Onkologiya-

KP Hanson

Oncology Institute. prof. NN Petrov, Ministerstvo zdravotnictví, St.-Petersburg

zdroj RosOncoWeb.Ru

Oncogene ERBB2 (HER2 / neu) je v druhé poloze po supressornogogena p53 v počtu publikací věnovaných jednotlivé geneticheskomuelementu. Taková situace je pochopitelné, protože ERBB2 gen yavlyaetsyaidealnym příklad pro prokázání úspěchu molekulární onkologie pochopení základních mechanismů rakoviny, a vrazrabotke zásadně nové diagnostické metody onkologicheskihzabolevany a konečně zjištění patogenetickou podhodovk nádorové terapii. Je nezbytné, aby prakticheskoeprimenenie znalost onkogenu obavy ERBB2 onkologicheskogozabolevaniya nejčastější u žen - rakoviny prsu (BC) (Imyanitov Knyazev, 1991- Yu, Hung, 2000).

Gene ERBB2 (HER2 / neu) je buněčný homolog v-erbB onkogenavirusa eritroblastomy ptáků. Jeho velikost je 4,5 kb mRNA kódované informace v něm pro syntézu proteinu P185 (1225 aminokyselin) .Do protein má 44% homologii s receptorem růstového epidermalnogofaktora (EGF) (Coussens et al., 1985). Široká izvestnostgen ERBB2 získané po zveřejnění, která byla instalována pouze ve skutečnosti jeho aktivaci v nádorech prsu, Noi argumenty ve prospěch sdružení ErbB2 amplifikačních splohim prognózou (Slamon a kol., 1987). Blagodaryadannoy a řada dalších publikací, klinický výzkum aspektovaktivatsii ERBB2 včetně mnoha vědeckých skupin, s tisíců pacientů podstoupilo etomtestirovaniyu (Piccart et al., 2000) .V Naše laboratoř je také schopna prokázat osnovnyezakonomernosti aktivaci ErbB2 genu v lidských nádorech, kotoryi dále potvrzen, když sdružená analýza mezhlaboratornyhdannyh (Imyanitov, Prince, 1991 Imyanitov et al., 1992- Imyanitovet al., 1992, 1993- Knyazev et al., 1992).

V současné době je hlavním cílem výzkumníků sosredotochenona klinického použití monoklonálních protilátek (mAb) pro genuERBB2 (Herceptin) a hledání slibné nové fondy vozdeystviyana jeho patologickou aktivací zejména u rakoviny prsu (Baselga, 2001- Yu, Hung, 2000).

Molekulární mechanismy aktivace genu ERBB2

ERBB2 je členem rodiny tyrosin kinázy ErbB receptorů se skládá ze čtyř funkčně vzájemně propojené retseptornyhmolekul, které hrají důležitou úlohu v buněčné proliferace, diferenciace a apoptózy. Tato rodina zahrnuje růst epidermalnyyfaktor (EGF nebo erbB 1), erbB-2, erbB-3 a erbB-4. Podle deystviemligandov ERBB2 tvoří heterodimery s jinými receptory dannogosemeystva, která má zjevně silnější potenciátor effektomna pracovní příslušné signální dráhy (Harari, Yarden, 2000).

Efekt ERBB2 může dramaticky zvýšit, když gena.Superekspressiya ERBB2 exprese zvyšuje buněčnou tumorigeničnosti v kulturevsledstvie spontánních fosforylace heterodimerů obrazuemyhretseptorami a zahrnující příslušné signalizační dráhy, jako je MAPK a PI3K (Harari, Yarden, 2000). Za normálních okolností, signály z receptorů jsou rychle inaktivovány v důsledku komplexy dissotsiatsiiligand-receptor, a degradaci v lysozomech. Odnakoeti obranné mechanismy selhat v superekspressiiERBB2 (Klapper a kol., 2000). Zvláštní místo v iniciačním a signalovprinadlezhit ErbB3, as Tato kináza defektní aktivnostiretseptor široce zastoupeny ve většině epiteliálních buněk, a jeho koexprese s ERBB2 má vysoce transformiruyuschimpotentsialom.

