Stanovení hladiny LH a FSH. analýzy

Vývoj vysoce specifické immunoanalizatorov ke stanovení koncentrace gonadotropiny To bylo spojeno s obtížemi kvůli vysoké homologie glykoproteinové hormony a podjednotky nezbytné pro oddělení volného a neporušený hormon. Zkřížená reaktivita s a-podjednotky také přesné měření nemožné hladiny LH a FSH metodou RIA za použití polyklonálních protilátek. Dále je známo, mikroheterogenity gonadotropiny umístěné jak v hypofýze a v volného pohybu vzhledem k různým stupněm glykosylace.

variabilita oligosacharidu komponenty a také způsobuje obecnou strukturu náboje mikroheterogenity proteinu, které vede ke vzniku syrovátky izoforem electrofocussing oddělitelné při pH v rozmezí 6,5-10,0. I když je klinický význam tohoto mikroheterogenity cirkulující izoformy zůstává neznámý, ovlivňuje imunoreaktivita na stanovení jejich koncentrací za použití různých protilátek, což vede k variabilitě výsledků různých imunologických testů.
microheterogeneous také ovlivňuje biologickou aktivitu, což vede k nesouladu výsledků imunologických a biologických testech.

Dalším problémem je nedostatek vhodných referenčních příprav imunologické a biologické testy. Mezinárodní Referenční příprava (MEP) přečištěné lidské menopauzální gonadotropin (hMG), odvozený z moči ( „druhá hMG MEP“), byla schválena Světové zdravotnické organizace (WHO) je široce používán pro většinu imunologických a biologické testy. Charakteristika IEP zavedené biologické zkoušky, byly základem veškeré následné výrobě vyčištěných přípravků hypofýzy například mezinárodní normy (MS), WHO ( „druhá MS“). Největší průmysl produkuje analyzátory jsou standardizovány na „druhé čs.“

Nicméně, i když na obrázcích biologická aktivita a standardizována v souladu s MEP nebo MC imunoreaktivita různých panelů pro analýzu se liší v závislosti na specifických protilátek v nich používaných.

V posledních letech byl vyvinut Dvoustupňový způsob zaměřen IRMA (IRMA), nebo immunohemilyuminestsentnogo (Icha) analýza pas na bázi použití dvou monoklonálních protilátek. Tyto techniky umožňují obejít mnoho nevýhod RIA. Všechny testy jsou automatizované a extrémně přesný - chyby se blíží 0,1 mIU / ml. Navíc, jejich výsledky nejsou ovlivněny přítomností volně a subednnits a lépe korelují s biotestu. Vzhledem ke své vysoké citlivosti, mohou být tyto zkoušky provedeny na začátku dospívání k detekci malých koncentrací hormonů.

V biotestů PH použité rozptýlené Leydigovy buňky myší / potkanů ​​a leydigomy linie (MA-10), buňky v kultuře a in vitro produkci testosteronu měřené. Tyto testy vyhodnotit biologickou aktivitu cirkulujícího LH za fyziologických podmínek. To je důležité, protože biologická aktivita LH se mění s abnormálními poruchami glykosylace a jeho terciární struktury molekuly. Kombinace biologické zkoušky a RIA umožňuje vypočítat poměr bioaktivitu a imunoreaktivity, což dobře odráží index kvantitativních změn LH molekuly.

Navzdory skutečnosti, že profily LH bioaktivita a imunoreaktivita, mají tendenci být úzce koreluje s řadou fyziologických změn, za určitých patologických stavů, existují podstatné rozdíly mezi nimi. Například inaktivační mutace FGR-podjednotky genu vede ke zvýšení imunoreaktivity LH, ale významně snižuje jeho biologickou aktivitu. V biologických testech pro stanovení aktivity FSH in vitro za použití granulosa buňky, nebo krysa Sertoliho buněk, jak je měřeno cAMP produkce nebo aktivity aromatázy v reakci na stimulaci s FSH. Citlivost těchto zkoušek je asi 2,5 mIU / ml. Navzdory skutečnosti, že in vitro biologické zkoušky mají nějakou hodnotu pro studium fyziologie hormonů, jejich rutinní klinické použití je problematické vzhledem ke složitosti a významných časových nákladů.

měření hladiny FSH a LH používá v diagnostice funkčních poruch pohlavních žláz. Zvýšená koncentrace FSH je obvykle pozorována, když ovariální selhání, ale také se vyskytuje u pacientů s životaschopných folikulů. Občas gonadotropiny zvýšení hlasitosti gonadotropinsekretiruyuschimi spojené s nádory hypofýzy nebo ektopických nádorů gonadotropinprodutsiruyuschimi.

Pokud se u pacienta s amenorea ukázalo zvýšení LH při normální FSH s LH poměr FSH / >2 (běžné, ale volitelná funkce), může se předpokládat PCOS. Nízké hladiny těchto hormonů dochází v hypofýzy nebo hypotalamu dysfunkci a v kombinaci s poklesem hladiny estradiolu. Pro vyhodnocení hloubkového hypofýzy rezervy je nutné provést provokační zkoušky s GnRH. Koncentrace LH a FSH stanovena po 20 a 60 minut po intravenózním podání 100 mg GnRH. Selhání odpovědi na zavedení GnRH dochází v hypogo- gipogonadizme- ale citlivost a specifita tohoto testu je provokativní nízká u pacientů léčených exogenní pohlavních hormonů.

Video: Koklyaev: PKT # 1 [Testy po kurzu]