Vlastnosti protilátkou mRNA. MRNA struktura imunoglobulinů

pokud jde o přidělení Čisté mRNA přípravky se nechá přejít na přímé studium jejich fyzikálních a chemických vlastností a struktuře. Ihned bylo zjištěno, že sedimentační konstantu, a tím i molekulová hmotnost a rozměry mRNA kódující H a L-hodnota předem vysoko nad očekávalo. MRNA sedimentační konstanty pro H řetězců definovaný hladký 12-17S (Namba, Hanaoka, 1969- Bernardini, Tonegawa, 1973- Cowan ea, 1976), a pro L-mRNA -12- 15S (Tonegawa, Baldi, 1973- Mach ea, 1973- Schechter ea, 1976).

příslušně Molekulové hmotnosti těchto mRNA až 440 000 v případě, že L-mRNA, spíše než 220,000, jak se dříve myslelo, a 650 000, a nikoli na 400000 H-mRNA. Počet nukleotidů v mRNA L-1100-1250, a v H-mRNA -1900.

To lze snadno spočítat, že pro syntézu L-řetězec skládající se z 214 aminokyselinových zbytků vyžaduje pouze ~ 650 nukleotidů (m. A. 220000). Pro syntézu prekurzoru obsahujícího dalších 20 NH 2-terminální a COOH-terminální 25 aminokyselinových zbytků, potřebné pro dalších 60 a 75 nukleotidů (m. A. 45000). Celková syntéza prekurzoru pro L-řetězec 785 nukleotidů, je dostatečná, tj. F ~ 65% všech dostupných mRNA.

podobně pro syntézu H-řetězce, skládající se z 450 aminokyselin, je požadované nukleotidy 1350 a v H-mRNA, jak jsme viděli, je součástí 1900. To znamená, že počet nukleotidů a bonusů je v tomto případě 650. Jak jsou „nepoužitý“ 30% nukleotidů, a kde se nacházejí jaká je jejich funkce?

Studie struktury obou mRNA, kódující L řetězec (Brownlee e. a., 1973- Faust e. a., 1974), a jeden mRNA kódující H řetězec (Vegpag-Dini, Tonegawa, 1973, 1974) ukázala, že 200 nukleotidů (m. . 65000) v těchto mRNA tvořily polyA sekvence nacházející se na 3`-konci molekuly. Jejich funkce je stále nejasná. Je zřejmé pouze to, že, protože poly-nukleotidy nacházejí ve všech dosud studovaných, mRNA kódující syntézu bílkovin jako vázaných a volných polyribosomes (Rosenfeld např. A., 1972), zvláštního vztahu k syntéze vylučovaných proteinů obecně, a imunoglobuliny jsou zejména nemají.

Je známo, že poly-end Spojuje molekuly mRNA po ukončení jeho syntézy. Předpokládá se, že místo polyA hraje roli v transportu mRNA z jádra do cytoplazmy, ale přítomnost poly-fáze ve virovém genomu se replikuje v cytoplazmě znamená, že poly-nukleotidy musí být, a další funkce. Je možné, že místo polyA je nutné změnit sekundární a terciární struktury mRNA a zvýšení její stability nebo vázat se na mRNA poliribosomami- snad hrají roli v translace mRNA, i když to není jasně prokázána (Rosenfeld např. A., 1972).
Také 200 nukleotidů, vztahující se k podílu polyA místo v L-200 mRNA zůstává nukleotidy nepřenáší a známé, kde se nachází.

L, mRNA tsepevoy od MOPC byly v poslední době zjištěno, 41 buňky menší množství methylguanosine a N6-N7-methylguanosine být umístěn na 5` konce a je spojen s přilehlými nukleotidy 5`, 5`-pyrofosfátu vazby. Nyní je známo, že přítomnost zbytku na metilguanidilovogo 5`-konci je nutné pro stabilizaci a translaci mRNA v eukaryot.

Videa: 44 - genetického kódu kodony Trioly); synonyma

údaje o dešifrování mRNA strukturu jsou předběžné. Podle autorů, nepřesně určena rozměry na 5` netranslatované oblasti, zatímco pouze 194 pozdní mRNA nukleotidy byly schopny „atribut“ pole protein kódovaný řetězec skládající se z 75 aminokyselin (z 214 v celé L-řetězec).

podobná práce Bylo provedeno s mRNA, kódující H řetězec MOPC 21 (Cowan e. a., 1976). Pomocí jednoho z mutantů MOPC 21 Syntéza H-řetězce CH1 domény delece, takže dekódování 18 oligonukleotidů, které obsahují základnu 202 a které patří i V-, a C-domény. H-mRNA byla také detekována a poliA- nepřeložené nukleotidů.

Je třeba poznamenat, že základní hodnota Výsledek, vyrábí v těchto pokusech, je stále ještě v tom, že mají konečně vyřešen problém syntézy H- a L-tsepsy jako celku, a na skutečnosti sloučit informace o struktuře V- a C-domény na úrovni DNA, by L-mRNA nejen pro identifikaci nukleotidové sekvence kódující V- a C-domény a ukázat, že jsou na stejné molekule, ale i zvýraznit zbytky kódující oligonukleotid, 105-108, t. j. na kloub V- a C-domény.
Jak jsme viděli výše, podobné výsledky byly získány s použitím jiného přístupu je na molekulární úrovni.

Kromě toho ve prospěch fúze Klínové a C-geny na úrovni DNA a čtení informací již obsažených v těchto genů jako jediného genu, experimenty ukazují, somatické hybridní buňky produkující imunoglobuliny se liší v jejich V- a C-domény (Margulies např. a., 1977- Milstein e. a., 1977) , V žádném z těchto experimentech nebyla pozorována tvorba molekul rekombinaptnyh obsahující V-oblast kódovaného jedním partnerem a C oblasti kódovaného ostatními.