Hlavní přístupy pro prenatální diagnostiku genetických onemocnění. Přímá diagnostika genetických abnormalit.

Metody molekulární diagnostiky - hlavní produkt a primární struktura analytický nástroj, tj. sekvence nukleotidů v molekule DNA - genom základna (dědičný přístroj) člověk. První etapa velké International rozluštění molekulární strukturu DNA lidského výzkumného programu byla dokončena v roce 2000, což vytváří „návrh lidského genomu.“ V této sekci se omezíme na popisující základní principy metod DNA bázi. Podrobněji se technikou molekulární studie lze nalézt ve speciálních monografií a učebnic.

Na bázi DNA diagnostické metody, zaměřené na identifikaci mutace nebo molekulární mutovaný chromozom označení je polymerázová řetězová reakce syntézy DNA (PCR). Historicky starší metoda blot hybridizace Southern se v současné době používá mnohem méně často, i když se používají pro identifikaci určitých mutací, zejména dynamických mutace“, což vede k rozšíření onemocnění (syndrom fragilního X chromozomu, miotonicheskayadistrofiya, Huntingtonova chorea, množství neurodegenerativních onemocnění) a hemofilie a, a některé další nemoci.

Byla navržena metoda PCR v roce 1983 u amerického vědce Curry Mullis přiznané tohoto objevu Nobelova cena v roce 1993, způsoby jejich přípravy selektivně umožňuje (zesílený) in vitro relativně malé DNA segmenty a délku od několika desítek do několika kilobází, za použití templátu DNA z jakékoliv obsahující amplifikované sekvence.

potřebný Podmínkou pro PCR je znalost nukleotidové sekvence amplifikovaného DNA oblasti, jak je konkrétní volba místa se provádí hybridizací templátové DNA se dvěma uměle syntetizované primer - DNA oligonukleotidové sekvence, obvykle od 15 do 30 bp komplementární 3`-konci amplifikovaného úseku ke smyslu a antisense vlákna DNA, resp. Vzdálenost mezi primery určuje délku syntetizovaných molekul. Podrobnosti o Technika produkce PCR lze nalézt v příručkách.

PCR Ten se stal hlavním v molekulární diagnostiku genetických chorob. Vyvinutý a široce používané v praxi, různé varianty této metody, aby rychle a efektivně identifikovat mutace, studium DNA polymorfismů používaných pro molekulární označování mutantních chromozomů.

V současné době existují dva základní přístupy k prenatální diagnostiky, jakož i obecně diagnostiku genetických chorob:
- přímý diagnóza na základě okamžité identifikaci mutací v specifického genu;
- nepřímo (vedlejší) diagnostiky, který je založen na označování mutovaného genu (někdy označovaný jako označení „pacient“, chromozóm nesoucí mutantní gen) pomocí molekulárních markerů.

Přímá diagnostika genetických abnormalit

Prostřednictvím přímé diagnostice Identifikace mutací v genu. Výhody způsobu - vysoký (blížící se 100%) diagnostické přesnosti, možnost PD a informativní analýzu (vhodnosti pro molekulární diagnostiku) rodiny a identifikaci heterozygotních nosičů v nepřítomnosti dětského pacienta.

na žádné velké genové mutace To vyžaduje detailní molekulární analýza (skenovací) primární struktury genu pro detekci mutací, které lze připsat na nedostatky tohoto způsobu.

Základem jakékoliv monogenní nemoci jsou porušování genových funkcí, způsobené různými mutacemi v jeho sémantické části, tj, genová sekvence kódující proteinovou syntézu (cDNA). Typ a mutace spektra, stejně jako jejich fenotypovou expresi (závažnost choroby) jsou specifické pro každý gen, a je do značné míry dán unikátními vlastnostmi jeho primární struktury (nukleotidové sekvence).

Je také známo, že frekvence odlišná mutace v každém genu se liší. Tam jsou časté „vyšší moci“ mutace, diagnostická hodnota, která je zvláště vysoká, a „minor“ (single sporadický), registrace extrémně vzácné. Pro mnohé z genů zodpovědných za dědičných chorob, mutace spektra jsou dobře zkoumat a rozvíjet optimální algoritmy pro jejich identifikaci. Například, pozitivní na gen pro cystickou fibrózu je delF508 mutace, který se nachází v téměř 50% všech mutantů chromozomů u pacientů s CF v Rusku pro genovou fenylalanin - to R408W mutace detekována Y45% pacientů s fenylketonurií v Rusku, na gen pro dystrofin, které se vyznačují dostatečně velké delece, zaznamenány v 60% X chromosomů u pacientů s DMD, atd

více podrobností Algoritmy pro molekulární diagnostika paleta monogenních nemocí jsou uvedeny ve speciálních průvodcích, recenze.