Monitorování hematologie reziduální reziduální nemoci u akutní myeloidní leukémie

Pro další zvýšení účinnosti léčby je nezbytná kritéria imetchetkie pro včasné predikci recidivy. Zcela obnadezhivayuschierezultaty poskytuje monitorování chorobě metodapolimeraznoy řetězové reakce (PCR, PCR), které mají vysokou chuvstvitelnostyui umožňující detekci neoplastických buněk v krvi dazhetogda když jejich množství je velmi nízká a není vyšší než 1x106 1h103ili.

PCR způsob se používá s velkým úspěchem v hematologickým praktikeuzhe asi 10 let. Konkrétně, RT-PCR (polymerázová řetězová reaktsiyas reverzní transkripce) může detekovat jednotlivé leykoznyekletki, přetrvávající během remise, to znamená, dává sledování vozmozhnostprovodit tzv minimální reziduální nemoci (MRD). Je to pro detekci a kvantifikaci himernyhgenov vytvořený v důsledku specifické chromozomální inverzí translokatsiyili velmi důležité.

Velmi působivé výsledků se dosáhne v poslední 10-15 letpri molekulárně genetické kontrolní mieloblastnogoleykoza akutní (AML). Tyto výsledky a je určen pro komunikaci.

Je známo, že pro většinu klinických a morfologické typy gemoblastozovharakterny nenáhodné změny karyotypu často hromosomnyetranslokatsii, což vede k vytvoření chimérických genů.

Je ukázáno, že v případě AML, vyznačující se tím, leukemické buňky harakterizuyutsyanalichiem specifické chimérické geny, a proto jejich himernyhproduktov (transkripty chimérické geny), čímž se dosáhne terapevticheskoyremissii doprovázen výrazným poklesem krevního himernogotranskripta a kostní dřeně u pacientů, často až doplněno zmizení přichází tzv molekulární remissiya.Pokazano také, že v každém stadiu remise mozhetnablyudatsya prudký nárůst obsahu chimérické krve transkriptav Je kostní dřeň pacienta, tedy je tam molekulyarnyyretsidiv. V návaznosti na to se určitě hematologického relapsu, obvykle 4 - 6 měsíců později. Celkově je známo, že primeneniemolekulyarno genetické techniky znachitelnobolee vytváří možnost včasné diagnózy relapsu, než standardní klinické laboratornyetesty.

Dosažené v posledních letech, pokroky v léčení AML v znachitelnoymere kvůli výběru terapeutických protokolů v souladu s výsledky v EU analýzy chromozomu v době diagnoza.V Tento přístup je založen na závěru, že karyotyp leykemicheskihkletok představuje důležitý prognostický znak (Arthuret al.-1989- Mrozek et al., 1997). Existují tři skupiny hromosomnyhanomaly stanovení prognózy: nepříznivá, promezhutochnyyi relativně příznivý. Pětileté bez onemocnění vyzhivaemostv tyto skupiny značně liší: v první skupině, takže sostavlyaet5-15%, a třetí - 35-70% (Grimwade et al, 1998- Buchneret al, 1996 ...).

Je třeba poznamenat, že nové terapeutické protokoly znachitelnouluchshili délku života pacientů ve skupině s blagopriyatnymprognozom, ale neměnil kurz ve skupině s neblagopriyatnymprognozom.

Prognosticky jsou příznivé translokace t (8-21) (q22-q22) a t (15-17) (q22-Q21), a inverze inv (16) (p13-q22) (Dastugueet al., 1995- Grimwade kol ., 1998).

Translokace t (8-21) - jeden z nejčastějších spetsificheskihtranslokatsy, že se nalézá v asi 20% dospělých a 40% dětí s M2 (FAB klasifikace) jedné AML. Jako výsledek etoytranslokatsii tvorbu chimérického genu v soedineniifragmentov dva odlišné geny AML1 uspořádána na hromosome21 a ETO (MTG8), který se nachází na chromosomu 8. Chimérický transkriptAML1-ETO možné určit pomocí PCR prakticky veškerou bolnyhs translokaci (8-21) v v době diagnózy. Translokatsiyamozhet být skryté, není vidět ve standardním tsitogeneticheskomissledovanii, ale to, že je detekován flyuorestsentnoygibridizatsii in situ (FISH), a / nebo PCR (Palisgaard et al., 1998) .u mnoho pacientů chimérická transkript byl schopen detekovat vtechenie dlouhodobé (několik let) remise. bylo zjištěno, že PCR není vhodné pro monitorování OMLs translokaci (8-21). V poslední době byl vyvinut způsob, který umožňuje kolichestvennoyPCR diagnostiku molekulární hematologie retsidivai předvídat relapsu ke zvýšení hladiny transkriptu.

