Stanovení aktivity C systému protein s

Gen zodpovědný za syntézu proteinu C, je lokalizován na chromozomu 2 (ql3-ql4). Hlavní funkcí tohoto fyziologického antikoagulační je hlavní neenzymatické inaktivace koagulačních faktorů (FVA, FVIlla).

Video: Zařízení pro odstranění toxinů z těla

Pacienti s vrozeným nedostatkem proteinu C, existuje tendence, aby opakující se trombózy a tromboembolie. Deficit proteinu C se dědí autosomálně, homozygotů a dvoulůžkové heterozygotes zemře v raném dětství od trombózy.

Principem metody

Metoda je založena na vyhodnocení aPTT směsi (zředěného vzorku BTP, proteinu C deficitní plazmy, proteinu C, aktivátor APTT činidlo). Protein C se aktivuje PRP testovaný vzorek činidlem připraveným copperhead hadí jed od Agkistrodon contortrix. Aktivovaný protein C koagulace ničí faktorů Va a Vila, obsažené v testovaném vzorku směsi a přidané proteinu C-deficitní plasmy a tím prodloužení APTT se zaznamenává po přidání chloridu vápenatého. Při nízké aktivitě proteinu C je exprimován mírně prodloužení APTT. Ředění kalibrační vzorek BTP umožňují křivku a pro stanovení aktivity proteinu C.

Video: oxidy dusíku (NO)

Reakční činidla a zařízení

• Protein C Activator (Protac).
• APTT činidlo.
• Nedostatečná v proteinu C plazmě.
• Roztok chloridu vápenatého (0,025 M).
• tlumivý roztok.
• PRP vzorek o známé aktivitě proteinu C.
• Coagulometer.

Krevní vzorky pro výzkum

Pro stanovení aktivity proteinu C se používá BTP.

Neupravené kalibračních vzorků a zkušební vzorek se zředí roztokem pufru v poměru 1:10.

Vyhodnocení výsledků studie

Pro konstrukci kalibrační křivky vyžaduje BTP vzorek o známé aktivitě proteinu S. Pro konstrukci kalibrační křivky pomocí srážení čas v sekundách, získané ve studii zředěných kalibračních vzorků se známou aktivitou protein C.

Interpretace výsledků průzkumu

Klinický obraz vrozeným nedostatkem proteinu C je ovládán rekurentní žilní trombózy a tromboembolie. Řada pacientů, kteří měli kožní nekrózu, potrat, a další. U dětí s nedostatkem proteinu C je často pozorovány maligní purpura (purpura fulminans).

Získané deficience proteinu C může být v důsledku nedostatečného syntéze hepatocytů, zvýšené spotřeby vzhledem k motoru s vnitřním spalováním, léčby nepřímými antikoagulancii a jiné. U některých pacientů s VA pozorováno nadhodnocení své činnosti.

Příčiny chyb

• Chyby Preanalytická fáze studie.
• Kontakt s heparinem studovali krev z žilního katétru.

Další analytické techniky

Funkční aktivita proteinu C amidolytickými určit nebo koagulačních postupů.

Video: D. Mavrodi Přednáška # 3 "Úloha vylučovací systémy třetí typ bílkoviny v ..."

Pro stanovení koncentrace proteinu C s použitím ELISA, avšak při porovnání výsledků imunologické a funkční techniky neodpovídající výsledky pozorované u pacientů s molekulární abnormality protein C.

Protein S Aktivita

Protein S - vitamin K-dependentní glykoprotein zapojen jako neenzymatické kofaktoru aktivovaný protein C proteolytické degradaci Va a Vila koagulačních faktorů. Gen zodpovědný za syntézu proteinu S, je lokalizován na chromozómu 3 v lidské poloze pll.l-qll.2. Proteinu S v krvi, je k dispozici ve dvou verzích: jako volný protein (asi 40%) a jako spojená s S4 složky komplementu (asi 60%). Pokles protein S činnost zvyšuje riziko trombózy a tromboembolie.

