Toksoplazminom imunomodulace v léčbě chronické toxoplazmózy

Toxoplazmóza - prvok zoonóza s latentním preimuschestvennohronicheskim nad tekoucí znaky porazheniyanervnoy systému orgánů retikuloendoteliálního systému, cross-polosatoymuskulatury a orgánu vidění.

Patogen - Toxoplasma gondii - obligátní vnutrikletochnyyparazit se složitým životním cyklem, v němž muž a bolee300 druhů zvířat a ptáků jsou to mezihostitelé.

Naléhavost toxoplazmóza studie je dána především, lepení této patologie s imunodeficiencí (infekce singularit HIV). Dále popisuje vodné a jedlé vspyshkizabolevaniya [7]. S ohledem na vysokou míru infekce v populaci (od 20 do 90% v různých regionech světa) a polietiologichnostimmunodefitsitov (včetně dlouhodobé glukokortikoidy, cytostatické terapie, vystavení ionizujícímu záření it.d.), je třeba studovat příčiny reaktivace latentnoprotekayuschego procesu.

Je prokázáno, že průtok charakter je určen toxoplazmóza sostoyaniemimmunnoy mikroorganismů systém [2]. Akutní toxoplazmóza (OT) se vyvíjí v důsledku primární infekce mikroorganismem toksoplazmamineimmunnogo [4]. Vyvíjející se při teplotě místnosti a reakce kompleksprisposobitelnyh makro- a mikro-organismus zakanchivaetsyaformirovaniem nesterilní imunitu.

Dlouhodobé přetrvávání činidla doprovázeno „plovoucí“ koncentrace specifických protilátek produkovaných klon paměťových lymfocytů antigen spetsificheskihV [1]. Tato fáze onemocnění nazyvaetsyahronicheskim toxoplazmózy (HT), a je přirozený proces iskhodomostrogo.

Dostatečné množství paměti T- a klinické projevy onemocnění obuslovlivaetotsutstvie B buněk (latentní techenieHT). Nicméně, v některých případech (1-5% nakažených) proiskhoditreaktivatsiya latentní infekci [3]. Tato kategorie zahrnuje „s oslabeným imunitním systémem“ osoby, včetně sekundárního imunodeficitu (HIV infekce a iatrogenní - nekontrolované antibiotikum, cytostatické, glukokortikoidy, atd.).

Je známo, že hlavní roli v prevenci aktivace latentnogoHT patří buněčné složky imunitního systému. Olovo prevence zvenomv reaktivace syntézy je významná kolichestvainterferona-gamma (IFN-yg), T-lymfocyty citlivé Toxoplasma antigeny [5].

Od roku 1958, Klinika infekčních chorob RossiyskoyVoenno lékařské akademie provedla výzkum razlichnyhaspektov HT. vložený AP Kazantsev (1961) Metoda spetsificheskoydesensibilizatsii toksoplazminom dosahuje odolný proti remissiiu 90% pacientů po jednom kurzu. Avšak pouze posledniegody, možnost studovat imunitní sistemybolnyh chemoterapii s odpovídajícími imunologickými metodami.

Účelem této studie

Vědecké zdůvodnění toksoplazminom mechanismus účinku na zhodnocení osnovaniikompleksnoy klinických laboratoří a immunologicheskogomonitoringa pacientů s chronickou toxoplazmózu.

Materiály a metody

Do studie bylo zahrnuto 70 pacientů s klinickými projevy obostreniyaHT (Reaktivace latentní HT). Diagnóza naosnovanii Přítomnost klinické období exacerbace isklyucheniyadrugih sindromoskhodnyh onemocnění infitsirovannnostitoksoplazmami detekce (přítomnost specifických Ig G, Toxoplasma, analýza vyyavlennyhimmunofermentnym) zamedlennogotipa výrazný přecitlivělost na antigeny Toxoplasma následek intradermální probys toksoplazminom zředí 10 krát 0,85% hloridanatriya sodného. [Toksoplazminom představuje komplexní antigeny buněčné membrány naruzhnoypoverhnosti T. gondii (Kmen RH) belkovoyprirody (t. N. SAG), získaný vody a extrakcí etherem (rostliny Odessa pro výrobu bakteriálních přípravků).]

