Imunizaci proti infekci dendritickými buňkami. Účinnost aktivace přirozené imunity

Příští byl zkoumán schopnost syngenních dendritických buněk vyvolat specifickou ochranu proti infekci v modelu K. pneumoniae K2. DC byly získány z kostní dřeně myší způsobem popsaným výše v den 7 se kultura byla přidána do DC lyzátu K. pneumoniae K2 (50 ul / ml) a 20 ng / ml TNF-a. Na 9. den DC byly promyty a CBA imunizovaných.

myši imunizuje v různých pokusech, 4-, 3- a 2-krát v intervalu 2 týdnů. V 1. experimentu DC byly injikovány subkutánně 2,5-3,0h106 buněk v 0,5 ml, v 2. pokusu a potom - stejný počet buněk, byl podáván 3krát subkutánně nebo intraperitoneálně. Imunogenní aktivita dendritické buňky pulzovány K. pneumoniae lyzát K2 byla stanovena intraperitoneální infekce myši K. pneumoniae K2 virulentního kmene v dávce 100 mikrobů buněk v objemu 0,5 ml 0,9% roztoku chloridu sodného. Myši byly infikovány 14 dní po poslední vakcinaci, DC Zkušenosti doprovázel kontrolu infekce dávku na neočkovaných myší. Pozorování zvířat se provádí po dobu 10 dnů (smrt myší byla zastavena v den 7 po infekci).

zralých DC, K. pneumoniae lyzátu pulzní, v tomto režimu imunizace a infikovaných myší po 14 dnech varoval smrt před letální dávkou homologní infekce 83,3-100% případů se 100% kontrolních usmrcení zvířat, zatímco nezralé DC se stejným experimentálním nastavení žádný mají údaje ochranná aktivita získaná naznačují možnost vzniku adaptivní (specifické) imunitní reakce pod vlivem DC léčených homologní antigenem.

následující pokusy studovat specifický účinek Proto voinfektsionnogo dendritické buňky zrající pod vlivem různých antigenu: Lyzát K. pneumoniae K2 (50 ul / ml), TNF-a (20 ng / ml) a Immunovac-VI-4 (25 ug / ml), schéma DC imunizace byla snížena na podání dvou po 14 dnech a infikovány K. pneumoniae K2 myším v dávce 25-50 mikrobiálních buněk.

zralých DC, K. pneumoniae lyzátu vložen K2 (s TNF-a a bez TNF-a), s dvojitou imunizaci zajištěna ochrana myší ve 100% případů, ve srovnání s 20% myší, které přežily v ovládacím prvku. Zatímco DC zrající pod vlivem pouze TNF-a, ne chránit myši před letální dávky infekce jako DC zraje působením Immunovac-VP-4, za předpokladu, protektivnyi účinek v 33,3% případů. Při tomto testu se rovněž získal data, která pouze DC naložené homologní antigeny, měl významný vliv protektivnyi identifikovanou námi do 14 dnů po očkování. To demonstruje schopnost DC prezentujících antigeny pro T-lymfocyty, které se diferencují do specifických efektorových buněk.

shrnující výše, je třeba poznamenat, že funkce prezentující antigen z DC je také instalován v myším modelu infekce. Konkrétní ochranný účinek vůči K. pneumoniae K2, testované 14 dní po podání 2-4 krát DC vytvořené pouze DC naložené homologní antigenem. Zralé DC použití zrání jako induktor Immunovac-VP-4, ale není vložen s antigenem, aby malou ochranu tohoto období, pravděpodobně v důsledku přítomnosti křížově reagujících antigenů v kompozici podle antigenních složek Immunovac VP-4.

Aktivace přirozené imunity a schopnost vytvořit ochranu proti neznámého patogenu je indikován pro současné podání myším zralé a nezralé DC, a jako neznámý patogen K. pneumoniae K2.

Experimentální fakta, potvrzuje hypotézu, že aktivace vrozená imunita imunomodulátory bakteriálního původu, jsou agonisty TLR, to vede k rychlému vývoji rezistence na heterologní patogenům. Když S typhimurium infekce očkovaných jednou Immunovac-VP-4 u myší ukázaly významné zvýšení délky života v porovnání s intaktních zvířat.

Vyšetřování cytokinu profil očkovaných Immunovac-VP-4 myši již vykazovaly po 0,5 hodinách po podání 4-EP zvýšení exprese IL-10, IL-6, 4 hodiny po zvýšení produkce IL-12, IFN-y. Po infekci Tyto myši S. typhimurium ukázala úplné rezistenci na čtyři dny (v té době k úmrtí 85% intaktní myší) a slabý současně expresi cytokinů.