D-dimer: co to je norma

Působení enzymu komplexu t-PA-plazminogenu produkoval enzym schopný ničit fibrinovou sraženinu, - plasminem. V průběhu degradace fibrinu, provádí tento klíčový enzym v fibrinolytického systému v protofibril (D = D-E-D = D-E-D = D) jsou odděleny D-dimery (D = D) a E fragmentů (E-). Vzhledem k tomu, D-dimeru jsou D-D-vazby (zesítění), které nejsou přítomny v fibrinogen, fibrin monomer a volné fibrinový polymer, zvýšení jeho koncentrace v krvi ukazuje realizaci aktivace koagulace a fibrinolýzy.

Principem metody

Princip metody ELISA je založen na specifické vazbě D-dimer monoklonální protilátky na mikrodestiček povrchu. Po odstranění látky, které nejsou vázané na mikrodestičky, inkubovány s enzymem značená protilátka (konjugát). Výsledkem je, že na povrchu, na kterém mikrodestiček přístupových protilátek značených enzymem komplexů na stávající D-dimer-anti-O-dimeru. Přidáno po promytí 3,3`, 5,5`-tetramethylbenzidin umožňuje vyhodnotit aktivitu enzymu charakteristického zbarvení zkušební směsi. Intenzita barvy je přímo úměrná enzymatické aktivity, a tudíž množství analytu ve vzorku.

Reakční činidla a zařízení

• Enzym (králičí nebo kozí protilátka konjugovaná s křenovou peroxidázou).
• Mikrodestička potaženy anti-D-dimer otvoru.
• Kalibrátor / kalibrátory.
• Vzorek vyrovnávací paměti.
• Promývací pufr.
• Roztok chromogenu / substrátu (chromogen - tetrametylbenzidinu podkladu - peroxid vodíku).
• Zastavovací roztok (kyselina 0,5 M sírové).
• Zařízení pro provedení ELISA (podložku, čtečku pro tablety a další.).

Distributor Diagnostická souprava činidel - CJSC "BIOHIMMAK".

Krevní vzorky pro výzkum

Jako vzorek pro stanovení koncentrace D-dimeru, použití stabilizované plazmové citrátu sodného plné krve. Rysy přípravu vzorků podrobně zkoumána v příloze 3.

Videa: Zvýšení D-Dimer s IVF (? Má e-dimer implantaci)

Metody stanovení

Činidla součástí soupravy, a deska před testem musí být při pokojové teplotě. Sekvence akcí laboratoř lékař při stanovení hladiny D-dimeru se musí zcela v souladu s pokyny k kitu reagencií.

Video: Express analyzátor kardiomarkerů a D-dimer RAMP Reader

Výsledky vyhodnocení studie pro měření koncentrace D-dimerů je nutné použít kalibrační křivky. Kalibrátory v duplikátu se doporučuje prozkoumat definice, jakož i vytvořit novou kalibrační křivku pro každý nový diagnostických souprav. Pro konstrukci kalibrační křivky pomocí hodnotu absorbance získané v detekci různých koncentrací D-dimeru.

Je třeba zdůraznit, že v době psaní monografie žádný všeobecně přijímaný standardní D-dimer, takže výrobci používají různé diagnostické soupravy a vzorky jednotek pro jeho určení. Kromě tradičního obsahu indikace hmotnost na jednotku objemu (mg / l ng / ml, ug / ml, mg / l, nmol / l), řada výrobců diagnostických souprav návrhů stanovení D-dimerů, posouzených v jednotkách ekvivalentních fibrinogenu (FEU mg / L).

Video: Mazání gear grinder (LBM)

Tato vlastnost je velmi důležitým faktorem, protože v různých provedeních prezentaci výsledků výzkumu objeví koncentrace (mg / ml), a normální rozsah a výsledky pro stanovení různých měřicích jednotek se liší od asi 2 krát. Často, vzhledem k nedostatku jednotných norem, rozdíly v pozadí mnoha patologických stavů (DIC, plicní embolie a několik dalších), při použití různých možností pro vyjádření výsledků se liší o více než 2 krát.

Vzorec pro výpočet výsledků stanovení koncentrace D-dimerů v jednotkách SI: [nmol / l] = [ug / ml] x 5476. Nejběžněji používané hmotnostní jednotky si navzájem odpovídají následujícím způsobem: 250 ng / ml = 0,25 ug / ml, 0,25 mg / l = 250 g / l.

Normální rozmezí koncentrací D-dimeru se stanoví v každé laboratoři se znaky zařízení a spotřebního materiálu. Normální hladiny D-dimerů, určené většinou výrobců je menší než 250 mg / l, méně než 0,5 mg / l FEU. Vzhledem k tomu, že poločas D-dimerů je více než 24 hodin, jeho hladina je stabilní dostatečně dlouho.

Vyhodnocení výsledků zkoušek by měly být prováděny s přihlédnutím k definici korektnosti. Chcete-li kontrolovat kvalitu jednotlivých kontrolních laboratořích navrženo použít materiály s jednotkami doporučené výrobcem.

Interpretace výsledků průzkumu

Stanovení koncentrace D-dimerů je často používán pro detekci trombózy a tromboembolie. Specifičnost tohoto indexu s ohledem na trombotických poruch je omezena, protože tento index se zvyšuje, a na mnoha dalších patologických stavů.

I přes omezený specifičnosti testu, je velmi vysoký informace trombóza obsah a tromboembolie, protože test prokazuje velmi dobrou negativním prognostickým úroveň, tj. Negativní výsledek testu E. A je téměř vždy svědčí o nepřítomnosti tromboembolických procesů.

Vysoké hladiny D-dimeru třeba vykládat s ohledem na výsledky dalších zkoušek a klinického onemocnění. Tento index je také použít k hodnocení antitrombotické účinnosti terapie.

Další analytické techniky Navíc ELISA pro stanovení použit D-dimerů a jiných imunochemických technik (imunoturbidimetrie, immunohemilyuminestsentsiya, latexová aglutinace, imunochromatografii, membrána imunodifúznímu). Na trhu jsou široce zastoupeny semikvantitativní způsoby stanovení jej. Mnoho moderních modelů automatických a poloautomatických koagulometrů schopna vyčíslit výši D-dimeru pomocí imunoturbidimetrie.

Příčiny chyb

• Nedodržení režimu skladování teploty.
• Porušení promývání (pro ruční praní je třeba omýt alespoň 3-4 krát). Po promytí odtokové desky na filtračním papíru jako kapaliny, typicky zbývající v jamkách po mytí, může zasahovat do spodní substrátu a optické hustoty vzorku.
• Smíchání činidla z různých šarží.
• Kondenzace uvnitř jamek. Aby se zabránilo vzniku kondenzace by neměla otevření obalu do té doby, dokud se zahřeje na teplotu místnosti.