Všichni pacienti odměřené množství CD-4 +, CD-8 +, B-IgG + (monoklonalnymiantitelami podle L.A.Kozhemyakinu et al., 1987), Ig G Toxoplasma (test ELISA-systém "La Roche"), obr RTML s toksoplazmennymantigenom (George et Vaughan, 1962 Bulankovas modifikace YI a kol., 1993), "aktivní" interferon (dále - IFN-zákon), "aktivní" interferon-gamma (dále - IFN-g-act) a „aktivní“ interferon-a (IFN-y dále-AKT) biologická metoda. Takzheopredelyali celková koncentrace IFNg(Dále - IFNg-Společnost) a interleukin-4 (dále jen - IL-4) pomocí ELISA za použití komerčních testů analizas Systems Ltd. "protein obrys" (Petrohrad) a "cytokin" (Petrohrad). Chuvstvitelnostmetoda byla 10 pg / ml. Navíc (kontrolní skupina) byly zkoumány 10 pacientů bez klinických projevů toksoplazmozav historie (latentní forma HT).

Všichni pacienti byli rozděleni do skupin podle effektivnostyuterapii. Skupina 1 - 58 pacientů s přechodem latentnuyufazu onemocnění (cyklické formy pro symptomatické chronické toxoplazmóza), skupina 2 - 12 pacientů s opakovaným exacerbace HT pro blizhayshegogoda po ošetření (za recidivujících forem symptomatické hronicheskogotoksoplazmoza). Kontrolní skupina - 10 klinicky zdravá přítomnost litss Ig G na Toxoplasma (pro primární latentního onemocnění) .Gruppy srovnatelné pohlaví, věku, harakterupitaniya, společenské postavení, premorbid pozadí.

Vyšetření pacientů bylo provedeno v dynamiky v akutní, přímo po imunomodulační toksoplazminom (intradermálně na ředění se zvyšující se koncentrací obscheydoze 0,3 ml nativního léčiva), a 4 týdny po ošetření okonchaniyakursa. V žádném případě nebyla pozorována boční podávání reaktsiyna toksoplazminom. Podrobnosti o aplikačních metod léčení chemoterapií toksoplazminav popsané v [1]. Indikátory imunitních buněk, koncentrace aktivního interferonu byl také studován v 3-6 mesyatsevposle léčbě.

Statistická analýza výsledků pomocí programu „Statgraphics profesionální Win, ver. 3.0 „pomocí jediné a mnogovariantnogoanaliza Analýza podskupiny (analýza podmnožin), srovnání dvou vzorků (parametrické a neparametrické), a faktor poshagovyyanaliz (p <0,05, F-k-vstoupit = 4).

Výsledky výzkumu

Bylo zjištěno, že v období exacerbace (tabulka 1) u pacientů s významnými změnami HTnablyudayutsya immunologicheskihpokazateley studována (tabulka X - průměrná velikost, d - standartnoeotklonenie).

Tabulka 1. Některé indikátory stavu imunity u bolnyhhronicheskim toxoplazmózy během akutního onemocnění

* - p<0,05, ** - p<0,01 (сравнение с контрольной группой).

A tak, i přes nedostatek spolehlivých statistických pacientů razlichiyu s cyklickým průběh onemocnění ve srovnání s recidivujícím, nejprve pozorována výrazně vyšší obsah CD-8 + neskolkobolshee počtu B-lymfocytů, které produkují Ig G (dále jen - B-IgG +). Také zvýšená koncentrace specifické Ig G (dále Ig G tox), IFN-akt, IFN-rea IL-4. Rovněž poukazuje na absenci IFNg-akt, tím nižší je koncentrace IFNg-Společnost ipokazatelya RTML.

Ve srovnání s ukazateli imunitního stavu s formeHT latentní období exacerbace (opětovné) během cyklického harakterizuetsyastatisticheski významné zvýšení množství CD-8 +, IFN-akt (p<0,05), снижением количества B-Ig G+ (p<0,05), общегоIFN-g (p<0,01) и Ig G tox (p>0,05), а также ростоминдекса РТМЛ (на 15 %). У пациентов данной группы не обнаруживалсяв сыворотке крови активный IFN-g (как и при латентном токсоплазмозе).

Imunitní systém pacientů s akutním sretsidiviruyuschim průběh chemoterapie se vyznačuje menším počtem vyrazhennymuvelicheniem CD-8 + (p<0,05) и активного IFN-акт (p>0,05),более заметным снижением количества B-Ig G+, Ig G tox, IFN--akt (p<0,05), наличием в сыворотке IFN-g-akt, k prudkému poklesu IL-4 a RTML růstu 28%.

