Vlastnosti protilátek aktivních center. reaktivita imunoglobulinů

metoda spin štítek nemá také pochopit rozdíly ve vlastnostech králičích protilátek na 2,4,6-trinitrofenyl (TIF) po primární a sekundární imunizace. Tyto protilátky byly zkoumány za použití liší v prostorové struktuře spinové značených TNP-hapteny jako EPR a ke snížení fluorescence kvantový výtěžek protilátky.

Bylo zjištěno, že protilátka, vzniká při primární a sekundární imunitní odpovědi jsou rozdíly ve struktuře aktivních míst. Komplexy primárních protilátek proti hapteny jsou méně tuhé a náchylnější k organickým rozpouštědlům a změny v sterických ligandy.

Piett a zaměstnanci (Piette e. A., 1972) zkoumali komplexy negativně nabité spin značené benzoát a kladně nabité komplexy spin-značený králičí trimetilfenilammoniya s vhodnými protilátkami. Podle EPR spektra, komplexy protilátky s negativně nabitými hapteny spin značené jsou přísnější než komplexy protilátek s kladně nabitou zvlákňovací značený hapten.
Kromě toho bylo zjištěno, že stupeň imobilizace N-O skupina spin-značený benzoát v aktivním vazebném místě pohybovala jednotlivě na různých králíků.

Hsia a Piette (Hsia, Piette, 1969) zkoumali zkříženou reaktivitu a strukturální heterogenitu králičí anti-DNP protilátky. Srovnávali EPR spektra protilátky izolované pomocí homologní DNP - (anti-A) a cross-hapten (anti-T) po interakci s spin-značené DNP (DNP-CM). Bylo zjištěno, že 59 gauss, komplexní spektrum Amax (anti-DNP + T CM) Amax EPR spektrum komplexu anti-DNP-D- a CM - 62 gauss.

Amax je funkcí času korelační a polarity prostředí N-O skupina (Hamilton, McConnell, 1970). Proto rozdíly v těchto EPR spektra může být v důsledku imobilizace nebo více N-O skupiny v komplexu (anti-DNP-D + OM), nebo její další hydrofobní prostředí. V každém případě, poukazují na strukturální rozdíly anti-D a anti-T aktivních center.

V další sérii pokusů zkoumaného komplexy anti-D homologní s DNP-SM a cross-spin značené hapteny ortho a para-nitrofenol: ONF-SM a SM-NNF. Amax kříž EPR spektra spin-značeného hapteny, ANE a LNF-SM-SM umístěna v aktivních místech, byl také vyšší než homologní DNP-CM.

Autoři to připisují skutečnosti, že homologní hapten Je umístěn v aktivním místě tak, že skupina označení N-O není přímo interagovat s aminokyselinovými zbytky aktivního místa. Na druhé straně, cross-haptenové komplexnější formy méně tuhé, při které je ochranná známka má větší stupeň volnosti, který umožňuje, že k interakci s hydrofobními částmi aktivního centra. EPR spektra spin značených haptenů kříž se liší od homologní statických přítomnost složek odpovídajících rychlejší otáčení.

Může to být způsobeno Existence rovnováha mezi těmito dvěma směry rotace mechepyh-hapteny v aktivních center či nerovné afinity pro různé populace protilátek specifických pro příslušný hapten.