Kombinovaná gen diagnostika onemocnění. Biochemické metody v prenatální diagnostiku.

V některých případech (žádné nebo částečné informativní) DNA diagnostika některých chorob To může být doplněna dalšími diagnostické studie. V případě hemofilie A možné přímo stanovit hladinu faktoru VIII srážení fetální pupečníkové krve po 20 týdnech těhotenství. DNA diagnostika může adrenogenitální syndrom doplněna bp přímé obsah vyšetřování 17-OH progesteronu v plodové vodě (AF). PD fragilního X chromozomu jsou často doplněny přímým cytogenetické analýzy pupečníkové krve lymfocytární kultuře diagnostice fetální DNA DMD v zásadě to může být doplněno imunocytochemie fetálních biopsií kosterního svalstva.

V případě Cystická fibróza více informací klubíčka mohou být získány biochemickou analýzu aktivity enzymu AF v 17-19 týdnech těhotenství. Rozvinutý a široce používané v naší laboratoři algoritmu PD cystickou fibrózou je znázorněno na obrázku.

Biochemické metody v prenatální diagnostiky

nezbytný omezení biochemické metody v PD je dobře známá skutečnost, že funkční stav, který může být rozhodčí nebo jiný orgán, plodu nebo systém až po porodu, když skončí proces terminální diferenciace buněk specializovaných tkání, na jedné straně, a je-li ukončení hovoru plod těle matky, která zajišťuje trofické a základní metabolické procesy ovoce, - na straně druhé. Tento nedostatek zbavena diskutováno dříve cytogenetických a molekulárních metod PD. Nicméně, biochemické a některé další výzkumné metody v některých případech ukázat jako užitečné při PD systému, ale hrát podpůrnou roli častěji. Nemůžeme však vyloučit, že alespoň o to více hluboké znalosti funkce genu, zkreslil počet zbrusu nový, identifikovaný v procesu provádění programu „Human Genome“, bude úloha biochemických metod PD zvyšovat.

Nejčastěji materiál pro biochemické studie V PD FS se získá amniocentézy. AJ je tvořen sekreční aktivitou amnion buněk v časné embryonální fázích vývoje, a na úkor primárního plodu moči - později. Kvantitativní a kvalitativní složení plodové vody je regulován složek systému amnion - matka - plod- porušením některého z nich vede k přebytku nebo nedostatku vody, má vliv na biochemické a buněčné kompozice AF.

rysy biochemických a buněčných složení AJ v různých fázích těhotenství podrobně popsány ve zvláštních zpráv a názorů.

Video: Genetický screening těhotných žen

Buňky v kapalném amnioticheskoi biochemické metody

Buňky používá AF a to nejen v PD pro cytogenetickou analýzou, ale i pro detekci některých metabolických chorob spojených s metabolickými defekty. AF neobdělávaných buňky mohou být použity pro některé dědičných PD metabolické vady (NDO) při použití histochemické a elektronovou mikroskopií techniky mají specifické vměstky, které jsou typické pro řady onemocnění skladování. Takové způsoby jsou popsány pro PD GSD II před tím, než diagnostika DNA dlouhá kultivační buňky AF byla hlavním předmětem PD NDO.

Hlavní podmínkou pro úspěšné PD NDO - přesný údaj o primární biochemické defektu je základem onemocnění. Většina NDO se dědí autosomálně recesivním způsobem, ve kterém jsou oba rodiče heterozygotní nositeli mutovaného genu, a 25% pravděpodobnost, může mít nemocných dětí.

biochemický screening v heterozygotní nosič pro většinu NGO není možné z důvodu nedostatku koncentrace středních hodnot studovaných proteinů jsou normální. Molekulární screening ekonomicky neodůvodněné, s výjimkou některých malých etnických skupin, ve kterých specifické mutace frekvenci podstatně vyšší než u obecné populace. Příklady jsou gangliosidóza typ GM2 IV-Židů ashke-nacistický, lysozomální onemocnění, jako je sialido z galaktosialidoza a které jsou častější u japonských a Italové.

Pro přesné PD NDO nedostatečná znalost klinickou diagnózou. I s dobře prozkoumaných příznaků onemocnění, jako je počet a glikolipidozov mukopolysacharidóza, existují rozdíly v důsledku odlišné primární biochemického defektu. Příklad biochemické heterogenity je vyjádřena GSD I. typu I přeběhnout Avyzvan glukóza-6-fosfatázy, zatímco když je typu B a C tohoto onemocnění dysfunkce způsobené nepřítomností jiných enzymatických proteinů, které jsou nezbytné pro normální metabolismus glukózy-6-fosfatázy, a to specifické translokáza. Když je tato aktivita enzymu studoval jeden z rodičů, může být buď v podstatě nad nebo pod průměrem, a sotva se liší od úrovně určené z pacienta. Takové psevdonedostatochnost popsáno, zejména pro Globoidní leukodystrofii.

Taková variabilita podstatně snižuje účinnost PD biochemické metody. Pro úspěšné PD v těchto případech, zejména důležité informace o defektního enzymu nebo proteinové exprese v různých tkáních. Tato informace určuje výběr optimálního objektu PD biologické. Primární biochemický defekt studována v různých tkáních jen pro určité skupiny enzymů (například lysozomální hydrolázy). Dále je známo, že aktivita mnoha enzymů se může měnit v různých buněčných tkáních v pre- a postnatálním období.

Metody stanovení Biochemická porucha obvykle spojené buď s hodnocením aktivity enzymu nebo identifikaci jiných proteinů podílejících se na enzymatické reakce, nebo se některé výrobky, které se hromadí v důsledku enzymatického bloku. V řadě speciálních edicích najdete podrobný popis diagnostických metodách, jak dlouho známá a relativně nedávno vyvinuté.

Hlavními dědičných chorob, pro které PD je možné na základě biochemické studie AF AF buňky nebo kompozice jsou uvedeny v tabulce.

Video: Jaký je screening. Léčebna pro screening

každý z nozologických subjekty uvedené nemoci odpovídá primární biochemického defektu, tedy Narušení z odkazu metabolismu a objasnění, z nichž je hlavním úkolem biochemické diagnostiky.

Vzhledem k rychlému hromadění znalostí o lidském genomu, identifikace nových genů, studie mutací a polymorfismů, na jedné straně, složitost a nejistoty často biochemické výsledky nepřístupností specifické substráty - s další diagnostiky rostoucím počtem dědičných metabolických poruch se provádí pomocí více univerzální a přesné metody molekulární analýzy. Seznam NGO, které se vyvíjely molekulární diagnostické metody jsou uvedeny v monografii VN Gorbunova a B. C. Baranova.

Nicméně, některé proteiny AF, zejména tak zvané embriospetsificheskie proteiny, tj, Proteiny specifické pro plod a nejsou obvykle syntetizovány v matce udržet velkou diagnostickou hodnotu. Tyto proteiny je třeba nejprve zahrnovat alfa-fetoprotein (AFP), acetylcholinesterázy, plodu střevní mikroklků proteinů a steroidní hormony.