Tabulka 2. Některé indikátory stavu imunity u bolnyhhronicheskim toxoplazmózy po ošetření toksoplazminom

* - p<0,05 (сравнение с контрольной группой), * - p<0,05(сравнение между группами с циклическим и рецидивирующим течениемХТ)

Tabulka 3. Některé ukazatele imunitním stavu toxoplazmózy bolnyhhronicheskim 1 měsíce po ukončení léčby.

* - p<0,05 (сравнение с контрольной группой), * - p<0,05(сравнение между группами с циклическим и рецидивирующим течениемХТ).

Tabulka 4. Některé indikátory stavu imunity u bolnyhhronicheskim toxoplazmóza 3-6 měsíců po ukončení léčby.

* - p<0,05 (сравнение с контрольной группой), * - p<0,05(сравнение между группами с циклическим и рецидивирующим течениемХТ)

Analýza dat v tabulkách 2-4 ukazuje, že spolu s běžnými skupinami pacientů dlyaobeih HT mění imunitní systém nablyudalissuschestvennye studoval rozdíly v dynamice ukazatelů narastayuschievo času.

Ihned po imunomodulaci ve všech patsientovnablyudali růstu IFNg-akt, IL-4 (boleevyrazhenny při cyklickém průběhu nemoci), redukce CD-4 + 8 + -iCD. Nicméně, v případě, že cyklický průběh onemocnění CD-4 + snizhalisna 5%, a CD-8 + - 11%, když recidivující chodech zaregistrirovanaobratnaya trend: CD-4 + se sníží o 25%, a CD-8 + - 10% .Tyto změny byly doprovázeny multidirectional dynamikou IFN-g-Society: její koncentrace se zvýšila o 85% v průběhu pritsiklicheskom HT a snížil o 38% u pacientů s onemocněním retsidiviruyuscheyformoy.

Do jednoho měsíce pacienti studovali skupinové dynamiky pokazateleyIS získat větší rozdíl. V cyklické proudění bolezniprodolzhalsya čirý (40-120%) zvýšení koncentrace IFN-g-IFN a působíg-Společnost, vozrastalokolichestvo CD-4 + na hodnotu vyšší než doba exacerbace, nablyudalosdalneyshee snížení počtu CD-8 +, bylo prokázáno snížení IL-4. Ve stejné době, u pacientů s relapsující růst chemoterapii CD-4 + doprovázen značným zvýšením CD-8 + (30%). Neznachitelnyyrost koncentrace IFN-g-celkem (1%) z těchto pacientů byla spojena s uvelicheniemkontsentratsii „aktivní“ formy IFN (jejich hodnota se zvýšila o 10%).

Pacienti obou skupin byla pozorována jednosměrný dinamikakontsentratsy B-Ig G + a Ig G tox (snížení počtu lymfocytů, produtsiruyuschihIg G a koncentraci specifických imunoglobulinů).

Zvláště pozoruhodné jsou výsledky komplexu (klinické a imunologické) vyšetření pacienta do 3-6 měsíců po ukončení léčby.

Z průzkumu vyplývá pacientům zjevně forem HT cherez6 měsíců po průběhu léčby ukazují, že

1. Při jízdě na kole průběh nemoci (jednorázový kurz terapiiprivodit stabilní remisi onemocnění - přechod onemocnění vhronicheskuyu latentní formě), je téměř kompletní klinicheskayaremissiya - mizí stížností projevy porazit retikuloendotelialnoysistemy těla izoluje sociální adaptaci pacientů.
2. Dynamika klinických projevů chemoterapie přímo koreluje s rostomCD-4 +, IFNg-akt (pozitivní) a index vyrazhennymsnizheniem RTML s toksoplazminom (negativně). RostuCD-4 + odpovídá úměrnému zvýšení množství CD-8 +, zvyšuje koncentraci Ig G Tox. Nejvíce studoval immunologicheskihpokazateley nijak neliší od těch v latentní formě chemoterapie.
3. Recidivující samozřejmě zjevné formy HT v těchto podmínkách obsledovaniyaharakterizuetsya zachování disadaptative reakce (snížen pracovní kapacita, vyjádřená emoční nestabilitu, existují objektivní priznakiotsutstviya remise), prudký nárůst počtu CD-8 + povtornymuvelicheniem index RTML antigeny Toxoplasma, snizheniemkontsentratsii Ig G tox, nízké koncentrace aktivního interferonu ,

diskuse

Studie ukázaly, že imunitní procesy, které přispívají ke klinickým projevům reaktivace chemoterapie harakterizuyutsyaopredelennymi rozdíly u pacientů s přetrvávající polozhitelnymeffektom imunní a pacientům s recidivující formy dannoyklinicheskoy onemocnění.

