Onkologiya-

IA Baldueva

VCO Oncology Institute. prof. NN Petrov, Ministerstvo zdravotnictví, St.-Petersburg

zdroj RosOncoWeb.Ru

"Vakcína - metoda založená na použití komplexního antigenaili antigenu s nebo bez odezvy adjuvans modulyatsiiimmunnogo" (Restifo N., Sznol M., 1997). Tato metoda aktivnoyspetsificheskoy imunoterapie, která je založena na stimulaci immunnogootveta pacientů na jejich vlastní nádoru. Očkování (nádor vakcinace) s rakovinou může být použit s pomocnou látkou (po hirurgicheskogolecheniya v nepřítomnosti klinicky detekovatelného vzdálených metastáz) a lékařské účely (v případě šíření nádoru).

Četné práce v posledních desetiletích zobrazené chtopri zhoubné nádory mají adekvátní imunitní otveta.Eto může být z několika důvodů:

1) Nedostatek imunogenicity nádorových / opuholeasotsiirovannogoantigena;
2) schopnost indukovat nádorově o lokální nebo systemické imunosuprese (IL-10, transformující růstový faktor rosta-?, Faktor rostaendoteliya lodě, atd), se snížením aktivity T-lymfocytů .;
3) mechanismus pro hlášení porušení opuholeasotsiirovannogo antigenu.
V 70. letech minulého století, Hewitt et al. (1976), bylo to, že vyskazanopredpolozhenie experimentálních nádorů u lineárních zhivotnyhv většina případů ukázat jako neimunogenní. Rezultatyklinicheskih výzkum také ukázal, že nádory u chelovekamalo odlišné od normálních tkání. Poslední obstoyatelstvomozhet částečně vysvětlit nedostatek účinné aktivace immunnoysistemy. V důsledku toho je závěr byl formulován že imunologickou zásah do nádorového procesu yavlyayutsyamaloperspektivnymi. Následně se ve studiích Van Pel a Boon (1982) na myších modelech ukázaly, že ochranné imunitní otvetmozhet být indukována proti "neimunogenní nádory"A nedostatek imunogennosti je kvůli brzy nesposobnostyuopuholi aktivovat imunitní systém, než jeho nedostatek poverhnostiopuholevyh antigeny. Tato pozorování byly následně podtverzhdenyna neimunogenní nádory u pokusných zvířat jiných druhů, kde prostřednictvím manipulaci imunitního systému (jinými slovy -vaktsinatsy) bylo zjištěno, že nádorové antigeny prisutstvuyuti na neimunogenní nádorů, a může efektivně stimulirovatimmunnuyu systém k odstranění nádorů. Tyto údaje, zdá se, že mohou být extrapolovány na lidských nádorů. Tak, všichni nádor může být citlivá na immunologicheskomuvmeshatelstvu (Boon, 1996- van der Bruggen, 1996- Rosenberg S., 1999).

Klinické studie účinné konkrétní immunoterapiibolnyh s nádory různých lokalizacích jsou drženy v nastoyascheevremya ve všech onkologických center. Objekty issledovaniyayavlyayutsya vakcína založená na autologní nebo alogenní ne modifitsirovannyhi modifikované nádorové buňky polivalentnyevaktsiny syntetické vakcíny na bázi dendritických buněk a další.

Je známo, že volný (nevázaný) antigen není rozpoznán B lymfocyty, a to i v případě, tyto buňky ekspressiruyutretseptory odpovídající antigen. Pro initsiirovatimmunny reakce, musí být antigen prezentován poverhnostiantigen-prezentující buňky v kontextu HLA molekul a jiných povrchových vassotsiatsii s molekulárními strukturami (kostimulační, adheze a další.). Tato událost je opredelyayuschimkak ve stimulaci T-buněk a při tvorbě účinné immunnogootveta (Guinan E., 1994). T buňky "paměť" initsiirovatimmunny může odpovědět v krátké době v interakci s razlichnymiantigen prezentujících buněk (B-buňky, makrofágy, dendritnyekletki), z nichž dendritické buňky (DC) jsou schopny induktsiipervichnogo nepraymirovannymi odpověď T-buněk. Hlavními svoystvamDK patří:

1) jedinečná schopnost shromažďovat T-buněk na nejvyšší skóre poverhnostiza vlastní výraz glavnogokompleksa histokompatibilní molekuly třídy II (HLA-DR, -DP a -DQ) a třídy molekulI;
2) schopnost vyjadřovat během zrání CD80 molekula CD86i CD40, které aktivují příslušné ligandy na T kletkah- CD28, CTLA-4 a CD40L;
3) schopnost produkovat řadu cytokinů, včetně interleukinu-12, který zvyšuje imunologickou odpověď v důsledku "instrukce"T buněčná diferenciace dráhy T-helper prvního typu;
4) Schopnost zachytit rozpustné antigeny prostřednictvím endocytózy;
5) přítomnost účinné mechanismy pro zpracování (zpracování) komplexní proteiny do imunogenních peptidů;
6) schopnost vykonávat role diferencované v brzlíku: navození tolerance pro tkáňové antigeny s vlastním pomoschyuudaleniya rozvojových autoreaktivních klonů T-buněk, a další.
Studie ukázaly, že počet DC v těle pacientů zlokachestvennymiopuholyami snížen, a jsou funkčně vadné. DC izolují z periferní lymfoidní a non-lymfoidní periferní krve tkaneyi obou pokusných zvířat se nádory a pacienti s rakovinou, nejsou schopny stimulovat spetsificheskiyotvet cytotoxické T lymfocyty (CTL) a slabě stimulovat T-helper buněk (Bernard, J. et al., 1997- Gabrilovich D. , et al., 1996- ZitvogelL. et al., 1996). Kromě toho, na svém povrchu je vyyavlenosnizhenie exprese adheze a kostimulačních molekul a snížení exprese takzhekriticheskoe HLA molekul, zejména I klassa.Predpolagaetsya, že snížení počtu DC a ztrátu ryadafunktsy může být jedním z hlavních důvodů nedostatku polnotsennogoimmunnogo reakci na rozvoj nádoru.

Kultivace periferních DC in vitro za podmínek, pozvolyayuschihpoluchit jejich maximální růst a aktivace, což vede k uvelicheniyuekspressii povrchové molekuly, ale jejich úroveň často okazyvalsyanedostatochnym indukovat specifickou CTL odpověď trvalý (Gabrilovich D. et al., 1996). Největší schopnost DCS comparisonwith periferní zastoupení opuholevogoantigena specifické T lymfocyty predshestvennikiDK kostní dřeně, stejně jako syngenní nebo allogenní DC z periferních krovizdorovyh jedinců, aktivován in vitro nádorové assotsiirovannymiantigenami (Palmer E. et al., 1997-Reid C., 1997) , Pouze takieDK ve většině případů normální stimulovány odpověď CTL. Etopozvolyaet považován aktivované DC slibné kandidatamidlya aktivní specifickou imunoterapii pacientů s rasprostranennymiformami maligních nádorů, včetně léčbu rezistentní kstandartnomu.

Tvorba efektivní protinádorové imunitní otvetana vaccinotherapy obvykle vyžaduje několik týdnů doneskolkih měsíců. spetsificheskoyimmunoterapii aktivní klinický účinek je tedy zpoždění (Jefford M. a kol., 2001) .Ponyatno, že tento způsob by měl být účinnější v adjuvans primeneniis účel v případě takzvaného zbytkového opuholevoybolezni. Když velká hmotnost tumoru účinnost vaktsinoterapiia priori podstatně nižší, protože v těchto případech často nablyudaetsyanedostatochnoe proniknutí do nádoru efektorovými buňkami generirovannyhv výsledkem očkování.