Bylo zjištěno, že onkoprotein erbB-2 nadměrně exprimován v 20-30% nádorů prsu, a v případě intraduktálního (neinvazivní) forem rakoviny prsu, je tato hodnota dosahuje 90% (Slamon a kol., 1987- Knyazevet al., 1992- Imyanitov et al., 1993). Bylo zjištěno, že ligand-zavisimoyaktivatsii ERBB2 důležitou úlohu také patří mezi ostatní členy semeystvaetih receptory. Ukázalo se, že erbB-1 je ve stavu obratnoykorrelyatsii s úrovní estrogenového receptoru (ER) a assotsiirovans nepříznivý průběh rakoviny prsu (Harari, Yarden, 1999). V otnosheniisuperekspressii ErbB-3 a ErbB-4, byly získány protichůdné výsledky, i když určitá tendence označených korrelyatsiis nádorů pozitivních a ER-velikosti stavu (Srinivasan et al., 2000).

Jedním z důležitých aspektů buněk ErbB2 receptoru akčních je ihsposobnost poskytnout nezávislost faktorovrosta majetku. Na závěr je třeba zdůraznit vztah mezi superekspressieyERBB2 a úrovní cyklin D-typu klece. Aberantní superekspressiyatsiklinov typu D (D1, D2 a D3) aktivuje CDK4 a CDK6, vklyuchaetkletochny cyklus a podporuje tumorogenní transformaci buněk (Harari, Yarden, 2000).

Prognostický význam aktivace erbB-2 onkoproteinu

Navzdory existenci rozporů v první frekvenční rezultatahopredeleniya ERBB2 zesílení, do dnešního dne etisvedeniya jsou poměrně playable (Piccart et al., 2000). Jak bylo uvedeno výše, ERBB2 onkogen aktivace nablyudaetsyaprimerno v 20-30% rakoviny prsu. Harder je tomu v případě posouzení úrovně ErbB2 genové ekspressiiprodukta - P185 proteinu. Za prvé, rozsáhlé studie chislosootvetstvuyuschih provedeno imunohistochemicky, který je semi-kvantitativní povahy. Zachastuyupredstavlyaetsya poměrně obtížné rozlišit mezi genu patologicheskoyaktivatsiey (prudký nárůst jeho expresi) a "fyziologický"ErbB2 protein částky. Za druhé, většina immunogistohimicheskihrabot provedena na archivní patologické srezah- i když, teoreticky, takový materiál je ideálním cílem dlyaretrospektivnyh studie, použití parafinového blokovsopryazheno s dalšími technickými obtížemi, jako kakdegradatsiya cílový antigen z důvodu nedostatečného konservatsiiobraztsov, různé citlivosti různých protilátek, atd Za třetí, raná díla ne vždy rozlišovat mezi membránou a tsitoplazmaticheskimokrashivaniem ERBB2- zřejmě klinický význam predstavlyaettolko receptor proteinu formě (van de Vijver, 2001). Obecně platí, že pečlivě provedené studie ukazují vysoké urovenkonkordantnosti mezi amplifikace genem erbB2 a ostrým uvelicheniemkolichestva membrány P185 produktu.

Naprostá většina vědců souhlasí s tím, že aktivatsiyaonkogena ERBB2 je spojena se špatnou prognózou. Často role poškození Zdá se, ErbB2 zprostředkované, tak kakamplifikatsiya a nadměrné vystavení tohoto genu je ve vzájemném vztahu s "klasický"prognostických parametrů, jako je například pozdní fázi onemocnění, metastázy do lymfatických uzlin differentsirovkiopuholi nízké úrovni, vysokým indexem mitotického, aneuploidních, otsutstvieestrogenovyh receptory, atd Nicméně, mnoho ukazyvayuttakzhe práce samy o sobě, nezávisle na dalších faktorech prognosticheskoeznachenie aktivován ERBB2. Základní, že takové zakonomernostispravedlivy a ruské pacientů: zejména naše sobstvennyeraboty odhalily silnou korelaci mezi amplifikaci ERBB2 opětovného výskytu karcinomu prsu karamelu (Imyanitov et al, 1992- Imyanitov a kol, 1993).

Je třeba zdůraznit, že ačkoliv pouhá skutečnost, prognostický znachimostigena ERBB2 a další molekulární markery pro nastoyaschemumomentu Nepochybuji o tom, při výběru strategie léčby reshayuscheeznachenie je dána po všech tradičních markerů prognózy. Tedy onemocnění, informace o stavu ERBB2 mohou být zapojeny pouze v zatrudnitelnyhsluchayah a považovat za doplňkové. Zejména studie přilákal bolshoevnimanie věnován významu ERBB2pri brzy (zejména non-metastazující) formy rakoviny prsu. Zjistili, že údaje o aktivaci ErbB2 genu může znamenat neobhodimostiintensifitsirovat pooperační pozorování, a snad modifitsirovatskhemu léčbu. Ještě zajímavější je otázka ErbB2 amplifikatsiigena neinvazivní formu rakoviny prsu. Bylo zjištěno, že aktivatsiyaERBB2 koreluje s nepříznivými vlastnostmi rakoviny prsu in situ, zejména s komedon typu a nízkým stupněm differentsirovki.Odnako, stále zůstává nejasné, zda existuje asociace mezhduamplifikatsiey erbB2 a riziko degenerace karcinom in situ karcinomu prsu vinvazivnuyu formě, tj zda se má brát v úvahu stav objemu ERBB2 privybore chirurgii.