Translokace t (15 až 17) (q22-q21) a odpovídající chimérický genyPML-RARA a RARA-PML striktně specifické pro akutní promielotsitarnogoleykoza (APL, M3). Leukémie translokace t (15 až 17) má diferenciační činidla unikalnoychuvstvitelnostyu - ATRA. Primenenienazvannogo činidlo, a to zejména v kombinaci s chemoterapií, léčba ALI suschestvennouluchshilo: 70-90% případů dostignutmnogoletney remise až do úplného vyléčení. Z tohoto důvodu, detekce translokace t (15-17) na cytogenetické nebo molekulyarnomurovne je rozhodující pro výběr léčby. Dostizheniepolnoy remise v APL je doprovázen vymizení himernogotranskripta, pokud se opět nepodaří odhalit tuto obychnopredveschaet relapsu (Hascovec et al., 1998). V literatuře opublikovanydva případě úspěšného prevenci hematologických retsidivaOPL po intenzifikaci léčby v raném molekulárního relapsu (LoCoco et al., 1998).

Skupina chromozomálních abnormalit stanovení relativní blagopriyatnyyprognoz v AML, včetně inverze inv (16) (p13q22) a translokatsiyat (16-16) (p13q22), což vede ke vzniku chimérického genu CBFbeta-MYH11.Eti anomálie patognomické pro zvláštní tvar AML - M4Eoi také pozorována u 40% případů AML-M4. Strogayakorrelyatsiya existuje mezi přítomností abnormálních eosinofilů a prisutstvieminversii16. Pomocí standardní cytogenetické studie etuhromosomnuyu anomálie je možné detekovat pouze v přípravách ochenvysokogo kvalitu, ve stejnou dobu, FISH a PCR použití vyyavlyaetee hladce. Většina pacientů s inv (16) gematologicheskayaremissiya získané jako výsledek ošetření, následované neskolkootsrochennoy molekulární remise. Znovuobjevení harakternogogibridnogo přepis věští nevyhnutelný úpadek (Laczikaet al., 1998).

Tyto RCRC RAMS začala pracovat na molekulárně cytogenetických AML monitoringupri tekoucí chromozomálních abnormalit, predveschayuschimihoroshy odpovědi na terapii. V diagnostice v každé úrovni výchozích sluchaeopredelyaetsya chimérické přepis harakternogodlya translokace nainstalovaný na issledovanii.V cytogenetické remisi indukční křivky určí urovnyatranskripta pokles v kostní dřeni a v krvi pod vlivem léčby. Issledovaniepredprinyato s cílem získat odpovědi na následující otázky:

1) časový interval mezi začátkem léčení a začátkem možného remissiisvidetelstvuet počátku recidivy?
2), jaká úroveň exprese chimérické přepis svědectví relapsu aproximace v remisi?
3) Jaké úroveň exprese chimérického genu předpovídá pozdniyretsidiv?
4), zda je možné, aby se zabránilo relapsu hematologickým tedy prodloužit remisi a délku života pacienta, pro intenzivnější léčbu během molekulární relapsu?

Práce je důležité posoudit klinický význam při monitoringaMRD myeloidní leukémie, a zejména ke zlepšení protokol rezultatovlecheniya změnou na molekulyarnogoretsidiva znamení.

Reference:

1. Arthur D, Berger R, Golomb HM, Swansbury GJ, Bloomfield CD, de la Chapelle A, Dewald GW, Garson OM, Hagemejer A, Kaneko Y, Mitelman F, Pierre RW, Ruutu T, Sakurai M, Lawler SD a RowleyJD , Cancer Genet Cytogenet. I989, 40: 203-216.

2. Buchner T, Heineke A. leukémie 1996,10 Suppl 1: 28-29.

3. Dastugue N, Payen C, Lafage-Pochitaloff M, Bernard P, LerouxD, Huguet-Rigal F, Stoppa A-M, Marit G, L Molina, Michallet M, Maraninchi D, Attal M a odkazuje. J leukémie 1995, 9: 1491-1498.

4. Grimwade D, Gorman P, Duprez E, Howe K., Langabeer S, OliverF, Walker H, Culligan D, Waters J, Pompert M, Goldstonova A, BurnettA, Freemont P, Jemné D, Solomon E. Blood 1997 90: 4.876 - 4.875.

5. Grimwade D, Walker H, Oliver F, Wheatley K, Harrison C, HarrisonG Rees J, Hann I, Stevens R, Burnett A, Goldstonova A. Krevní 1998,92: 2322-2333.

6. Hascovec C, Polák J., Pechova R, Lemez P, Zemanová Z, PenkaM, Zak P, Schwarz J. Brit J Haematol. 1998, 102: 100.

7. LoCoco F, Diverio D, Petti MC, Avvisati G, Biondi A, MeloniG, Mandelli F. Brit J Haematol. 1998: 102: 149.

8. Mrozek K, K Heinonen, de la Chapelle A, Bloomfield C. Seminin Oncol 1997, 24: 17-31.

9. Palisgaard N, Hokland P, Riishoj DC, Bedersen B a JorgensenP. Blood 1998, 92: 574-588.