Vakcína může být neúčinné u pacientů s bystrymopuholevym růstu tím, že progrese zlokachestvennyeopuholi geneticky nestabilní (důsledkem mutací), a to se může rozptýlit a "vyhnutí" nové nádorové klony otraspoznavaniya imunitním systémem hostitele. Proto mnoho klinicheskieissledovaniya-DC vakcínou provedena u pacientů s onemocněním minimalnoyostatochnoy. To je vzhledem k rozhodnutí takového důležitého zadachkak zvýšení přežití a bez recidivy období. Společně tems využitím moderních způsobů imunoterapie u pacientů s rezistentní na tradiční léčbu disseminirovannymiopuholyami, pomogayutbolee plně pochopit účinnost imunitní odpovědi, růstové biologiyuopuholevogo, jakož i určení místa Imunoterapie pacientů s rakovinou kompleksnomlechenii.

Při vývoji důležité způsoby testů vakcín imeyutlaboratornye, výsledky, které mohou předvídat klinicheskoetechenie onemocnění. Mezi ně patří: výzkum spetsificheskihpeptid-HLA-tetramery intracytoplazmatická interferon -, ELISPOT testu (enzyme-linked immunospot), polymerázové řetězové reaktsiyas reverzní transkriptázy (Sznol M.? & MarincolaF., 2000). Tyto testy umožňují určit množství antigen spetsificheskihT buněk v periferní krvi a schopnost T buněk povrezhdatkletki cíle exprimující cizí antigen.

Velký spor vyvolává otázku, volby materiálu pro laboratornogoissledovaniya při hodnocení odpovědi na vaccinotherapy: perifericheskayakrov, nádorová tkáň nebo lymfy vypustit obsah uzly.Opredelenie efektorových kletokv cirkulující krve specifickou pro antigen je označen jako nejvýznamnější. Společně tems je důležité studovat spojení laboratorních parametrů iotsrochennogo regrese tumoru. Z praktického hlediska metody naibolsheeznachenie mít klinické hodnocení terapeutického účinku (kompletní, částečné regrese, stabilizaci procesů a trvání).

V současné době, budeme diskutovat různé typy myeloidních DC, které mohou být vhodné pro klinické použití: DC izolovaných z periferní krve, izih pěstují ex vivo předek kostní dřeně (CD34 + -gemopoeticheskie stvolovyekletki) odvozený od monocytů v periferní krvi. Sem DK- definovaný stupeň zrání hematopoetických buněk kostní dřeně Farlands, které hrají důležitou roli tipuantigennoy stimulaci. Setkání s imunogenní antigen přispívají k zrání nebo aktivace a funkce mohou měnit (například, migraci buněk stimulace T, produkci cytokinů a jiných).

Současně měří různými způsoby dopravy dlyaDK ex vivo antigenu. DC slouží k aktivaci specifických peptidů, ale jejich použití je omezeno v důsledku závislosti na HLA fenotipapatsienta (Nestle F., 2000). V některých nádorů opuholeassotsiirovannyeantigeny zůstávají neznámé, ale tselnyhopuholevyh buněčný lyzát používá (Ashley D. et al., 1997), peptidy, elyuirovannyes povrchu autologní nádorové buňky, konjugátů "DK-opuholevayakletka" (Hart I. & Colaco C., 1997). Opuholevoykletki RNA a DNA může být také transfekovány do DC za účelem antigennogoopuholevogo syntézy proteinů a / nebo prezentovat na svém povrchu immunogennyhpeptidov (Nair S. et al., 1998- Philip R. et al., 1998). Protivoopuholevymeffektom také mají exosomů, které jsou "antigen predstavlyayuschiepuzyrki"Odvozený od nádorové buňky nebo DC (ZitvogelL. Et al., 1999).