Dalším důležitým aspektem tohoto problému - prognozirovanieeffektivnosti nádor terapie na základě vyhodnocení tématu ErbB2 statusa.Dannoy předmětem četných studií, rezultatykotoryh zdaleka jednoduché. Nicméně, hlavní závěr svoditsyak, že s vysokou nádorů prsní žlázy ErbB2 retseptoraokazyvayutsya odolnější pro všechny typy protivoopuholevyhvozdeystvy (léčených chemoterapií a radioterapií gomono-) (Mass, 2000).

Techniky pro stanovení ErbB2

Je vyvinuta celá řada instruktážních technik posoudit ErbB2 statusaopuholey, mezi nimiž existují techniky vhodné pouze dlyaissledovatelskih cíle, stejně jako ty, které byly použity denní klinické praxe (van de Vijver, 2001). V kachestvemolekulyarnyh cílů v různých případech DNA, RNA, proteiny iliretseptornye. Lze považovat za obecně uznáváno, že většina použitelné ve situgibridizatsiya zářivky (FISH) pro otsenkiamplifikatsii ERBB2 gen. Nicméně, ne všechny praktické laboratoriiispolzuyut FISH, a to především vzhledem k jeho složitosti a dlitelnostivypolneniya. Sauzern- a Northern blot a různá provedení polimeraznoytsepnoy reakce, které slouží k cílové DNA a RNA primenyayutpreimuschestvenno pro výzkumné účely (Dowsett et al., 2000).

V praxi se až dosud dominantní prinadlezhitimmunogistohimicheskomu (IHC) definující ERBB2. To metodikadostatochno specifický, rychle a snadno proveditelné, a je k dispozici pro většinu laboratoří. Vzhledem k citlivosti IHC zavisitot monoklonální protilátky použité, se doporučuje pracovat se standardním naboramiantitel, zejména firmy HercepTestTM "DAKO" (Espinoza, Anguiano, 1999). Je však možné, že automatizace rybářsk aproximační PCR postupy na praktické problémy mohou izmenitsituatsiyu, a tyto techniky nahradí méně specifické IHC.

ERBB2 - cílová protinádorová léčba

Receptoru ErbB2-se stala v posledních letech, je hlavní molekulární cíl, který se zaměřuje na hledání nových moderních způsobech léčby mnoha způsoby RMZh.Izvesten specifické potlačení ERBB2 činnosti první místo mezi nimi určitě patří do Ica ekstrakletochnomudomenu receptorového proteinu (Yu, Hung, 2000). Zpočátku byloustanovleno, že myší monoklonální protilátky 4D5 Schopnost inhibovat růst kletokRMZh se zvýšenou expresí ErbB2. Nicméně myshinyhMKA imunogenicita omezena jejich klinické využití (Baselga, 2001). Poetomumyshinye mAb 4D5 byla podrobena postupu z tzv humanizace, tedy soediniliih domény, určující komplementaritu k receptoru erbB2 SG1-lidského imunoglobulinu. Výsledný mAb objevil vysokoeffektivnymsredstvom potlačení růstu nádorových buněk a získané shirokuyuizvestnost zvaný droga Herceptin (trastuzumab). Oniproshli detailní preklinické a klinické studie a v léčbě metastatického uspeshnoispolzuyutsya ErbB2 pozitivním karcinomem prsu (Baselga, 2001). Herceptin má výrazný protivoopuholevoyaktivnostyu podmínky v monoterapii nebo v kombinaci s izvestnymihimiopreparatami (taxany, anthracyklinová antibiotika iproizvodnymi platiny).

Mnohem méně je dosud znám i jiné přístupy k modifikatsiiekspressii ERBB2. Tak například, bylo prokázáno, vozmozhnostinaktivatsii ErbB2 genu na úrovni transkripce přes adenovirusnogobelka E1A. Tento protein inhibuje růst experimentálně a metastazirovanieopuholey charakterizována nadměrnou expresí ERBB2. To pokazaltakzhe jejich účinnost ve fázi I klinických testů (Yu, Hung, 2000).