Ve spojení s dostupnými k dnešnímu dni, v literatuře údajů, výsledky svého vlastního výzkumu nám umožňují nabízet obyasnenienekotoryh projevy infekce získané toxoplazmózy.

Je známo, že hlavním prvkem latentnogotoksoplazmoza proti opětovnému je syntéza vysoké hladiny IFN-g, která brání zhroucení cyst. Tento yavlenieizucheno experimenty [6]. Je také ukázáno, že při konkrétní latentnomtoksoplazmoze CD-4 + vylučují jak IFNg,a IL-4, která je charakteristická pro Th0 buněk [9].

V některých studiích bylo experimentálně prokázáno, že infitsirovaniemakrofagov Toxoplasma vede ke snížení exprese molekulklassa MHC-II a IFN-g-závislé prezentace MHC-I, mozhetyavlyatsya, že jedním z faktorů, které určují perzistence vozbuditelya.Takzhe ukazuje, že reaktivace latentní infekce v eksperimentevazhnaya úloha pro CD-8 +, které lyžují infitsirovannuyukletku, ale neničí sebe toxoplasmy [4,8].

HT ostření mechanismus může být reprezentován následujícím obrazom.Na rozvoj pozadí imunosuprese sníženou koncentraci IFNg(V důsledku přímé inhibiční působení nebo syntézy rezultateistoscheniya). Snížená IFN-g může vést k spetsificheskihTh0 transformaci do Th2, která vede k horní části cytolýzy buněk infitsirovannyhtoksoplazmami (pseudocysty). Příchozí extracelulárně prostranstvoparazity částečně lýze specifických protilátek v prisutstviekomplementa. Část patogenů vystavených fagocytózy, nosyaschemunezavershenny charakteru. Uvnitř patogen formy sobstvennuyuobolochku buněk, inhibuje funkci prezentující antigen, a tím vytváří podmínky pro jeho ochranu, protože i v buňkách sluchaelizisa zůstává naživu. Tento proces je podporován zaschet chronický nedostatek IFNg. Možné vratnost Podmínkami imunodeficience spontánní remise, je-li koncentrace IFNg zvýšení, bude iimmunny reakce být provedena do Th1-typu. V případě, že uglubleniyaimmunodefitsita (AIDS), Th1 ovládání je zcela ztracen, ochrana funktsiyunespetsificheskoy předpokládat, neutrofily a odpověď aktiviruetsyaTh2. Výsledkem je, že rozvoj polyklonální aktivaci nespecifických protilátek hyperproduction B-limfotsitovs, což vede k vývojovým generalizatsiiinfektsii parazitní sepse (meningoencefalitidy, abscesy, zápal plic, hepatitida, myokarditida, atd.).

Ve většině případů (90%) toksoplazminom slouží jako spetsificheskogoimmunomodulyatora, jehož mechanismus účinku je pravděpodobně svyazans aktivace produkují IFN-g specifické CD-4 +. V tomto mehanizmasvidetelstvuyut favorizují růst CD-4 + a koncentrací IFNg,a absence významných dynamiky humorální zvenaimmuniteta. Antigen je podána intradermálně pravděpodobně sorbiruetsyana antigen prezentujících buněk, kůže, zpracovaných a predstavlyaetsyaya-pomocné buňky, které reagují na to generace IFN-g dopolnitelnogokolichestva. Na druhé straně, IFNgstimulovány Th0 transformace do Th1. Tak prekraschaetsyatsitoliz buněk infikovaných s pseudocysty již vytvořených a v nepřítomnosti druhé se nachází uvnitř buňky toksoplazmyunichtozhayutsya aktivuje IFNg makrofágy.

Přibližně 10% případů nevede k zavedení toksoplazminom krazvitiyu stabilní remisi. Relativně vysoká počáteční urovniIFN-g (Včetně aktivních IFN-g) může odrážet skutečnost, že tito pacienti otsutstvuettochka jeho aplikace (neexprimují receptor). Snizheniekolichestva CD-4 + a IFNg dopolnitelnoyantigennoy na zatížení na pozadí, následný růst CD-8 + hronicheskihvirusnyh typické pro infekci (např., chronická virová hepatitida). Nicméně, v tomto případě je neúplný charakter cytolýza a mikrobitsidnayaaktivnost makrofágy, zřejmě nezvyšuje.

