Obtíže a chyby v měření určitých hormonů

Měření hladiny hCG v moči séra - nejběžnější laboratorní testy v gynekologické endokrinologii. Tam imunochemické zkušební systém měří koncentrace pouze intaktní hCG molekuly (dimeru sestávající z a - podjednotek) (? I volně a členové dimer), je koncentrace pouze volných podjednotek a koncentrace všech podjednotek. Třetím typem testovacích systémů poskytuje nejvíce poučné výsledky a používá nejčastěji. Dokonce i v těch nejlepších testovacích systémech v 1% případů, je křížová reakce s LH, tak se úroveň výsledků měření podjednotky hCG v nízkých koncentracích (< 5 МЕ/л) могут быть недостоверными Фолликулостимулирующий и лютеинизирующий гормоны. Для измерения уровне ФСГ и ЛГ разработано множество тест систем на основе РИА, иммунохемилюминесцентного анализа, ИФА. Все эти тест-системы обладают высокой чувствительностью и специфичностью, но откалиброваны они по разным эталонным стандартным образцам. В некоторых эталонных образцах биологическая активность ФСГ и ЛГ не соответствует их иммунореактивности. Если при калибровке тест-системы был использован подобный эталонный образец, то эта тест-система будет давать ложноположительные или ложноотрицательные результаты.

Prolaktin. Testovací systémy pro měření prolaktinu také mají velmi vysokou citlivost a specifičnost. Návod do zkušebního systému, ve většině případů jsou normální koncentrace prolaktinu rozsahy pro normální doba měření (mezi 8:00 a 11:00). Mezitím se hladina prolaktinu v séru kolísá během dne. Zejména v časných ranních hodinách tam prolaktinu sekrece vrcholu. Pokud prolaktinu měří v průběhu těchto hodin, jeho hladina v porovnání se standardem uvedené v pokynech může být nesprávně považovány za zvýšené. Po mnoho let se věřilo, že palpace prsu, jakož i příjem zbavit bohatý na tyrosin, tryptofan nebo arginin stimuluje sekreci prolaktinu a hyperprolaktinemie napodobovat. Nedávná studie, kterou naše skupina odmítá tyto myšlenky.

Thyroidin hormonů a TSH. Metody měření těchto hormonů jsou vylepšil nejlepší. Široce dostupné vysoce citlivý testovací systém pro stanovení celkového a volného T3 a T4. Testovací systém pro měření s ultra vysoce citlivosti TSH - s femtomolární rozsah. Tento arzenál testovací systémy s vysokou přesností diagnostikovat jako je hypotyreóza a tyreotoxikózy.

Video: Co když se při každém spuštění aplikace Word spustí přizpůsobení Office

Estradiol. Tento hormon je přítomen v séru především vázané formě, a to v komplexech s albumin a SHBG, jakož i v konjugáty kyseliny glukuronové a síranu. Podíl volného estradiolu je menší než 3% z celkového obsahu v séru. Pouze volný estradiol je spojena s intracelulárním estrogenové receptory, a tím reguluje mnoho procesů v reprodukčním systému, jako je například sekrece LH a FSH z hypofýzy a vývoj folikulů ve vaječnících. Proto, aby posoudila reprodukční funkci nejdůležitějšího měření hladiny volného estradiolu. Koncentrace volného estradiolu v séru malé: u žen v plodném věku, které se liší v závislosti na fázi menstruačního cyklu, v rozsahu od 25 do 450 ng / l, u dívek v různých fázích puberty - od 3 do 45 ng / ml, a po menopauze obvykle pod 30 ng / ml. Proto je diagnóza poruchy sexuálního vývoje u dívek a neplodnosti u žen, stejně jako průzkum žen po menopauze je třeba mít na paměti, že imunochemická testovací systém pro měření estradiolu, které se používají ve veřejných a soukromých klinických diagnostických laboratoří mohou mít nedostatečnou citlivost. Kromě toho, výsledky měření estradiolu u jednoho a téhož pacienta v různých laboratořích se může široce měnit.

Dokonce i v těch citlivých a specifických imunochemických testovacích systémů pro měření volného estradiolu v 1-2% případů je křížová reakce s navázaným estradiolu. Tento příčný reakce může vést k falešně pozitivním výsledkům, jestliže se zvýší množství estradiolu (např., S přebytkem tvorby jeho konjugáty). Nejvíce citlivý a specifický způsob pro měření volného estradiolu - tandemová hmotnostní spektrometrie před chromatografickou separaci navázaného hormonu, ale tato metoda je složitá, časově náročná a je k dispozici pouze na specializovaných laboratořích. V poslední době estrogenové receptory ve vnější buněčné membráně určitých buněk byly objeveny. S největší pravděpodobností se receptor ovlivňuje nejen zdarma, ale také v souvislosti s estradiolem. Proto jsou výsledky měření volného estradiolu nemusí odpovídat celkové biologické aktivitě estradiolu v séru.

Video: prostatitis pool

Další steroidní hormony. Vše, co bylo řečeno o složitosti měření estradiol, platí i pro ostatní steroidní hormony, jejich prekurzorů a metabolitů. Například, testosteron cirkuluje v krvi, převážně ve formě komplexů s SHBG a kortizol - jako komplexy s proteinem transkortin. Proto se v klinické diagnostické laboratoře používat imunochemickou testovací systém dvojího druhu: pro měření celkového testosteronu nebo kortizolu a pro měření volných hormonů. Největší obtíže při měření volného testosteronu. Referenční způsob je považován za hmotnostní spektrometrie před separační chromatografické volného a vázaného hormonu, ale tato metoda je k dispozici pouze na specializovaných laboratořích. Široké diagnostické laboratoře pro měření volného testosteronu na středním 2000s s výhodou použít metody RIA s předchozí extrakcí sérového volného testosteronu, za použití organických rozpouštědel. Výsledky RIA byly velmi blízké vlastnostem metody hmotnostní spektrometrie. Nicméně, RIA byl vyloučen ze všeobecného laboratorních postupů a analýzu immunohemilyuminestsentnym a FA. Tyto metody často produkují falešně pozitivní výsledky, zejména při měření vzorků s nízkou koncentrací testosteronu. Tuto skutečnost je třeba vzít v úvahu při posuzování volné hladiny testosteronu u žen, chlapců u prepubertálních a počátkem puberty u mužů s podezřením na dysfunkcí Leydigových buněk. Je třeba poznamenat, že vývoj a aplikace metod pro imunochemické analýzy steroidních hormonů, existují i ​​jiné problémy. Například, při přípravě steroidních primárních protilátek se zlepšila jejich imunogenicity byly konjugovány je s různými nosiči, jako je methylovaný albumin. Při vytváření testovacích systémů založených na RIA steroidy tagu ³H nebo ¹⁴C (protože nemohou být označeny ¹²⁵I). Proto laboratorní použití jako testovací systém musí mít scintilačního počítače částic.