Zvýšená exprese ERBB2 je nevyhnutelně v kombinaci s vysokými urovnemaktivnosti odpovídajícími tyrosinkinázy. Proto dannogofermenta inhibitory mohou mít protinádorovou aktivitu, která nashlopolnoe potvrzené v testech provedených. Většina inhibitor podrobnoizuchen tyrozinkinázy ErbB2-emodinu potlačující fosforiliruyuschuyuaktivnost enzym a růst tumoru (Zhang et al., 1995).

Popsaný úspěšné pokusy o potlačení ErbB2 receptoru pomoschyugennyh konstrukty kódující intracelulární protilátku anti-ErbB2 odnospiralnyeantitela (Yu, Hung, 2000). Podobné účinky takzhegeneticheski upravené anti-ErbB2 mimetické peptid.

Inhibiční účinek na ERBB2 nadměrné exprese obladayutproizvodnye receptor kyseliny retinové, zejména v kombinaci s himiopreparatami.V v poslední době přitahuje pozornost vytvoření vakcíny proti nádorům s nadměrnou expresí proyavlyayuscheyaktivnost ERBB2 (Murrayet al., 2000). Při použití proteinů a DNA vakcín řídí dostichingibirovaniya ErbB2 nadměrnou expresi a potlačení prsu spontannyhopuholey růst u myší.

A konečně, specifická blokáda transkripce genů ERBB2 vozmozhnodostich použitím antisense oligonukleotid (AO) (Roh et al., 2000). Vazba SA na komplementární mRNA dochází k jeho degradaci, jako důsledek, syntézy blokování receptoru ErbB2. Předpokládá se, že JSC mohou být účinnými inhibitory ErbB2.

Tak dosáhl k dnešnímu dni porozumění biologicheskoyroli ERBB2 v normální fyziologii a v nádorových buňkách klíč k racionální volbu léčebných postupů založených na konkrétních účinků na příslušné metabolicheskieputi rostestalo. Léčba nádorů nalezen nový kvalitní kvůli vnedreniemtumorspetsificheskih protilátky namířené proti ERBB2. Naryadus Ty jsou navrženy, a mnoho dalších nových protinádorových činidel, mezi něž patří inhibitory aktivitou tyrosin kinázy, vazby ligandu a transkripčních blokátory. Vedetsyaintensivny hledání jiných způsobů ovlivňování různých zvenyasignalnyh kaskád spojených s ERBB2. Přes sereznyeuspehi použít úspěchy základní vědy klinicheskoypraktike, stále existuje mnoho nejasných bodů funktsionirovaniyaERBB2 která nedovoluje zhodnotit svou prognostickou hodnotu diagnosticheskoei a vztahy s hormonální signály.

Kromě toho, naše znalosti o molekulární podstata vzaimodeystviymezhdu růstovými faktory a receptory jako ERBB2 nedostatochny.Eto zabraňuje vyhledávání specifické antagonisty datové molekuly, které by mohly mít protinádorovou aktivitu. Je zřejmé, že životně důležité funkce buněk, včetně epitelu, nahoditsyapod kontrolovat ne jeden, ale mnoho zabezpečovacích systémů. Vyyasnenievzaimodeystvy mezi ErbB2 protein a G1-protein receptorů, cytokinových receptorů, adhezních molekul, atd novyegorizonty otevřít jak pro základní výzkum a poiskanovyh prostřednictvím protinádorové terapie.

Zůstává nejasné, a některé aspekty deystviyaanti-ErbB2 mechanismus protilátky, zejména jejich schopnost zvýšit kardiotoksichnosthimiopreparatov. Možná, že se vyřeší tajemství, kogdastanet jasné, ErbB2 ovlivňují apoptózu. Nesomnennoodno: je těžší praktické úkoly máme nastaveny pro sebe, tím více vzniká otázka, generované vzaimoproniknoveniemfundamentalnyh a klinických studií.

Reference:

1. Imyanitov EN Knyazev PG Onkogen aktivace ErbB 2 onkoproteinu prognoztecheniya a rakoviny prsu u lidí // problémy. Oncol. - 1991.- T. 37? 5 - C. 527-534.

2. Imyanitov EN, Chernitsa OI Ivanova OA atd. Amplifikatsiyaonkogena erbB-2 (HER-2 / neu) v nádory prsní žlázy -. prognosticheskiymarker pravděpodobnost relapsu // experiment. Oncol. - 1992. - T. 14? 4. - C. 25-29.