V poslední době se zjistilo, že volba typu DC klinicheskogoprimeneniya závisí na typu antigenu (Serody J. a kol., 2000) .DK zpracovat antigen, který může být dodán jako je peptid, protein nebo genetickou vakcínu. Nezralé DC že ispolzuyutendotsitoz aktivně a účinně zachytit Exosomy mohou být naiboleepodhodyaschimi pro dodávání imunogenní nebo antigenní proteinový kompleksov.V kontrast, zralý DC s vysokou expresí HLAmolekul může být nejvhodnější pro použití peptidov.Korotkie peptidů (od 8 do 10 zbytků aminokyselin) může napryamuyusvyazyvatsya s HLA molekul (hlavního histokompatibilního komplexu) molekul na povrchu dendritických buněk a nevyžadují zachycení antigenu a jeho klinický protsessinge.V issled vaniyah odhaduje molekulární biologicheskiemetody, které přispívají ke zvýšení funkční aktivnostiDK. Genetická manipulace DC ex vivo podporují expresi povrchových molekul naih cytokiny nebo imunostimulační molekul, které mohou posílit interakci VCT-buněk a jako výsledek, protinádorové imunitní odpovědi (Philip R. et al., 1998).

Také hledat optimální dávky DC razrabatyvaetsyagrafik očkování, hodnotil cestu podání vakcíny DC. Bylo zjištěno, že DC by měla mít následující vlastnosti:

1) po kultivaci ex vivo v vivov být životaschopné po dlouhou dobu, protože nemohou splnit jedinečnou dostatochnodolgo (vzácné) antigenspetsificheskieT buněk v lymfatických uzlinách;
2) účinně migrují do lymfatických uzlam-
3) usnadňuje in vivo efektorovou funkci T-buněk.
Kromě toho míra přežití in vivo efektorových T buněk generirovannyhs očkování;, vyžaduje nepřetržité stimulace, čímž poskytuje optimální a stabilní orientace nádoru.

Je důležité klinicky vyhodnotit podkožní, intradermální, intravenózní vnutrilimfaticheskoei DC vakcín. Zavedení vakcíny v perifericheskielimfaticheskie uzlech vyžaduje ložené DC migrují do limfoidnuyutkan a dlouhodobé udržení tam zpochybnění schopnosti buněk. Když jsou podávány intravenózně, DK uložen v plicích, játrech, slezině a kostní dřeni, ale jsou v nádorových nebo limfaticheskihuzlah útvarů není detekován (Morse M. a kol., 1999). V protivopolozhnostetomu, studie s intradermální podávání DC pocházejících z monocytů, DC ukázal migrační limfaticheskieuzly. Tyto studie používají nezralé DC a jejich kolichestvobylo nevýznamné. Většina DC zůstává v místě vpichu (Thomas R. et al., 1999). To znamená, že populace nezrelyeDK jsou optimální pro dosažení vaktsinoylimfoidnoy tkáně. Nicméně, Schuler-Thurner B et al. (2000) používá DC pocházejících z monocytů ex vivo, které effektivnostimulirovali protinádorovou imunitní odpověď. Bez přímých sravneniyaeti data lze připsat účinné migraci a predstavleniemopuholespetsificheskogo antigenu T lymfocyty aktivované exvivo DC.

Perspektivní je použití DC-vakcín gemopoeticheskimifaktorami, protizánětlivých činidel, T-buněk nebo drugimitsitokinami (Flt-3 ligand, granulocytů a makrofágů koloniestimuliruyuschiyfaktor, ligandu CD40, interleukin-2, -12, interferony?,?, Atd). Tyto rekombinantní buňka mohou být použity během kakadyuvanty DK-vaccinotherapy faktory (Pulendran B. et al., 1998- Williamson E. a kol., 1999- Nestlé F. a kol., 2001).

Tak, přehled literárních údajů vyplývá, že předložené způsoby vakcíny založené na DC onkologicheskihbolnyh léčbu, může být velmi různorodé. Vývoj perspektivnyhmetodov terapie DC vakcíny přispívá k pokroku v oblastimolekulyarnoy biologii, hybridomovou technologií, rekombinantnyeformy různých biologicky aktivních látek a mnoho drugiedostizheniya.

Otázka účinnosti protinádorových vakcín, terapeutických a pomocné primenyaemyhs cílů budou založeny na získání obektivnyhdannyh nárůst střední délky života pacientů s rakovinou, neexistuje riziko komplikací souvislosti s aplikací vakcíny a sootnosheniistoimost / účinnosti.