Konformennaya model imunitních komplexů. Interakce protilátek s antigeny

Tvar EPR spekter IgG a jejich podjednotky, spin-značený rlf pravděpodobně v histidinových zbytků, může být způsobeno z následujících dvou důvodů, a jejich kombinace.
1. Spektra jsou výsledkem superpozice dvou spekter, které odpovídají dvěma různým vazebných místech různými značkami mikroprostředí.
2. EPR spektrum každé značky určené schopnost být ve dvou různých mikroprostředí. Toto vysvětlení zahrnuje schopnost Fab fragmentů a dimerů lehkého řetězce kvartérní změny struktury v Brownova pohybu domén. Tak-EPR složky spektra odpovídají kompaktnější konformer A (imobilizovaná štítek), a B-součásti v souladu s méně kompaktní konformer B (tagy volnější rotace).

První vysvětlení není uspokojivý, protože interakce spin-značené protilátky na antigen není pouze zvýšení imobilizace značek v A stavu, ale také ke zvýšení množství označených v tomto stavu.

Výše uvedené experimentální skutečnosti dobře interpretovány pomocí "konformační modelu“. Postačuje předpokládat, že interakce aktivního místa s antigenní determinant v důsledku reorientace a stabilizace V-domény rovnovážné posunu dochází mezi A- a B-konformery Fab fragmentů za konformerů směru A a zvýšení jeho kompaktnost.

Údaj o správné konformační modelu je zmizení Součástí ESR spektra spin-značený L-řetězce na jejich rozdělení na dvě poloviny, r. e. s ztrátou jejich schopnosti být ve formě A-konformeru.

Již dříve jsme navrhli hypotéza, že stabilizace a doména přeorientování pod vlivem antigenních determinant pro vyvolání změny v povaze relativního pohybu všech ostatních členů domény molekuly IgG (Kaivarainen et al., 1973). To by mělo vést ke změně v konformaci, a to nejen FAB a Fc-podjednotky, ale také s ohledem na změny v interakci mezi podjednotkami. Tato hypotéza je nyní potvrzena studií uvedených výše, s použitím způsobu podle malého úhlu rozptylu rentgenového záření a fluorescenční polarizace metoda kruhový.

Správnost našeho interpretace procesy probíhající IgG molekuly za vzniku imunitní komplex s antigenem, se potvrzuje i práce na kinetiku této reakce. Zkoumali jsme intenzitu a polarizaci fluorescence v reakci mezi haptenem fluoresceinu (F) a homologní protilátky (AT) (Levison např. A., 1975) ve statickém režimu a způsobu zastaveného toku. Bylo zjištěno, že tento proces je ve dvou fázích.

tvoření meziprodukt komplex v ... T vyznačující se druhého řádu rychlostní konstanty, je rychlý a je dokončena v 0,3 sekundy poté, co mícháním reagentů. Proces AT ... T-> AT-G má rychlostní konstanta prvního řádu a plně dokončena až po 60 minutách. Druhá etapa vysvětlit pomalé konformační změnu v molekule protilátky, který může být doprovázen desorpce vody. Je zajímavé, že pomstít neutrální ionty zvyšují rychlost asociační konstanta v souladu s řadou Hoffmeistera.

Práce na studium kinetiky interakce IgA myelom manometr (MOPC 460) s DNP-Lys (Lancet, Pecht, 1976) interpretace výsledků je téměř shodný s dříve námi pro IgG. Autoři dospěli k závěru, že molekula (MOPC 460) existovat jako dva konformery na volný a vázaný na hapten stavu.

Hapten vazebné změny rovnovážná konstanta mezi konformery. Ve výše uvedené práci dvoustupňovou reakcí je detekován - rychlé a pomalé, jsou v souladu s našem modelu znamená změnu orientace a stabilizující variabilní domény (první stupeň) a relaxační proces, což vede k rovnovážné posun mezi A a konformerů B FAB-fragmentů straně kompaktního A -konformera (druhý).