je třeba předpokládat, že IR spektrysyvorotki krev odráží úroveň metabolických poruch v těle, způsobenou účinkem infekční agens. Ponyatnymprichinam tyto změny nejsou specifické pro libootdelnogo onemocnění, ale odrážejí obecné zákony patogenezainfektsionnogo proces.


literatura

1. Vladimirov YA, Archakov AI Lipidovv peroxidace biologických membrán. //M.-Nauka.-1972.- S. 179.
2. FZ Meyerson et al., Role peroxidace lipidů v patogenezi ischemickou chorobou srdeční povrezhdeniyai antioxidační ochranu .// Kardiologiya.-N.2.-1982.-S.81-92.
3. Papayan AV Tsybulkin EK Akutní toxikosa počátkem detskomvozraste. // -A:. Medicína, -1984. -232 s.