Schopnost imunitních buněk k syntéze IFN-g pod vlivem specifických antigenů stimulyatsiiopredelyaet a předpovědi další průběh chemoterapie. Ukázalo se, že uvseh bez výjimky, pacientů s cyklickým průběhu onemocnění, 4 týdny po ošetření se úroveň celkového toksoplazminom IFNgpřekročil originál, v opakující se HTV v průběhu této doby koncentrace celkového IFNg80% pacientů se snížila.

Je zřejmé, že interferon hraje důležitou roli v procesu reaktivatsiilatentnogo toxoplazmózy. Mechanismus relapsu chemoterapii, asi složitější, o čemž svědčí korelaci dynamiky klinických ukazatelů proyavleniys RTML s Toxoplasma antigeny. RTML yavlyaetsyaintegrativnym Index ukazující immunokompetentnyhkletok interakci s cytokinů produkovaných by musely mnogoobraznymiodno- a mnohostranného biologické účinky. Čisté pacienti polozhitelnayadinamika se stabilním onemocněním v přechodu remissiyui znovuobjevení akutních symptomů v jiných kategoriipatsientov se časově shoduje s zjevné rozdíly pokazatelyaRTML. Po 3-6 měsíců po ukončení léčby se sensibilizatsiisnizhaetsya do první skupiny a zvyšuje ve druhém.

zjištění

1. V patogenezi akutní exacerbace chronické toxoplazmózy chelovekaodnim z předních faktorů je snížení hladiny IFN-g a související aktivaci Th2 odpovědi.
2. V 90% další antigen zátěže s vnutrikozhnomvvedenii toksoplazminom vede ke stimulaci IFNg,Mikrobicidní aktivace mechanismů makrofágy zastavení tsitotoksicheskiheffektov, obnovení tolerance a transformace zabolevaniyav latentní formu po zapnutí Th1-odpovědi.
3. Významně nižší (10%) specifických antigenů nagruzkane vede k zapnutí Th1-odpovědi, která může být svyazanos genetické defekty, jako je IFN-g výroby, a mechanismy pro jeho provádění biologicheskiheffektov.
4. Toksoplazminom (antigen Toxoplasma) je spetsificheskimimmunomodulyatorom, hlavní mechanismus působení je stimulace syntézy svyazanso IFN-g proliferaci prvního typu antigen-specifických T-helperov1.

Reference

1. Lobzin JV, Bulankov Yu Kazantsev AP, Vasiliev V.V.Hronichesky toxoplazmóza: racionální terapie. / Rossiyskiemeditsinskie olovo. Časopis pro klinitsistov.- 1997. - N 2.- t 2 -. S. 67-69
2. Beazley D. M., Egerman R., S. Toxoplazmóza // Semin. Perinatol.-1998. -VOL. 22, № 4. -P. 332-8.
3. Bossi P., Caumes E., Astagneau S., Li T. S., Paříž L., MengualX., Katlama C, Bricaire F. Caracteristiques epidemiologiquesdes toxoplasmoses cerebrales chez 399 pacientů infectes parle VIH suivis entre 1983 a 1994 / Rev. Med. Interne.-1998 máj -Vol.19, №5. -P. 313-7
4. Darrel O., Ho-jen, Alex W.L. Joss. Human toxoplazmóza. -New York-: University Press, 1992. - 432 s.
5. Denkers E. Y., Gazzinelli R.T. Regulace a funkce T-buněk v průběhu mediatedimmunity Toxoplasma gondii / Clin. Microbiol.Rev. -1998. -VOL. 11. №4. -P. 569-88
6. Hunter C. A., Subauste C. S., Remington J.S. Úloha cytokinesin toxoplazmózy / Biotherapy. -1994., -Vol.7, №№3-4. -P. 237-47
7. Isaac-Renton J., Bowie W. R., Král A., Irwin G. S., Ong C. S., Fung C. P., Shokeir M.O., Dubey J.P. Detekce Toxoplasma gondii oocyst v pitné vodě / Appl.Environ. Microbiol. -1998. -Vol.64, №6. -P. 2278-80
8. Luder CG, Lang T., Beuerle B., Gross U. dolů regulationof molekul MHC třídy II a neschopnost až regulovat tříděné molekuly v myších makrofágů po infekci Toxoplasma gondii / Clin. Exp. Immunol. -1998., Sv. 112, №2. -P. 308-16
9. Prigione I., Facchetti P., Ghiotto F., Tasso P., Pistoia V.Toxoplasma gondii specifické CD4 + T buněčné klony od zdravých, latentně infikovaných lidí zobrazení Th0 profil sekrece cytokinů / Eur. J. Immunol. -1995. -VOL. 25. №5. -P. 1298-305