Stanovení počtu krevních destiček v krvi

Stanovení počtu krevních destiček - klíčovou metodu výzkumu, který je schopen zjistit nejběžnější problémy s krevní hemostatické potenciálem - trombocytopenie. V současné době se pro stanovení počtu krevních destiček má několik laboratorních technik (automatizován Fonio et al.). Největší přesnost je mikroskopická metoda výpočtu kamery, ale tato metoda vyžaduje laboratorní lékař zkušenosti únavu očí, soustředění.

Principem metody

Princip metody je založen na stanovení počtu krevních destiček jejich počítání v Goryaev komoře nebo konvenční světelné mikroskopie použitím mikroskopu s fázovým kontrastem ředěním předpona krve po červených krvinek hemolýzy a šťavelanu amonného.

Aby se zlepšila přesnost metody počet mikroskopických destiček počítá v obou komorách, a poté se vypočítá aritmetický průměr.

Reakční činidla a zařízení

• 1% roztok šťavelanu amonného.
• Sali mixér.
• Goryaev komora (2 ks.).
• Světelným mikroskopem se zvětšením 40 x mikroskopu nebo s fázovým kontrastem prefix (např., CF 4 apod.).

Krevní vzorky pro výzkum

Stanovení počtu krevních destiček v krvi, případně stabilizované s citrátem sodným nebo uložených na stěnách plastové trubky jemný prášek, ethylendiamintetraoctové kyseliny (EDTA). Při použití mikroskopické metody se krev do citrátu sodného výhodné odstranění EDTA vliv na počet krevních destiček výsledky.

výkon technika

Suchá plastové trubky je vyrobena z 1,98 ml 1% šťavelanu amonného a 0,02 ml krve. Pomalu a opatrně se míchá po dobu 2 minut a pak se inkubuje 20 minut při teplotě místnosti. Dále, dvě komory naplněné obsahem Goryaeva zkumavek a na 10 minut umístí je do Petriho misky, která je za mokra nebo nasytí, gáza filtr. Po této inkubaci, která je potřebná pro sedimentaci destiček počítá počet 25 čtverců. Aritmetický průměr výsledků počítání v obou komorách vynásobené 1000. V důsledku šetření citrátové krve se zvýší o 10% a vynásobí 1000, který umožňuje korigovat ředění krve v roztoku citrátu sodného.

Video: Krevní destičky, plus zvýšené krevní destičky, po odečtení snížení krevních destiček v krevních testech

Vyhodnocení výsledků studie

U zdravého člověka se počet krevních destiček v periferní krvi pohybuje v poměrně širokém rozmezí - od 150 do 400 x 109 / L.

Nepřípustný studie se počet krevních destiček v krevních vzorcích v chladničce. Když hemolysis možné podcenění počtu krevních destiček. V některých případech, ve studii o počtu krevních destiček na hematologických analyzátorů pseudotrombocytopenie splňuje tzv vzhledem k agregaci krevních destiček a skupiny v přítomnosti EDTA. Tento problém je řešen v krevních vzorcích citrátu sodného.

Pro zajištění kontroly kvality při počítání počtu krevních destiček na hematologických analyzátorů, jsou kontrolní vzorky s různým obsahem těchto buněk. Na možnost použití těchto vzorků pro zajištění kontroly kvality při výpočtu počtu krevních destiček mikroskopických metod neexistuje žádná všeobecně uznávané doporučení. Pro zlepšení přesnosti výsledků mikroskopické vyšetření by měla pravidelně sledovat reprodukovatelnost stanovení počtu krevních destiček v různých laboratorních technik během pracovního dne a na základě přijatých dat pro zvýšení přesnosti a nižší variaci, když variační koeficient této techniky mikroskopické metody v experimentální laboratoři není vyšší než 10%.

Video: Praktické dovednosti ve fyziologii počítáním počtu červených krvinek

Interpretace výsledků průzkumu

Klinický obraz těžké idiopatické trombocytopenické purpury dominantní hemoragické syndromu. Při sekundární trombocytopenie hemoragický syndrom, obecně mírné, a v kombinaci s klinickými příznaky základního onemocnění, přispívají k trombocytopenie. V těch případech, kdy je počet krevních destiček je menší než 100 x 109 / l dlouho pozorované bez podkladových projevů onemocnění, je třeba myslet na idiopatické trombocytopenické purpury.

Trombocytóza je také pozorován v myeloproliferacemi. Často v pozadí mieloproliferatsii nesplnění povinnosti označit reologických vlastností krve splatnosti poliglobulii. V posledně uvedeném případě, stejně jako počet krevních destiček více než 700 x 109 / l u pacientů zvyšuje riziko trombózy. Nicméně proti myeloproliferativní onemocnění spojená trombocytóza 1500 x 109 / l, paradoxně hemoragické syndrom pozorovaný.

V přítomnosti trombocytopenie a hemoragické historii od raného dětství je velmi důležité odhadnout velikost krevních destiček v t. H. MPV (průměrný objem) v krevním nátěru, a také přítomnost vměstků v krevních destičkách.

Příčiny chyb

• Při použití jediné kamery, méně čtverce počítány.
• Nepřesnost kalibrace různých míchačky.
• Chyby Preanalytická fáze studie, ve Vol. H. špatném dávkování citrátu na odběr žilní krve.
• Nedostatečná kvalifikace laboratoři.

Další analytické techniky

Prakticky všechny hematologických analyzátorů dobře měřit počet červených krvinek a leukocytů, dobré výsledky jsou přesné a reprodukovatelné Způsob stanovení ukazuje, koncentrace hemoglobinu realizován v těchto zařízeních. Nicméně, v současné době existuje více analyzátory vzorky, které počtu destiček pro počítání trombocytopenie je nepřesné, a zpravidla je nadhodnocení počtu krevních destiček v automatizované počítání. Zejména jasně prokázaly, že tento nedostatek Při manipulaci se vzorky krve, ve kterých počet destiček pod 50 x 109 / L. Tato nevýhoda je důsledkem skutečnosti, že krevní destičky jsou mnohem menší, než u jiných krevních buněk, tak obtížné provést správný počet je ve stejné buňce a stejnou technikou jako ostatní krvinek. Je třeba také poznamenat, že počítání přesnost na destičce hematologické ukazatele analyzátor velmi významný vliv na kvalitu a spolehlivost použitých kalibrátorů. To je důvod, proč v obtížných situacích nebo diagnostických trombocytopenie v historii objasnit počet krevních destiček by měly být použity mikroskopické techniky.

Počítání krevních buněk barvených nátěrech mají nízkou přesnost a reprodukovatelnost, takže to nemůže být doporučen pro použití v moderních nemocnicích.