Antigen prezentující funkci dendritických buněk imunomodulátorů. Účinek imunomodulátor na lymfocytech

Závěrečná fáze funkce dendritických buněk jako součást přirozené imunity je antigenu prezentaci a dává směr T-buněčné imunitní odpovědi. Proto byly provedeny pokusy o vlivu na antigen IMMP funkce DC a jejich schopnost prezentovat antigen na naivních T lymfocytů.

Zejména to byl zkoumán schopnost dendritických buněk, vytvořený pod vlivem IMMP, stimulovat proliferaci lymfocytů syngenních myši CBA. Za tímto účelem, ML sleziny myší (106 buněk) koinkubirovali po dobu 6 dnů s DC (5 x 104), získaných z buněk kostní dřeně exponovaných IMMP. Jako referenční léky používané LPS K. pneumoniae a TNF-u.

ohodnocení proliferační aktivita ML, stimulované dendritických buněk byla provedena kolorimetrickým testem za použití vitálního barviva AlamarBlue (Biosours, USA). Vypočítaná stimulační index, který charakterizuje poměr proliferační aktivitu ML, pokud jsou stimulovány zralý DC až ML proliferační aktivitu, když jsou stimulovány nezralých DCS.

Tvořil pod vlivem IMMP, Zralé dendritické buňky stimulované proliferační aktivity mononukleárních leukocytů myší. Aktivita těchto buněk byla srovnatelná s aktivitou DC zrál po interakci s LPS nebo TNF-a, s výjimkou DC stimulovaných ARF. V tomto případě proliferace lymfocytů byla nižší ve srovnání s jinými látkami ze DC zrání, ale vyšší než u nezralých DC. Toto může být spojeno s tvorbou bazénu makrofágů, které jsou nižší než aktivita zralých DC. V tomto případě je stimulační index 1,4 ve všech ostatních případech, stimulační index byl v rozmezí 2-2.3.

Následující experimenty zkoumány antigen prezentující funkce dendritických buněk, odvozený od buněk kostní dřeně myší, které byly vytvořené pod vlivem IMMP schopnost DC prezentovat antigen T lymfocytů byla hodnocena změnou aktivity cytotoxických lymfocytů jejich kultivací v přítomnosti DC.

jak to udělat, Nezralé dendritické buňky naložené lyzátem různých nádorových buněk a inkubovány s imunomodulátory po dobu 16 hodin. DC byly promyty a pak inkubovány s syngenních myší lymfocyty v poměru 1:20 na 6 dnů v médiu RPMI-1640. Kontroly byly DC neléčí lyzát nádorových buněk. Dále se promyjí lymfocyty koinkubirovali kultivovat nádorové linie studovaných v poměru 5: 1, po dobu 24 hodin.

Potom jsme vyhodnotili lymfocyt cytotoxicity na nádorových buněčných linií myšího lymfomu YAC-1, Ehrlich, L929, 562 K v testovací vymáhání 3- (4,5-dimethyl-thiazol-2-yl) -2,5-difenyltetrazoliumbromid (MTT-test). V první fázi jsme určili schopnost DCs přítomných antigenů vystaveny Immunovac-VP-4 kontroly byly DC ošetřených TNF-a.

lymfocyt cytotoxicity proti nádorové linie testované pohyboval v rozmezí 33,9-43,9%, přídavek nezralých DC nevedlo k výraznému zvýšení tohoto parametru. DC zrající vliv vody VP-4 vakcínu, měl schopnost prezentovat antigen naivní T-buňky, což vede k tvorbě cytotoxických efektorů, které jsou součástí specifického adaptivní imunity.

A skutečně, po do kontaktu in vitro T-lymfocytů z zrající pod vlivem různých induktorů dendritických buněk, které byly načteny s antigeny studovaných transplantabilní nádorové buněčné linie T-buňky získávají schopnost lyžovat prezentovaných antigen homologní k cílové buňce. DC aktivován Immunovac-PE-4, a naložené nádorovými antigeny, poskytované v homologní zvýšení systému cyto-toxicity na 83,5-79,3%. DC aktivované s TNF-a a naložené nádorovými antigeny, v homologním systému, za předpokladu, že stejný stupeň cytotoxicity 89,1-72,5%. Zároveň proti jiným antigenům nádorových buněk, které nebyly ošetřeny DC, cyto-toxická aktivita byla nižší a pohybovala se mezi 59,3-37,5% aktivace Immunovac-VP-4 a 59,3-40,1 % s TNF-a.