Principem metody

Funkční techniky jsou založeny na registrovaná závažnost prodloužení směs srážení proteinu S deficitní plazmy a plazmové studoval při podání v aktivovaný protein C. Zkušební systém pro stanovení času srážení v podobném testovacím systému výrobci používají různé koagulační stimulanty (Russell zmije jed, APTT činidla aktivované koagulační faktor IX nebo kol.). V normálním obsahem proteinu S pod vlivem aktivovaného proteinu C způsobuje významné prodloužení doby srážení (v důsledku zničení neenzymatické koagulačních faktorů), zatímco nedostatkem proteinu S se vyjadřuje mnohem slabší (v důsledku neúčinné ničení neenzymatické faktorů aktivovaných protein C).

Reakční činidla a zařízení

• Proteinu S deficitní plasma.
• Aktivační činidlo (fosfolipidy, Russell zmije jed nebo jiné aktivátory, heparin neutralizační činidlo, atd).
• Aktivovaný protein C.
• Roztok chloridu vápenatého (0,025 M).
• tlumivý roztok.
• PRP vzorku se známým obsahem proteinu S.
• Coagulometer.

Vzorky krve pro studii pro stanovení aktivity proteinu S pomocí PPP.

Potom se směs připravená a zkoumány BTP vzorky roztoku pufru byly zředěny v poměru 1:10.

Metody stanovení

Průběh stanovení aktivity proteinu S se výrazně liší od použití činidel a zařízení různých výrobců, takže akční sekvence laboratorní lékař musí striktně dodržovat dokumentace k kitu reagencií a přizpůsobit jej na stávající laboratoře v koagulometru.

Vyhodnocení výsledků studie

Studie koagulační čas zředěné vzorky PRP se známou koncentrací proteinu S umožňuje vytvoření kalibrační křivky pro stanovení aktivity tohoto fyziologického antikoagulační procent normálu.

U zdravých lidí, aktivita proteinu S v rozmezí 60-130%.

Interpretace výsledků průzkumu

Vrozená deficience proteinu S - vzácná porucha antikoagulant hemostáze. První popis nedostatkem proteinu S byl zaveden v roce 1984 NR Schwarz a kol. Klinický obraz onemocnění dominuje rekurentní flebotrombózy a tromboembolie. Podobně jako mnoho jiných vad antikoagulační hemostázy, tato patologie se přenáší autozomálně. Pro rozlišení mezi třemi typy vrozeným nedostatkem proteinu S.

Možnosti vrozený nedostatek proteinu S

• Typ: metoda I koalice: Snizhen- volný protein S: Protein Celkový Snizhen- S: Snížená.
• Typ: Metoda II koalice: Snizhen- volný protein S: Normalizace Celková bílkovina S: Norm.
• Typ: Metoda III koalice: Snizhen- volný protein S: Protein Celkový Snizhen- S: Norm.

Typ I je charakterizován nízkým obsahem proteinu S použitím různých provedení, imunologické stanovení, jakož i snížit jeho funkční aktivitu. U typu deficit II pozorován pokles funkční aktivitu, nicméně, celkový a volný S proteinová frakce nebudou poškozeny. Typ III je znázorněno kombinované snížení funkční aktivity bez proteinu S a jeho frakce. Tak, pro identifikaci typu nedostatkem proteinu S je nutné použít koagulace a imunologické metody pro jeho stanovení.

V klinické praxi je mnohem běžnější získaný deficit proteinu S. sníženou aktivitu proteinu S se nachází v nefrotického syndromu, těhotenství, estrogenové terapie, L-asparagináza, a další. U dětí s nedostatkem proteinu S pozorovány maligní purpura (purpura fulminans).

Příčiny chyb

• Heparin z žilního katétru.
• Hemolýza v testovaném vzorku krve.
• Nesprávné dávkování citrátu, když se vezme krev.

Další analytické techniky zcela rozšířený způsob založený na použití testu ELISA pro stanovení volného proteinu S a S4 spojené se složkou komplementu. Také je popsán (ale není na trhu) funkční způsobu stanovení tohoto antikoagulans, založený na použití chromogenních substrátů.