3. Baselga J. Klinické studie Herceptin (trastuzumab) // Eur Cancer. - 2001. - Sv. 37, Suppl 1 - P. S18 - S24.

4. Coussens L., Yang-Feng T. L., Liao Y.-C. a kol. Tyrosin kinasereceptor s rozsáhlou homologii k EGF receptoru sdílí chromosomallocation s neu onkogenu // Science. - 1985. - Sv. 230. - P.1132 - 1139.

5. Dowsett M., Cooke T., Ellis I. a. al. Posouzení HER2status u karcinomu prsu: proč, kdy a jak? // Eur. J. Cancer.- 2000. - Sv. 36. - S. 170-176.

6. Espinoza F., Anguiano A. HercepTest test: další perspektivní // J. Clin. Oncol. - 1999 - Sv. 17. - P. 2293-2294.

7. Harari D, Yarden Y. Molekulární mechanismy, které stojí ErbB2 / HER2action u karcinomu prsu // Oncogene. - 2000. - Sv. 19. - P. 6102- 6114.

8. Imyanitov E. N., Chernitsa O.I., Serova O.M., výskyt Knyazev P.G.Rare amplifikace HER-2 (erbB-2 / neu) oncogenein pacientek s karcinomem vaječníků // Eur. J. Cancer. - 1992. - Sv. 28A.- P. 1300.

9. Imyanitov E. N., Chernitsa O.I., Serova O.M. a kol. Amplificationof HER-2 (erbB-2 / neu onkogenu) jako nejvýznamnější prognosticfactor ve skupině ruských pacientů s karcinomem prsu // Neoplasma.- 1993. - V. 40. - S. 35 - 39.

10. Klapper L.N., Waterman H., Sela M., Yarden J. Tumor-inhibitoryantibodies na HER-2 / ErbB-2 může působit tím, že rekrutuje c-Cbl a enhancingubiquitination z HER-2 // Cancer Res. - 2000. - Sv. 60. - P.3384 - 3388.

11. Knyazev P. G., Imyanitov E. N., Chernitsa O.I. a kol. Amplificationof erbB-2 (HER-2 / neu) onkogenu v různých novotvary patientsfrom SSSR // onkologie. - 1992. - Sv. 49. - S. 162 - 165.

12. Hmotnostní R. Úloha HER-2 exprese v předpovídání responseto terapii karcinomu prsu // Semin. Oncol. - 2000. - Sv. 27, Suppl 11. - S. 46 - 52.

13. Murray JL, Przepiorka D, Ioannides CG. Klinické studie ofHER-2 / neu-specifické vakcíny // Semin. Oncol. - 2000. - Sv. 27, Suppl 11. - S. 71 až 75.

14. Piccart M.J., Di Leo A., Hamilton A. HER2: a `predictivefactor` připraven k použití v každodenním řízení prsu cancerpatients? // Eur. J. Cancer. - 2000. - Sv. 36. - P. 1755-1761.

15. Roh H., Pippin J. A., D. W. Green a kol. HER2 / neu antisensetargeting lidského karcinomu prsu // Oncogene. - 2000. - Vol.19. - P. 6138 - 6143.

16. Slamon D. J., Glarn G. M., Wong S. G. a kol. lidské rakoviny prsu: korelace relapsu a přežití s ​​amplifikací theHER-2 / neu onkogenu // Science. - 1987. - Sv. 235. - P. 177 -182.

17. Srinivasan R., Gillett C. E., D. M. Barnes, Gillick W. J. Nuclearexpression na c-erbB-4 / HER-4, receptor růstového faktoru v invasivebreast rakoviny // Cancer Res. - 2000. - Sv. 60. - P. 1483-1487.

18. van de Vijver M.J. Posouzení potřeby a appropriatemethod zkoušení pro lidský receptor epidermálního růstového faktoru-2 (HER2) // Eur. J. Cancer. - 2001. - Sv. 37, Suppl 1 - P. S11- S17.

19. Yu D., Hung M.C. Nadměrná exprese ErbB2 v rakoviny a ErbB2 targetingstrategies // Oncogene. - 2000. - Sv. 19. - P. 6115-6121.

20. Zhang L., C. J. Chang, Bacus S. S., Hung M.C. Potlačil transformationand indukované diferenciace HER-2 karcinom prsu buněk / neu-zvýšenou expresí podle emodinu // Cancer Res. - 1995. - Sv. 55. - P.3890 - 3896.